阿霉素肾病小鼠病理机制中白细胞介素-18水平分析

目的探讨白细胞介素-18(IL-18)在阿霉素肾病模型(微小病变型肾病,MCN)小鼠病程中的免疫失调作用。方法采用阿霉素单次尾静脉注射昆明种小鼠,诱导形成微小病变型肾病模型,设置模型组、生理盐水对照组和IL-18mAb抗体中和实验组(mAb)。测定3组小鼠第1、2、4、6周24h尿蛋白(24hUPQ)水平;于第42天时心脏采血法留取血清,检测模型组与对照组血清总蛋白(TP)、清蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(Tch)的水平;取单侧肾做病理检测,同时制备脾淋巴细胞悬液、肾组织匀浆液检测3组IL-18、γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及IL-4水平。结果模型组小鼠从注射阿霉素第2周起,24hUPQ值均高于对照组,差异均有统计学意义(P0.01);血清TP、ALB、BUN、Cr、Tch、TG结果和病理诊断结果显示,模型小鼠出现低蛋白血症、高脂血症等类肾病综合征症状。检测显示模型组小鼠血清、肾组织匀浆上清液、脾淋巴细胞培养上清液IL-18、INF-γ、TNF-α水平均高于对照组,而IL-4水平均低于对照组,组间比较差异均有统计学意义(P0.01)。mAb组小鼠24hUPQ及IL-18、IFN-γ、TNF-α水平均低于模型组,组间比较差异有统计学意义(P0.01)。结论模型小鼠病程中,Th1类细胞因子分泌增强,Th2类因子受抑制,且IL-18mAb起到部分中和内源性IL-18的作用,表明IL-18是小鼠MCN病程中重要的免疫失调因子。     

鞘内注射阿霉素后离断三叉神经治疗带状疱疹后疼痛

目的观察阿霉素对三叉神经分布区带状疱疹后疼痛(PHN)的镇痛效果。方法对24患者用1%阿霉素直接注射至PHN相应分支的神经干,观察皮肤症状和异常性疼痛,于术后3d、7d、3个月进行评价。结果术后取得了95.8%的疗效,术后3d有效17例,缓解5例,无改善1例;术后7d有效23例,无效1例;术后3月有效23例,无效病例失访。有效病例在3～24个月内均无复发。结论阿霉素神经鞘内注射后,能有效的消除三叉神经分布区PHN,近期疗效较好。     

脂质体阿霉素对大鼠三叉神经形态与功能影响的实验研究

目的 :观察脂质体阿霉素对大鼠三叉神经形态与功能的影响。方法 :3 3g/L脂质体阿霉素直接注射于大鼠一侧眶下神经束 ,对侧以生理盐水对照。神经电生理检查给药后大鼠的二腹肌肌电的变化 ,光镜下观察实验侧三叉神经节细胞的形态学变化 ,透射电镜观察三叉神经节细胞的超微形态结构变化。结果 :神经电生理结果显示动物对针刺反应不敏感 ,并显示不同时间左右两侧潜伏期 (ms)及痛阈 (mA)的变化都有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;实验侧光镜下可见大量细胞皱缩 ,形态不规则 ,细胞周围出现空隙 ;电镜下可见胞质中出现不规则的电子致密物质 ,线粒体、高尔基体、粗面内质网、核膜、有髓神经纤维髓鞘和无髓神经纤维病理性改变。结论 :脂质体阿霉素注入神经干后 ,可以选择性破坏相应的节细胞 ,引起神经功能上的变化。     

大鼠眶下孔注射高渗盐水阿霉素后三叉神经节的病理变化

目的：本实验旨在研究大鼠眶下孔注射高渗盐水阿霉素后,三叉神经功能和三叉神经节细胞病理形态的变化。方法：48只SD大鼠,随机分为A、B两组,每组24只,每组又分四个时间点：1周组,2周组,1月组,3月组取材,每时间点6只大鼠。将A、B组分别给予10%NaCl和1%阿霉素的混合溶液10μl眶下孔注射,生理盐水10μl眶下孔注射（B组）每组给药后于1周、2周、1月及3月时测试各组剩余大鼠的触须垫感觉功能,后处死取三叉神经节标本,制作H E染色切片,分别观察神经节细胞的形态学变化,用等距随机抽样法记录节细胞总数及异常节细胞率。结果：各组动物感觉功能测试,A、B组同时间点有统计学差异（P〈0.01）,眶下孔内神经周围注射高渗盐水阿霉素溶液后A 1-A 4组节细胞总数呈递减趋势（同组各时间点分别比较,P〈0.01）,显著低于B组同时间点（P〈0.01）,而与B组各时间点相比,无统计学差异（P〉0.05）;异常节细胞率A 1-A 4组呈递增趋势（A组各时间点相比（P〈0.01）,显著高于B组同时间点（P〈0.01）。结论：大鼠眶下孔内神经周围注射高渗盐水阿霉素后,阿霉素可在高渗盐水的作用下被神经纤维大量吸收并进一步逆行运输到三叉神经节,随着时间的延续引起三叉神经节细胞的渐进性退变。     

α‐Actinin‐4 is involved in the process by which dexamethasone protects actin cytoskeleton stabilization from adriamycin‐induced podocyte injury

Aim: Glucocorticoid therapy has been used in childhood nephrotic syndrome since the 1950s, where the characteristic change is effacement of the actin‐rich foot process of glomerular podocytes. Recent studies have shown that glucocorticoids, in addition to their general immunosuppressive and anti‐inflammatory effects, have a direct effect on podocytes, regulate some apoptotic factors, and increase the stability of actin filaments. However, the precise mechanism(s) underlying the protective effects of glucocorticoids on podocytes remain unclear. It is known that adriamycin (ADR) can induce podocyte foot process effacement and trigger massive proteinuria in rodent models. However, few reports have examined the direct role of ADR in podocyte actin rearrangement in vitro. In this study, we investigated how ADR directly induced podocyte actin cytoskeleton rearrangement and further analyzed how dexamethasone prevented such injury. Methods: We used confocal microscopy to assess podocyte actin rearrangement. Western blot analysis and real‐time polymerase chain reaction were performed to measure the protein and mRNA levels of α‐actinin‐4. Results: We demonstrated that there was a time‐dependent ADR‐induced podocyte actin rearrangement with less than 12 h of ADR treatment in cultured podocytes. Dexamethasone could protect podocytes from ADR‐induced injury and also stabilize the expression of α‐actinin‐4. Conclusion: This study showed that dexamethasone had direct effects on podocytes: α‐actinin‐4 may be one of the potential target molecules.     

川芎嗪对阿霉素诱导的大鼠心肌重塑中TGF-β1表达的影响

目的:研究川芎嗪对阿霉素(ADM)诱导的大鼠心肌重塑的影响及是否通过改变TGF-β1的表达产生作用。方法:SD大鼠随机分为正常对照组(NC组,n=8;生理盐水2 m L/kg腹腔注射)、模型组(ADM组,n=9;ADM 2mg/kg腹腔注射)、川芎嗪治疗组(Lig组,n=11;ADM 2 mg/kg+磷酸川芎嗪20 mg/kg腹腔注射)3组。测定各组SD大鼠心重指数(CWI)、左室心脏重量指数(LVWI),光镜下观察心肌病理学变化,免疫组化方法检测各组大鼠心肌组织中Ⅰ、Ⅲ型心肌胶原的表达,Western blot方法检测各组大鼠心肌组织中TGF-β1蛋白的表达。结果:3组大鼠间的心肌纤维化病理改变不同,CWI、LVWI、心肌组织中Ⅰ、Ⅲ型心肌胶原蛋白、Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白比值及TGF-β1蛋白的表达差异有统计学意义(F=5.971、5.556、51.740、57.281、28.934和61.263,P<0.05)。与ADM组相比,Lig组大鼠的心肌纤维化病理改变明显减轻,CWI、LVWI、心肌组织中Ⅰ、Ⅲ型心肌胶原蛋白、Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白比值及TGF-β1蛋白表达明显下降(P<0.05);Lig组大鼠的心肌组织中Ⅰ、Ⅲ型心肌胶原蛋白、Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白比值及TGF-β1蛋白的表达仍高于NC组(P<0.05)。结论:川芎嗪能改善阿霉素诱导的大鼠心肌重塑,其机制可能与影响TGF-β1的表达有关。     

蒸馏水与其化疗药物溶液对胃癌MGC-803细胞作用1分钟的灭活效果比较

目的：观察常温蒸馏水、温热蒸馏水和常温蒸馏水加不同化疗药的溶液短时间（1分钟）作用于胃癌细胞MGC-803的结果，从中筛选出能杀灭癌细胞的最低冲洗浓度，为临床胃癌术野的蒸馏水化疗药物冲洗提供实验依据。方法：选取常见胃癌细胞MGC-803为实验对象，以蒸馏水（DW）、43℃温热蒸馏水（HDW）和常用化疗药阿霉素（ADM）、顺铂（DDP）、5-氟尿嘧啶（5-FU）与蒸馏水混合溶液作为干预方法，分别以不同浓度（DW＋ADM/DDP/5-FU：10/10/50μg/ml、20/20/100μg/ml、40/40/200μg/ml、80/80/400μg/ml、160/160/800μg/ml、320/320/1600μg/ml、640/640/3200μg/ml）的水溶液作用细胞1分钟并用培养液继续培养72小时后进行细胞形态学及MTT实验。结果：蒸馏水化疗药溶液相对于单纯蒸馏水和温热蒸馏水对胃癌细胞具有更强的杀伤作用，结果具有统计学意义（P＜0．01）；筛选出3种化疗药物的最低完全抑制浓度（抑制率＞90％），分别为：ADM 160μg/ml、DDP 320μg/ml、5-FU 1600μg/ml。结论：蒸馏水化疗药溶液相比于单纯蒸馏水及温热蒸馏水可明显增加对胃癌细胞的杀伤作用，筛选出的蒸馏水化疗药溶液最低浓度可对临床胃癌手术以及其他癌症手术术野冲洗液的选择提供一定的实验依据。     

Acute effect of calcium channel blockers on adriamycin exposed isolated adult cardiocytes

Summary When tested with isolated, calcium-resistant resting rat cardiocytes in an in vitro assay system, adriamycin exerted a dose-dependent cytotoxic effect which could easily be assessed by the ATP depletion of the heart cells and the loss of vitality as monitored by morphological changes (blebbing, spherical contraction). Apart from extremely high non pharmacological concentrations of verapamil and diltiazem, both calcium antagonists left the cardiocytes intact and without loss of internal ATP when given alone to the medium. Coincubation of adriamycin and verapamil or diltiazem did not increase adriamycin toxicity to the cardiocytes; instead a remarkable ATP preservation by verapamil could be demonstrated when both drugs (adriamycin and verapamil) were incubated simultaneously with the heart cells. This acute protective effect was limited in time and could no longer be detected after 9 hours. Diltiazem in coincubation experiments exerted neither a toxic nor an acute protective effect on adriamycin-exposed heart cells.Devoted to my distinguished academic teacher in cardiac physiology Prof. Dr. Ruthard Jacob on the occasion of his 60th birthdaySupported in part by DFG-grants MA 780/1-5     

原代培养的心肌细胞中毒性心肌炎模型的建立

目的 为阿霉素(ADR)中毒性心肌炎机制的研究及药物治疗提供依据.方法 取0～2日龄sD乳鼠原代心肌细胞培养,观察ADR不同浓度(0.01、0.1、1、10、100μg/ml)及不同作用时间(1μg/ml ADR作用24,48,72h)对心肌细胞存活率及培养上清液乳酸脱氢酶(LDH)、谷草转氨酶(GOT)水平的影响,并检测细胞搏动频率.结果 不同浓度ADR均可降低细胞存活率,但10 ng/ml作用后存活率明显降低,呈浓度依赖性.不同浓度ADR均可升高LDH和GOT释放量,亦呈浓度依赖性;随ADR作用时间延长,心肌细胞存活率降低,LDH和COT升高,呈时间依赖性.结论 ADR对原代培养的心肌细胞可造成氧化损伤,损伤程度与ADR浓度及作用时间呈正比.     

磷酸肌酸对阿霉素致大鼠心肌损伤的保护作用及其抗细胞凋亡的实验研究

目的通过建立大鼠阿霉素心肌损伤模型,观察磷酸肌酸对阿霉素心肌损伤的保护作用,并研究磷酸肌酸抑制心肌细胞凋亡的机制。方法采用随机分组的方法将40只SD大鼠分为4组。（1）对照组：腹腔注射生理盐水每日一次;（2）阿霉素组：隔日一次腹腔注射阿霉素建立阿霉素心肌损伤模型。（3）阿霉素＋磷酸肌酸钠组（小剂量）：隔日一次腹腔注射磷酸肌酸钠（200mg/kg）,30min后注射阿霉素。（4）阿霉素＋磷酸肌酸钠组（大剂量）：隔日1次腹腔注射磷酸肌酸钠（300mg/kg）,30min后注射阿霉素。用药结束后测定各组大鼠血清、心肌组织中丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、过氧化氢酶（CAT）活性,血清中肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）含量变化。取心肌组织HE染色,观察大鼠心肌病理形态学变化。免疫组织化学染色方法检测各组心肌组织中BAX、BCL-2蛋白表达情况。结果两组加入磷酸肌酸钠大鼠脂质过氧化产物MDA含量减少,心肌抗氧化酶SOD及CAT活性增加,血清中CK、CK-MB含量减少,与阿霉素组比较有统计学意义（P〈0.05）。免疫组化结果显示,磷酸肌酸钠组大鼠心肌促凋亡蛋白BAX表达减弱,抗凋亡蛋白BCL-2表达增强,且与阿霉素组比较有意义（P〈0.05）。给予不同剂量磷酸肌酸钠的两组大鼠,各项检测指标未见差异（P〈0.05）。结论磷酸肌酸通过增强抗氧化酶系统的功能,降低阿霉素引起的氧化应激损伤,抑制自由基引起的心肌细胞凋亡,起到保护心脏功能的作用。