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为深入研究滤泡辅助性T细胞(Tfh)的分化调控机制,比较并建立了人Tfh细胞体外诱导分化的模型:分别采用外周血淋巴细胞直接分离以及磁珠分选后的细胞诱导分化,比较不同来源Naï;ve T细胞的分化结果,同时探究了TCR刺激信号anti-hCD3e的固相包被与可溶性刺激对分化效率的影响,并考察极化因子IL-12不同浓度诱导Tfh细胞分化效果,利用流式细胞术检测Tfh分化效率(CD4+CXCR5+ICOS+PD-1+),结合ELISA法检测Tfh标志细胞因子IL-21的表达水平,最终确定了5 μg/mL anti-hCD3e抗体预包被4 ℃过夜,磁珠分选后的T细胞在IL-12终浓度为1 ng/mL时与其他极化因子诱导分化6 d后,分化水平可达20.4%,初步建立了人Tfh细胞体外诱导分化最佳条件,为探讨人Tfh细胞分化机制及相关的靶向Tfh的分子药效、毒性与细胞水平的代谢实验提供了有效的检测平台。  相似文献
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