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1985年 | 3篇 |
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1.
目的探讨鞘氨醇激酶1(SPHK1)在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达及对IHH4细胞侵袭和迁移的影响。方法采用免疫组化检测110例PTC组织及癌旁组织中SPHK1的表达,分析SPHK1表达与其临床指标的关系。采用小干扰RNA-SPHK1转染PTC细胞系IHH4,Transwell实验和细胞划痕实验分析其对IHH4细胞侵袭及迁移的影响。采用Western blot法检测MMP-2和MMP-9蛋白表达情况。结果 SPHK1在PTC组织中的阳性表达率高于癌旁组织[47.27%(52/110)vs.11.82%(13/110)](P<0.05)。SPHK1表达与包膜侵犯和淋巴结转移密切相关(P<0.01)。干扰SPHK1后,侵袭和迁移细胞数目减少(P<0.05),MMP-2和MMP-9蛋白表达降低(P<0.05)。结论 SPHK1在PTC组织中高表达,与IHH4细胞的侵袭和迁移密切相关,可能是通过MMPs信号通路发挥作用。 相似文献
2.
目的 研究桑皮苷A对人白血病耐药细胞K562/阿霉素耐药细胞(K562/ADM)化疗耐药的影响。方法 实验分为溶媒(DMSO)对照组、阳性对照组(10μmol·L-1维拉帕米处理48 h,再用5μg·mL-1阿霉素孵育1 h或2μg·mL-1罗丹明123孵育1.5 h)、阿霉素单用组(5μg·mL-1阿霉素孵育1 h)、阿霉素合用桑皮苷A组(用5,10,20μmol·L-1桑皮苷A处理48 h,再用5μg·mL-1阿霉素孵育1 h)、罗丹明123合用桑皮苷A组(用5,10,20μmol·L-1桑皮苷A处理48 h,再用2μg·mL-1罗丹明123孵育1.5 h)。用噻唑蓝(MTT)实验初步确定桑皮苷A的逆转耐药作用;再以细胞内阿霉素蓄积实验,罗丹明123(Rho123)蓄积及外排实验进一步研究桑皮苷A的逆转耐药作用;分别用聚合酶链反应(PCR)和蛋白质印迹(Western blot)法检测桑皮苷A对K562/AD... 相似文献
3.
目的探讨选择性环氧合酶-2抑制剂塞来昔布是否通过抑制Rho/Rho相关蛋白激酶(ROCK)通路的表达对2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝脏具有保护作用。方法雄性SD大鼠40只,随机等分为T2DM合并非酒精性脂肪性肝炎(T2DM-NASH)组、T2DM-NASH+塞来昔布组、对照组、对照+塞来昔布组四组,其中T2DM-NASH及T2DM-NASH+塞来昔布组予高糖高脂饲料喂养,对照组及对照+塞来昔布组予基础饲料(25 kJ/kg)喂养,4周后T2DM-NASH组及T2DM-NASH+塞来昔布组腹腔注射链脲佐菌素(STZ,30mg/kg)诱导T2DM模型,而对照组及对照+塞来昔布组腹腔注射等体积柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液,STZ注射4周后T2DM-NASH+塞来昔布组及对照+塞来昔布组予塞来昔布(10 mg·kg-1·d-1)溶于生理盐水中灌胃4周,剩余两组大鼠予等体积生理盐水灌胃4周。第12周末处死动物,取肝脏组织,行HE染色观察肝脏病理改变;免疫组织化学及蛋白质印迹法检测RhoA、Rho相关蛋白激酶1(ROCK1)及Rho相关蛋白激酶2(ROCK2)蛋白在肝脏的表达,实时定量PCR法检测RhoA、ROCK1及ROCK2 mRNA在肝脏的表达情况,并采用方差分析及t检验对比各组间蛋白及mRNA的表达差异。结果与对照组及对照组+塞来昔布组相比,T2DM-NASH组及T2DM-NASH+塞来昔布组光镜下肝组织呈重度脂肪变性,部分可见炎症细胞浸润,且肝组织RhoA、ROCK1及ROCK2的蛋白及mRNA表达水平均显著升高(P<0.05),而T2DM-NASH+塞来昔布组较T2DM-NASH组肝细胞脂肪变性有所减轻且肝组织RhoA、ROCK1及ROCK2蛋白及mRNA表达水平均降低(P<0.05)。结论选择性环氧合酶-2抑制剂塞来昔布对T2DM-NASH大鼠肝脏具有保护作用,而其作用可能是通过抑制Rho/ROCK通路的表达而达到的。 相似文献
4.
目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)OPA相互作用蛋白5反义转录本1(OIP5-AS1)对脑胶质瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响机制。方法 收集33例胶质瘤患者(低级别胶质瘤14例、高级别胶质瘤19例)和33例颅脑损伤患者的组织标本。实时荧光定量PCR(qPCR)检测组织和细胞中OIP5-AS1、微小RNA-942-5p(miR-942-5p)和检查点激酶1(CHEK1)mRNA表达,分析胶质瘤组织中OIP5-AS1、miR-942-5p和CHEK1 mRNA表达水平的相关性。体外培养人脑胶质瘤细胞系U87、SHG-44、U251、H4和正常人星形胶质细胞NHA,Western blot检测细胞中CHEK1蛋白表达。将U87细胞分为对照(NC)组、siRNA阴性对照(si-NC)组、OIP5-AS1 siRNA(si-OIP5-AS1)组、si-OIP5-AS1+inhibitor阴性对照(si-OIP5-AS1+anti-NC)组、si-OIP5-AS1+miR-942-5p抑制剂(si-OIP5-AS1+anti-miR-942-5p)组,采用Lipofectamine 3000试剂进行转染。转染后,qPCR和Western blot检测细胞中OIP5-AS1、miR-942-5p和CHEK1 mRNA和蛋白表达水平;MTT法测定细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力。最后通过双荧光素酶和RNA免疫沉淀(RIP)实验验证OIP5-AS1和miR-942-5p以及CHEK1和miR-942-5p的相互作用。结果 OIP5-AS1和CHEK1在脑胶质瘤组织和细胞中过表达,miR-942-5p呈低表达(均P<0.05);相关分析显示,脑胶质瘤组织中OIP5-AS1与miR-942-5p的表达水平呈负相关,miR-942-5p与CHEK1 mRNA的表达水平呈负相关,CHEK1与OIP5-AS1 mRNA的表达水平呈正相关;且OIP5-AS1、CHEK1 mRNA在高级别胶质瘤组织中的表达明显高于低级别组织,而高级别胶质瘤中的miR-942-5p水平明显低于低级别组织(P<0.01)。沉默OIP5-AS1可显著上调miR-942-5p,抑制CHEK1的mRNA和蛋白表达(均P<0.05);沉默OIP5-AS1可显著抑制U87细胞增殖、迁移和侵袭,促进U87细胞凋亡(均P<0.05);下调miR-942-5p可上调CHEK1表达,阻断OIP5-AS1沉默对脑胶质瘤细胞生物学行为的影响(均P<0.05)。双荧光素酶和RIP实验证实miR-942-5p是OIP5-AS1的靶基因,CHEK1是miR-942-5p的下游靶基因。结论 沉默OIP5-AS1可能通过上调miR-942-5p抑制CHEK1表达,抑制脑胶质瘤细胞的侵袭和迁移,并促进细胞凋亡。 相似文献
5.
目的 探索E3泛素连接酶S期激酶相关蛋白2(SKP2)介导的碱基切除修复蛋白8-氧代鸟嘌呤-DNA糖基化酶(OGG1)在年龄相关性白内障(ARC)发生过程中的泛素化降解机制。方法 采用免疫沉淀实验检测OGG1的泛素化修饰及其与SKP2的结合能力。采用中波紫外线(UVB)照射人晶状体上皮细胞株SRA01/04构建细胞氧化损伤模型。蛋白免疫印迹实验检测细胞氧化损伤模型和过表达模型细胞中SKP2的蛋白表达。通过转染SKP2质粒,增加SKP2的表达并观察细胞中OGG1蛋白的表达变化。结果 OGG1蛋白存在泛素化修饰。UbiBrowser软件预测能与OGG1结合的潜在E3泛素连接酶,并通过免疫沉淀实验证明SKP2与OGG1之间存在相互作用。在氧化损伤环境下,SRA01/04细胞中SKP2蛋白表达出现先下降后逐渐升高的趋势,其中UVB照射10 min时SKP2表达下降最为显著。对照组、转染空载质粒组和转染SKP2过表达质粒组SRA01/04细胞中SKP2蛋白的相对表达量分别为1.040±0.007、0.920±0.008和1.330±0.020,与转染空载质粒组相比,转染SKP2过表达质粒组细胞中SKP2蛋白的表达显著上调(P<0.05)。空白对照组、UVB组、UVB+转染空载质粒组和UVB+转染SKP2过表达质粒组细胞中OGG1蛋白的相对表达量分别为1.05±0.01、5.05±0.16、5.20±0.07和3.83±0.10;与UVB+转染空载质粒组相比,UVB+转染SKP2过表达质粒组SRA01/04细胞中OGG1蛋白相对表达水平明显降低,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论 E3泛素连接酶SKP2能够促进OGG1发生泛素化降解,导致晶状体上皮细胞内部损伤性DNA的累积,从而导致ARC的发生发展。 相似文献
6.
目的 探讨槲皮素对骨肉瘤MG-63细胞生长周期及磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)-蛋白激酶B(Akt)-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路相关蛋白表达的影响。方法 取人骨肉瘤MG-63细胞分为对照组和实验组,分别给予0.1%二甲基亚砜、200μg/mL槲皮素处理24 h、48 h、72 h。使用流式细胞仪检测各组细胞的生长周期,运用免疫蛋白印迹法检测各组细胞中Akt、磷酸化Akt(p-Akt)、mTOR、磷酸化mTOR(p-mTOR)蛋白表达水平。结果 干预后48 h,与对照组比较,实验组的G1期细胞比例增加,而S期细胞比例减少,且p-Akt、p-mTOR蛋白相对表达水平降低(均P<0.05)。结论 槲皮素可能通过阻断PI3K-Akt-mTOR通路阻滞骨肉瘤MG-63细胞生长,从而发挥抗骨肉瘤效应。 相似文献
7.
【摘要】长链非编码RNA (lncRNA) 是一类长度超过200个核苷酸的非编码 RNA,在染色体修饰、转录调控以及转录后加工的水平调控基因的表达,从而影响肿瘤细胞的发生、发展。HIPPPO信号通路是一条进化上十分保守的信号通路,近年来被发现在调控细胞生长、凋亡及组织器官大小等方面起重要作用,且与肿瘤关系密切,lncRNA与HIPPO通路的相互作用对消化系统肿瘤的增殖、迁移、侵袭和耐药性等方面产生重要影响。文章对lncRNA与HIPPO通路在消化系统肿瘤中的相互作用机制进行总结,旨在为消化系统肿瘤的个体化治疗寻找新的治疗靶点。 相似文献
8.
目的探讨慢病毒短发夹RNA(shRNA)介导的多形性腺瘤基因样蛋白2(PLAGL2)沉默对肝癌细胞恶性行为的影响及其机制。方法Real-time PCR与Western blotting分别检测肝癌组织及癌旁组织中PLAGL2的表达水平;体外培养肝癌细胞MHCC97-L,构建慢病毒载体质粒PLAGL2-shRNA与对照NC-shRNA,转染MHCC97-L细胞,采用嘌呤霉素筛选稳转株;CCK-8、Transwell小室实验检测沉默PLAGL2后MHCC97-L细胞的增殖活力以及迁移和侵袭数量;Western blotting检测p-PI3K和p-Akt蛋白表达。用PI3K/Akt信号通路激活剂处理MHCC97-L细胞,检测细胞增殖、迁移及侵袭能力。结果肝癌组织中PLAGL2表达水平显著升高(P<0.05);9株MHCC97-L细胞转染PLAGL2-shRNA可明显降低PLAGL2表达水平,同时,细胞增殖、迁移、侵袭能力减弱(P<0.05),p-PI3K、p-Akt表达受抑制(P<0.05);PI3K/Akt激活剂可明显逆转上述现象。结论慢病毒shRNA载体介导的PLAGL2沉默,可显著抑制肝癌细胞恶性行为,其作用机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路的激活有关。 相似文献
9.
目的探讨尤瑞克林(HUK)对脑缺血再灌注损伤小鼠脑组织保护作用的机制。方法60只ICR小鼠随机分为3组:假手术组、I/R+NS组和I/R+HUK组,用线栓法制作小鼠大脑中动脉短暂性脑缺血再灌注损伤模型,治疗72 h后,观察各组小鼠神经功能缺损评分,采用2,3,5-苯氯化四氮唑(TTC)染色检测梗死面积百分比,Western印迹检测小鼠缺血侧海马组织丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路相关蛋白ERK1/2、p-ERK1/2、Bcl-2、Bax表达,TUNEL法检测凋亡细胞数量。结果进行缺血再灌注后,I/R+NS组小鼠神经功能缺损评分显著增加,梗死面积百分比升高,凋亡细胞表达增多,p-ERK1/2、ERK1/2、Bax蛋白表达水平明显增高,而Bcl-2蛋白水平降低,与假手术组相比,差异有统计学意义(P<0.05);经HUK治疗后,HUK组神经功能缺损评分、梗死面积百分比减少,凋亡细胞及p-ERK1/2、ERK1/2、Bax蛋白表达水平均明显降低,而Bcl-2蛋白表达水平升高,与I/R+NS组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论HUK对小鼠局灶性缺血再灌注脑损伤有神经保护作用,其机制可能与抑制MAPK通路相关蛋白、减少神经细胞凋亡有关。 相似文献
10.
目的 分析丙酮酸激酶M2(PKM2)在子宫内膜浆液性癌(ESC)中的表达与临床特征及预后的相关性,为揭示ESC早期诊断和治疗的新靶标提供依据.方法 从2016年1月至2017年5月,从我院妇瘤科手术病理档案中检索出135例子宫内膜病变患者,包括13例子宫内膜萎缩作为良性病变组,17例子宫内膜息肉样增生伴不典型异型增生作为癌前病变组,30例浆液性子宫内膜上皮内癌(SEIC)作为原位癌组,32例浆液性和子宫内膜样混合型癌(MSE)和43例(21.9%)浆液性癌都作为ESC组.采用免疫组织化学染色法检测PKM2表达,分析PKM2表达与ESC患者不同临床特征的关系.绘制Kaplan-Meier生存曲线,并使用Logistic回归模型和Log-rank分析PKM2表达与预后的相关性.结果 基于TCGA数据库分析,子宫内膜癌组织中PKM2 mRNA表达明显高于癌旁正常组织(P<0.001),FIGO分期越高,组织PKM2 mRNA表达越高(P<0.05);且高表达PKM2预示着肿瘤分化差和预后不良(P<0.001).此外SEA和MSE组织中PKM2 mRNA表达量明显高于EEA组织(P<0.001).在临床样本中,ESC组织中PKM2蛋白阳性表达率显著高于良性病变组、癌前病变组、原位癌组[0(0/13)vs 17.65%(3/17)vs 30.0%(9/30)vs 64.0%(48/75),χ2=29.498,P<0.001].且ESC组织PKM2表达与子宫肌层浸润、淋巴管浸润、FIGO分期有关(P<0.05).经Kaplan-Meier生存曲线和Log Rankχ2检验,PKM2蛋白高表达组患者5年生存率低于低表达组[60.4%(29/48)vs 74.1%(20/27),χ2=3.481,P=0.015];且组织PKM2蛋白高表达是影响患者预后的独立危险因素(P<0.05).结论 PKM2蛋白表达水平可作为ESC和癌前病变、SEIC鉴别诊断的生物标志物.此外,对于ESC患者,组织PKM2蛋白高表达似乎也预示着患者5年生存预后不良. 相似文献