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1.
Background Advanced glycation end products (AGEs) play a critical role in the development of diabetic nephropathy. Reactive oxygen species (ROS) may play a critical role in AGEs induced growth factor expression. In this study, the effects of AGEs on transforming growth factor β1 (TGF-β1), connective tissue growth factor (CTGF) and fibronectin (Fn) mRNA expression and oxidative stress in cultured NRK-49F cells were examined. Methods NRK-49F cells were incubated with medium containing different doses of AGEs (50, 100 or 200 μg/ml) for 24 hours, or with AGEs 100 μg/ml for different times (0, 12, 24 or 48 hours). Cells in the serum-free medium or medium containing 25 mmol/L glucose were controls. Cells were treated with 25 mmol/L glucose and 100 μg/ml AGEs for 24 hours to determine the effects between AGEs and glucose. We clarified the role of antioxidant by pretreating cells with N-acetylcysteine (10 mmol/L), ginkgo biloba extract (50 or 100 mg/L) for 24 hours and with 100 μg/ml AGEs for further 24 hours. Alamarblue dye assay was used to analyze cell growth; intracellular ROS generation was measured by flow cytometry; intracellular glutathione by fluorescence spectrophotometry; expressions of TGF-β1, CTGF and Fn mRNA by semiquantitative RT-PCR. Results AGEs significantly increased the expressions of TGF-β1, CTGF, Fn mRNA and intracellular ROS generation, and decreased the glutathion level in NRK-49F cells in dose- and time-dependent manners. High glucose and AGEs together significantly increased the expression of TGF-β1, CTGF and Fn mRNA, compared with AGEs and high glucose separately. Preincubation with N-acetylcysteine or ginkgo biloba extract increased GSH level, suppressed AGEs-induced oxidative stress and TGF-β1, CTGF and Fn mRNA overexpression. Conclusions AGEs can significantly increase expression of TGF-β1, CTGF, Fn mRNA in NRK-49F cells through enhancement of oxidative stress. The accumulation of AGEs may play a pivotal role in the pathogenesis of tubulointerstitial fibrosis in diabetic nephropathy. Suppression of AGEs induced TGF-β1, CTGF and Fn mRNA overexpression in renal fibroblasts through inhibition of oxidative stress may be a mechanism underlying effect of ginkgo biloba extract in diabetic nephropathy. In addition, antioxidant therapy may help prevent AGEs accumulation and its induced damage.  相似文献
2.
目的 探讨氧化苦参碱(OM)对大鼠慢性肾纤维化组织中核因子-κB(NF-κB)表达的影响.方法 实验第1天、第21天尾静脉注射阿霉素(2 mg/kg)建立慢性肾纤维化大鼠模型,分为模型组、苯那普利治疗组和OM治疗组.正常对照组给予等量生理盐水尾静脉注射.检测各组的24 h尿蛋白含量、血生化及肾脏组织病理改变,并应用免疫组织化学法检测肾组织内NF-κB、抑制性κB(IκB)蛋白的表达,并进一步分析NF-κB与IκB蛋白的表达、肾脏病理改变及肾功能损害的关系.结果 苯那普利治疗组、OM治疗组的肾脏病理改变、肾功能损害均轻于模型组,第2次注射后8周时组织内NF-κB蛋白的表达轻于模型组,而IκB蛋白的表达高于模型组,但两者之间差异无显著性.模型组大鼠肾组织中NF-κB与IκB成负相关,而与肾脏病理改变及肾功能损害成正相关.结论 OM可能通过下调阿霉素大鼠肾组织中NF-κB的表达而抑制肾纤维化的发生,从而起到保护肾脏的作用.  相似文献
3.
肾小管间质纤维化机制及防治进展   总被引:6,自引:0,他引:6  
越来越多的证据表明肾间质细胞(包括肾间质成纤维细胞、肾小管上皮细胞等)、细胞因子在肾小管间质纤维化过程中起着重要的作用,并且相互作用共同推动着纤维化的进展。间质细胞增殖和凋亡失衡及细胞间质代谢失调也是造成肾小管间质纤维化的两个不可缺少的原因。进一步阐明肾小管间质纤维化的这些微观病理过程,对探讨临床防治措施有着重要的作用。  相似文献
4.
5.
温脾汤对5/6肾切除大鼠残余肾脏影响的实验研究   总被引:6,自引:0,他引:6  
目的 观察温脾汤对大鼠血清肌酐、尿素氮及 2 4h尿蛋白的影响。方法 采用 5 / 6肾切除方法制作大鼠肾纤维化模型 ,以PASM染色方法观察大鼠组织形态学变化 ,并应用图像分析技术对病理染色结果进行分析。结果 温脾汤能够显著降低 5 / 6肾切除大鼠的血清肌酐 (P <0 0 5 )、尿素氮 (P <0 0 1)水平及 2 4h尿蛋白 (P <0 0 1) ,降低肾重体重比 ,抑制残余肾脏的代偿性肥大 ,减轻肾小球硬化及肾间质纤维化程度。结论 温脾汤可降低肾重体重比 ,抑制残余肾脏的代偿性肥大 ,减轻肾小球硬化及肾间质纤维化程度 ,具有保护肾脏的功能  相似文献
6.
肝细胞生长因子缓解梗阻性肾病肾小管间质纤维化   总被引:5,自引:1,他引:4  
目的 研究肝细胞生长因子(HGF)缓解梗阻性肾病肾小管间质纤维化的机制。方法 18只Wistar大鼠随机分为假手术组、单侧输尿管梗阻组和HGF治疗组。rhHGF(500μg-1.kg-1.d^-1)大鼠皮下注射21d后,采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测TGF-β1 mRNA表达水平;Western杂交检测α-SMA蛋白的表达;底物酶谱法检测MMP2、9的活性;判断纤维化程度通过测定肾组织羟脯氨酸含量。结果 HGF能明显降低梗阻肾TGF-β1 mRNA和α-SMA蛋白表达,增加MMP2、9的活性,降低肾组织羟脯氨酸的含量。结论 HGF能有效缓解梗阻性肾病肾小管间质纤维化,有望成为临床治疗梗阻性肾病的方法之一.  相似文献
7.
慢性肾脏病患者肾组织热休克蛋白47的表达及意义   总被引:4,自引:2,他引:2  
目的探讨热休克蛋白47(Heat shock protein 47,HSP47)在慢性肾病患者肾组织中的表达及其与肾组织纤维化的关系.方法选择50例慢性肾脏病患者,根据肾组织纤维化程度积分为3组:轻度损害组20例,中度损害组15例,重度损害组15例.对照组5例,为肾肿瘤患者,取其切除肾脏远离肿瘤部分经病理检查结果正常的肾组织为对照研究对象.应用免疫组织化学方法检测4组受试对象肾组织中HSP47、Ⅳ型胶原(COL-Ⅳ)的表达,并将HSP47分别与肾脏纤维化损害程度、COL-Ⅳ、血清肌酐、内生肌酐清除率等进行相关分析.结果 (1)在纤维化病变肾组织中,HSP47主要表达于病变区小管上皮细胞、肾间质细胞及肾小球内系膜细胞、上皮细胞内,且其表达量随肾脏纤维化程度加重而增加(P<0.01);(2)HSP47表达分别与COL-Ⅳ表达、肾组织纤维化积分、血清肌酐成正相关(P<0.01),与内生肌酐清除率成负相关(P<0.01).结论随着慢性肾脏病患者纤维化病变程度加重,HSP47表达量逐渐增加,它可能通过促进胶原合成增加,参与肾脏纤维化的发生、发展.  相似文献
8.
肝肾宝对5/6肾切除大鼠肾组织细胞外基质影响的实验研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
目的研究肝肾宝对5/6肾切除大鼠肾组织细胞外基质(ECM)如纤维粘连蛋白(FN)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)蛋白及其基因表达的影响.方法采用免疫组化、原位杂交方法检测肾组织FN、LN、ColⅣ及相应mRNA表达,使用TN-8502多功能图像分析系统对结果进行处理,采用SPSS统计软件统计.结果显示正常对照组、假手术组,均未见FN、LN、ColⅣ蛋白及其mRNA阳性反应物.5/6NT组,肾小球细胞细胞浆、肾小管细胞浆见FN、LN、ColⅣ蛋白及其mRNA强阳性黄色反应物.缬沙坦组FN、LN、ColⅣ蛋白及其mRNA阳性反应物减少,与5/6NT组比较,P<0.05;肝肾宝组FN、LN、ColⅣ蛋白及其mRNA阳性反应物明显减少,与5/6NT组比较,P<0.01.结论肝肾宝下调肾组织FN 、LN、ColⅣ蛋白及其基因表达,是防治肾纤维化作用机制之一.  相似文献
9.
长期应用环孢素A致大鼠肾脏病变演变过程观察   总被引:3,自引:2,他引:1  
目的:动态观察和分析大鼠长期应用环孢素A(CsA)导致的肾脏病变的演变过程.方法:SD大鼠随机分为3组:普通饮食对照组,低盐饮食对照组和CsA组,分4个时间点(第4天、第8天、第14天和第28天)观察大鼠一般情况、肾功能和组织学病变演变过程.结果:与低盐饮食组相比,CsA组在第4天出现间质细胞数显著增加,第8天出现体质量增长缓慢和典型的小动脉病变,第14天出现显著的收缩压增高、血肌酐升高、24 h尿量增加和尿渗透压下降.这些病变随时间延长持续加重,第28天典型的小管间质病变与低盐饮食对照组差异有统计学意义.所检测的各项指标在普通饮食组和低盐饮食组间差异无统计学意义.结论:大鼠长期应用CsA可导致肾脏出现功能和组织学病变,提示可以通过合适的手段在最佳的时间干预病变的演变过程,从而防止CsA慢性肾毒性的发生.  相似文献
10.
延肾胶囊抑制大鼠肾间质纤维化作用的研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
周剑锋  李娜  袁发焕 《西部医学》2005,17(3):197-199
目的 观察延肾胶囊治疗单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化作用并探讨其机理。方法 4 5只Wistar大鼠随机分为假手术组、单侧输尿管梗阻组和延肾胶囊治疗组,分别于术后3d、7d、1 4 d处死动物,观察肾脏间质病变程度,采用免疫组织化学方法检测肾小管间质中TGF- β1和α- SMA的蛋白表达情况。结果 与梗阻组相比,延肾胶囊治疗组大鼠肾间质病变程度明显减轻,而TGF- β1、α- SMA蛋白表达也明显降低(P<0 .0 5 )。结论 延肾胶囊具有明显的抑制肾间质纤维化的作用,能显著降低肾间质中TGF- β1、α- SMA的表达。  相似文献
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