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1.
将起始原料ACLE·HCl首先与7-位侧链噻二唑化合物TATD反应,然后再与吡唑化合物UBT进行反应,并用三氟乙酸进行脱保护基反应。最后经过纯化析晶,合成头孢洛扎硫酸盐。该工艺得到头孢洛扎硫酸盐的纯度高,原料易得,纯化时不需要过柱,更适合工业化生产。  相似文献   
2.
目的研究并确立茯苓皮总多糖的最佳提取和纯化工艺。方法用超声波辅助法提取总多糖,用苯酚-硫酸法测其含量并作为指标,经过单因素实验和正交试验确立最佳提取工艺;用大孔树脂纯化总多糖,以多糖保留率,脱色率和蛋白去除率为指标,经过静态和动态实验,确立最佳纯化工艺。结果以料液比1∶25,温度45℃,超声功率100w,超声时间10min为最佳提取工艺;以AB-8型大孔吸附树脂,溶液pH 5,转速180r·min^-1,上样流速24mL·min^-1,径高比1∶15为最佳纯化工艺。在此条件下静态吸附实验蛋白去除率65.29%,脱色率79.08%,多糖保留率59.50%;动态吸附实验蛋白去除率48.98%,脱色率76.84%,多糖保留率74.58%。结论茯苓皮总多糖的提取纯化工艺稳定可靠,可为其进一步开发提供参考。  相似文献   
3.
目的 通过大孔吸附树脂筛选拳参黄酮抗氧化的最佳活性部位.方法 以静态吸附率和解吸率为指标,从中筛选出富集拳参黄酮的最佳树脂,通过黄酮液pH、浓度等性能来确定动态吸附和洗脱的条件,并采用DPPH和ABTS+清除实验来筛选拳参黄酮抗氧化最佳活性部位.结果 X-5大孔吸附树脂对拳参黄酮有较好的吸附分离性能,其静态吸附平衡时间为2h,吸附条件为(上样液pH3、流速1 mL· min-1),黄酮浓度为0.4477 mg· mL-1,分别以40%、60%、80%、95%乙醇洗脱,得A~D部位.各洗脱部位均有一定的抗氧化能力,其中C部位(80%乙醇洗脱部位)清除·DPPH与ABTS+的活性最强,是拳参黄酮抗氧化的最佳活性部位.结论 拳参黄酮是一种很好的天然抗氧化剂.  相似文献   
4.
《Vaccine》2016,34(34):4032-4039
Development of acellular pertussis vaccine (aPV) requires purification of several components from Bordetella pertussis. While the components pertussis toxin (PT) and filamentous hemagglutinin (FHA) have been successfully purified, the third component, pertactin, proves to be a difficult target due to its very low concentration. In order to solve its purification problem, we performed the surface potential analysis with GRASP2 program. The results demonstrated that there are two major charge patches, one negative and one positive, which are located separately on this linear protein. For this special feature, we designed a dual ion exchange chromatography strategy including an anionic exchange and a cationic exchange process for separation of pertactin from the heat extract of B. pertussis. The initial anionic exchange chromatography concentrated the product from 1.7% to 14.6%, with recovery of 80%. The second cationic exchange chromatography increased the purity to 33%, with recovery of 83%. The final purification was accomplished by hydrophobic interaction chromatography, yielding a purity of 96%. The total recovery of the three columns was 61%. Characterization of the purified antigen was performed with CD, intrinsic fluorescence, HP-SEC and western-blot, showing that the purified protein kept its natural conformation and immune-reactivity. The rationally designed process proved to be feasible, and it is suitable for large-scale preparation of the third aPV component pertactin.  相似文献   
5.
6.
目的 :探索人髓核间充质干细胞(nucleus pulposus mesenchymal stem cells,NPMSCs)的提纯方法并鉴定其生物学活性。方法:收集3例腰椎间盘突出症患者的退变髓核组织(Pfirrmann分级均为Ⅳ级),利用酶消化法分离细胞。采用两种方法分离提纯NPMSCs,一组细胞采用贴壁法培养(贴壁组),另一组通过流式细胞分选技术利用NPMSCs表面阳性标志物CD73、CD90、CD105获得NPMSCs(流式组)。将两种方法获得的NPMSCs进行体外培养扩增,分别进行形态学观察,细胞计数试剂盒(Cell Counting Kit,CCK-8)检测增殖能力。贴壁组NPMSCs采用流式细胞分选仪在进行分选之前检测免疫表型,流式组NPMSCs在生长达80%~90%融合时进行免疫表型的检测。向成骨、成脂、成软骨诱导分化,诱导28d后分别进行茜素红染色观察其成骨能力、油红O染色观察其成脂能力、甲苯胺蓝染色观察其成软骨能力,利用Imag J软件计算染色区域所占的面积百分比。比较两组NPMSCs在形态学、免疫表型及增殖和分化能力的差异。结果:形态学观察发现,两组NPMSCs均呈漩涡状生长,贴壁组NPMSCs可见散在的单个细胞生长;流式组NPMSCs长梭形形态更长,排列更加紧密,少见散在的单个贴壁生长细胞。流式细胞分选后所得的NPMSCs占细胞总数的(89.67±2.52)%,可以进行体外培养扩增,细胞为典型的长梭形特征,漩涡状生长,在接种后12~15d达80%~90%融合,增殖能力在接种后5~13d明显高于贴壁组NPMSCs(P0.05)。流式组NPMSCs的CD73、CD90、CD105的表达率明显高于贴壁组NPMSCs(P0.05),并且低表达CD34、CD45及HLA-DR。两种方法获得的NPMSCs均能完成三系诱导分化,流式组成骨、成脂、成软骨染色区域百分比均明显高于贴壁组(P0.05)。结论:利用流式细胞分选技术从人退变髓核组织中可获得较高纯度的NPMSCs,并能进行后续培养扩增。与贴壁法获得的NPMSCs相比,流式细胞分选的NPMSCs具有更强的增殖与分化能力。  相似文献   
7.
目的 调查ICU患者血液净化专用中心静脉导管的封管情况,并比较不同等级医院之间的差异。 方法 2020年9月,采用便利抽样法对23个省份117所医院共228名ICU护士长进行在线调查,调查内容包括医院及ICU的基本信息、ICU患者血液净化专用中心静脉导管的封管现状。结果 共回收222份有效问卷。肝素溶液是ICU患者血液净化专用中心静脉导管最常用的封管液,其次是枸橼酸钠溶液,尿激酶溶液使用最少。肝素溶液的浓度以1 250 U/ml为主,枸橼酸钠溶液的浓度以4%为主。封管液剂量以1倍导管容量居多;护士多在每次血液净化结束后封管,封管方式以正压联合脉冲封管为主;封管前均进行回抽,回抽次数以2次居多,每次回抽量以2倍导管容量居多。非三级医院的ICU在封管液浓度、封管液剂量、封管频次、封管前回抽次数、每次回抽量等方面均与三级医院不同,差异具有统计学意义(均P<0.05)。结论 各ICU在血液净化专用中心静脉导管封管液的种类、浓度、剂量及封管频次等方面不尽相同,建议制订ICU患者血液净化专用中心静脉导管封管护理实践标准,规范护士封管行为。  相似文献   
8.
Human intoxications in the Mediterranean Sea have been linked to blooms of the dinoflagellate Ostreopsis cf. ovata, producer of palytoxin (PlTX)-like toxins called ovatoxins (OVTXs). Exposure routes include only inhalation and contact, although PlTX-poisoning by seafood has been described in tropical regions. To address the impact of OVTXs on the intestinal barrier, dinoflagellate extracts, purified OVTX-a and -d and PlTX were tested on differentiated Caco-2 cells. Viability, inflammatory response and barrier integrity were recorded after 24 h treatment. OVTX-a and -d were not cytotoxic up to 20 ng/mL but increased IL-8 release, although to a lesser extent compared to PlTX. While PlTX and OVTX-a (at 0.5 and 5 ng/mL respectively) affected intestinal barrier integrity, OVTX-d up to 5 ng/mL did not. Overall, OVTX-d was shown to be less toxic than OVTX-a and PlTX. Therefore, oral exposure to OVTX-a and -d could provoked lower acute toxicity than PlTX.  相似文献   
9.
目的:拟应用去白细胞输血器,建立一种快速简便纯化疟原虫的新方法,以去除宿主白细胞DNA干扰。方法:建立Pb ANKA株鼠疟模型;39只小鼠分为A组(新鲜虫血组,n=18)、B组(冻存虫血组,-80℃保存,n=16)及C组(正常对照组,n=5);应用去白细胞输血器对血样进行过滤纯化,观察比较过滤速度及血样处理(新鲜、冻存)对去除白细胞效果的影响;血细胞计数板和血涂片吉姆萨染色法计数各样本过滤前后白细胞、红细胞、原虫率并观察疟原虫形态和疟原虫密度。滤过后的血液提取DNA,PCR验证白细胞滤过效果。结果:经血细胞计数板计数,3组白细胞平均去除率比较,差异无统计学意义(P〉0.05);C组红细胞的回收率高于A组,差异具有统计学意义(P〈0.05);B组则仅见原虫。白细胞过滤后疟原虫形态及密度无明显改变。PCR鉴定PbGAPDH结果 A、B组均为阳性,而小鼠GAPDH均为阴性。结论:建立了白细胞输血器一步法纯化疟原虫的新方法。该方法简便、快速、廉价,是进行疟原虫分子生物学、免疫学等方面的研究不可或缺的实用技术。  相似文献   
10.
目的 优化那他霉素粗粉精制工艺,提高其精粉质量。方法 采用正交对比试验方法,对那他霉素粗粉溶解剂、粗粉溶液浓度、结晶溶液pH、淋洗挖洗影响、挖洗剂种类等精制工艺条件进行优化。结果 成功开发了那他霉素粗粉的精制优化工艺,即:粗粉溶解剂为75%甲醇-水溶液、粗粉溶液浓度为(25000±1000)u/mL、结晶溶液pH为6.0~7.0、结晶后沉淀需要用75%丙酮-水溶液淋洗后再挖洗,该工艺制备的那他霉素精粉纯度高达99.84%、收率可达94.05%,杂质含量为0.2%。结论 那他霉素粗粉精制工艺经优化后,大幅提高了精粉质量,且工艺稳定可行,可用于放大生产。  相似文献   
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