抑制NF-kB对糖尿病大鼠肾组织ICAM-1表达的影响

目的：研究糖尿病大鼠肾组织细胞间黏附分子-1（ICAM-1）表达,以及用吡咯烷二硫氨基甲酸（PDTC）抑制核转录因子-kB（NF—KB）对其表达的影响。方法：用Wistar大鼠建立STZ诱导的糖尿病模型,设立正常对照组（NC组）、糖尿病纽（DM组）、糖尿病PDTC干预组（DP组）,8周末用免疫组化方法测定肾组织中ICAM—1含量;体外培养大鼠肾小管成纤维细胞（NRK）,葡萄糖孵育下分6组：正常对照组、高糖1组、高糖2组合葡萄糖分别为5．6、15和30mmol／L,干预1～3组在葡萄糖30mmo／L基础上分别加入PDTC5、10、20μmol／L。24h、48h后采用RT—PCR及免疫细胞化学（ICC）法检测各组的ICAM-1表达情况。结果：8周末,DIM纽肾组织ICAM～1表达较NC组明显增高,DP组较DM组明显下降,但仍高于NC组。各组NRK细胞中,与正常组相比,高糖各组ICAM-1的mRNA和蛋白表达水平显著升高（P〈0．05）,且呈刺量时间依赖性;而不同浓度PDTC干预后,ICAM-1mRNA和蛋白表达水平显著下降（P〈0．05）,而且与PDTC呈剂量时间依赖性。结论：无论在体内或体外实验中,抑制NF—kB可降低ICAM-1的表达。     

PDTC对PV-杀白细胞素(PVL)诱导THP-1巨噬细胞NF-κB活化及炎性因子表达的影响

目的 探讨二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)对PV-杀白细胞素(panton-valentine Ieucocidin,PVL)诱导THP-1巨噬细胞NF-κB及炎性因子表达的影响.方法 实验分3组,PBS对照组、rPVL刺激组和PDTC处理组,在加入rPVL刺激前60 min,给予100 μmol/L PDTC预处理THP-1巨噬细胞.采用免疫组化检测NF-κB的移位,Western blot检测细胞胞质IκB蛋白和胞核NF-κB蛋白表达,ELISA法检测细胞上清IL-8和IL-6蛋白的表达,RT-PCR法检测IL-8和IL-6 mRNA水平表达.结果 PDTC处理组NF-κB阳性细胞明显减少,核蛋白表达降低,胞质IκB蛋白降解减少;IL-8和IL-6mRNA表达明显下调,蛋白分泌量分别由12.96 ng/ml和6.55 ng/ml降低到6.78 ng/ml和3.88ng/ml,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 PDTC可能通过抑制NF-κB的活性,从而降低II-8和IL-6的表达,对PVL引起的炎性损伤具有一定的保护作用.     

二硫代氨基甲酸吡咯烷诱导人肝癌细胞凋亡的铜离子依赖性机制

目的：测定二硫代氨基甲酸吡咯烷（PDTC）处理对人肝癌细胞Hep3B凋亡的诱导作用及Cu^2 对这种作用的影响。方法：运用细胞增殖力、膜损伤、DNA片断化、细胞周期DNA含量测定分析PDTC对人肝癌细胞株Hep3B细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用及Cu^2 在其中发挥的作用。结果：PDTC处理后，细胞增殖能力显著下降。乳酸脱氢酶（LDH）分析显示细胞膜并没有被破坏，DNA凝胶电泳及细胞周期DNA含量测定发现明显的凋亡特征性DNA片断及亚G1峰，显示细胞增殖能力的降低源于细胞凋亡的发生。低浓度Cu^2 显著加强了PDTC的细胞增殖抑制及凋亡诱导作用，而Cu^2 络合剂Bathocuproine disulfonate(BCS)显著抑制PDTC的两种作用。结论：PDTC铜离子依赖性地抑制人肝癌细胞增殖并诱导细胞凋亡。     

TNFα及PDTC诱导雄激素非依赖性前列腺癌细胞凋亡的实验研究

目的　探讨雄激素非依赖性前列腺癌治疗的新途径。方法　以含 2 0 %小牛血清的RPMI - 16 4 0为培养基 ,在 37℃、5 %CO2 培养箱中孵育雄激素非依赖性前列腺癌细胞株 (PC - 3) ,倍增至所需的细胞数后 ,行SCID鼠右腋皮下接种 ,建立雄激素非依赖性前列腺癌动物模型。待瘤体长至约 1.0cm3 大小时 ,随机分成 4组 :A组 (对照组 ) ,皮下注射生理盐水每只 0 .2ml;B组瘤体内注射TNFα(2 0 0 μg/kg体重 ) ;C组腹腔注射PDTC(2 0 0mg/kg体重 ) ;D组同时注射TNFα及PDTC(剂量同B、C组 )。隔日 1次 ,2 8d后取出瘤体 ,进行瘤体大小及细胞凋亡的检测。结果　各用药组瘤体大小及凋亡率与对照组相比有显著性差异 (P <0 .0 1) ,B组抑瘤率为 70 .9% ,C组为4 5 .9% ,D组为 89.5 %。用药前后的瘤重相比 ,D组有显著性差异 (P <0 .0 1) ,B、C组无显著性差异 (P >0 .0 5 )。在治疗过程中 ,对照组死亡 1只 ,用药组无死亡。结论　TNFα、PDTC对雄激素非依赖性前列腺癌细胞的生长均有抑制作用 ,TNFα联合PDTC可显著缩小瘤体大小 ,其作用机制可能为 :TNFα诱导PC - 3细胞的凋亡 ,PDTC对TNFα的诱导起增强作用。     

Differential regulation of cytokine genes in gingival epithelial cells challenged by Fusobacterium nucleatum and Porphyromonas gingivalis

IL-8 mRNA in human gingival epithelial cells (HGECs) is up-regulated by Fusobacterium nucleatum, and up-/down-regulated by Porphyromonas gingivalis in a complex interaction in the early stages (< or = 4 h) after infection. The mechanisms involved in this regulation in response to F. nucleatum and/or P. gingivalis infection, and identification of co-regulated cytokine genes, are the focus of this investigation. Heat, formalin or protease treatment of F. nucleatum cells attenuated the IL-8 mRNA up-regulation. NF-kappaB, mitogen-activated protein kinase (MAPK) p38 and MAPK kinase/extracellular signal-regulated kinase (MEK/ERK) pathways were involved in IL-8 mRNA induction by F. nucleatum. Pretreatment of P. gingivalis with heat, formalin or protease enhanced IL-8 mRNA induction. NF-kappaB, MARK p38, and MEK/ERK pathways were also involved in this induction. In contrast, down-regulation of IL-8 mRNA by P. gingivalis involved MEK/ERK, but not NF-kappaB or MAPK p38 pathways. cDNA arrays analysis revealed that mRNA down-regulation by P. gingivalis is a specific reaction that only a number of genes, e.g. IL-1beta, IL-8, macrophage inflammatory protein-2alpha, and migration inhibitory factor-related protein-14, are affected based on examination of 278 cytokine/receptor genes. These data indicate that F. nucleatum and P. gingivalis trigger specific and differential gene regulation pathways in HGECs.     

核因子抑制剂对心肺转流中心肌细胞ICAM-1表达的影响

目的探讨核因子抑制剂吡咯二硫氨基甲酸酯(PDTC)对心肺转流(CPB)中心肌细胞核因子-κB(NF-κB)p65和细胞间粘附分子-1(ICAM-1)活化的影响。方法12只犬随机分为PDTC组(P组)和对照组(C组),每组6只。P组于CPB转机前静脉注入PDTC 30 mg/kg,C组静脉注入等容量生理盐水。两组均全心缺血60 min,恢复灌注60 min。于CPB 5 min、阻断60 min及开放60 min时,用自制电钻取心肌组织,一部分置于30%甲醛溶液固定,制成石蜡切片,采用SABC法免疫组化染色,观察NF-κB p65及ICAM-1蛋白的表达情况,另一部分置于液氮中保存,用于测定组织中髓过氧化物酶(MPO)的含量。结果在CPB过程中,随着时间的延长NF-κB p65及ICAM-1蛋白表达逐渐增强,MPO的含量逐渐增多,而PDTC能减少其表达和组织中MPO的含量,组间比较差异有显著意义(P<0.05,P<0.01)。结论PDTC能抑制CPB过程中NF-κB p65及ICAM-1蛋白的表达,减少炎性细胞浸润。     

Zinc-binding compounds induce cancer cell death via distinct modes of action

Metal-binding compounds have been shown to have anticancer activity and are being evaluated clinically as anticancer agents. We have recently found that a zinc-binding compound, 5-chloro-7-iodo-8-hydroxyquinoline (clioquinol), kills cancer cells by transporting zinc into the cells. We therefore compared the action of clioquinol with two other cytotoxic zinc-binding compounds, N,N,N',N'-tetrakis(2-pyridylmethyl)ethylenediamine (TPEN) and pyrrolidine dithiocarbamate (PDTC). We demonstrate that metal-binding compounds can be subclassified based upon the reversibility of their cytotoxicity by metal supplementation and their modes of action. Understanding the mechanisms whereby metal-binding compounds affect cell behavior may aid in their optimization for clinical use.     

~(60)Co γ射线照射后血管内皮细胞CD54表达变化及PDTC的干预作用

 目的　研究血管内皮细胞在受60 Coγ射线照射后粘附分子CD5 4的表达与单核样细胞在血管内皮细胞上粘附变化的关系 ,观测抗氧化剂PDTC预处理对CD5 4表达及白细胞粘附的影响。方法　培养的ECV30 4细胞接受 16Gy60 Coγ放射线照射后不同时点 ,检测视黄酸诱导的单核样HL 6 0细胞在内皮细胞上的粘附数量 ,内皮细胞CD5 4mRNA及蛋白表达 ,核转录因子κBDNA结合活性以及抗氧化剂PDTC预处理对上述指标的影响。结果　照射后 8h ,HL 6 0细胞粘附数较对照显著上升 ,2 4h时较对照增加 77%。受照后 2h ,CD5 4mRNA水平较对照增加 36 % ,2 4h增加 182 %。照射后 4～ 32h ,CD5 4蛋白表达较对照增加 6 6 %～ 2 6 8%。NF κB DNA结合活性在照射后 2h达峰值 ,较对照增高 97%。PDTC预作用后 2h ,NF κB DNA结合活性较未处理组下降了 4 4 % ,作用后 4h ,CD5 4mRNA表达量下降 35 % ,同时HL 6 0细胞粘附数减少 2 6 %。结论　CD5 4表达上调是60 Coγ射线照射引起单核细胞在内皮细胞上...     

NF-κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷提高卵巢癌细胞顺铂化疗的敏感性

目的:探讨核因子κB(nuclear factor kappa B, NF-κB)抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)提高人卵巢癌SKOV-3细胞对顺铂(cisplatin)化疗敏感性的作用及其可能的机制.方法:用不同浓度PDTC联合顺铂在不同时间作用于卵巢癌SKOV-3细胞,MTT法观察药物作用对细胞生长的抑制,Western Blotting分析胞质内NF-κB 抑制蛋白α(inhibitor of NF-κB ,I-κBα)、胞核P65蛋白的表达;流式细胞术检测细胞凋亡.结果:PDTC(10～40 μmol/L)或顺铂(0.1～100 μg/ml )均明显抑制SKOV-3细胞的生长(P<0.05或P<0.01),并引起细胞的凋亡;小剂量PDTC(2.5、5 μmol/L)和顺铂(0.01 μg/ml)联合应用与单用顺铂比较,可明显增加细胞生长抑制率和细胞凋亡率(均P<0.05).单用顺铂组与对照组比较,胞质I-κBα蛋白减少而胞核P65蛋白增多,联合使用PDTC可逆转此现象.结论:小剂量PDTC可增强卵巢癌细胞对顺铂的敏感性,这一作用可能与PDTC增加I-κBα蛋白的表达而抑制P65蛋白进入核内有关.     

PDTC抑制大鼠骨关节炎一氧化氮表达的实验研究

目的：观察核因子kappa B（NF-kappa B）抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐（PDTC）对大鼠骨关节炎一氧化氮表达的影响，探讨NF-kappaB抑制剂能否应用于骨关节炎的治疗。方法：通过前交叉韧带切断的方法制造大鼠骨关节炎（OA）动物模型，将大鼠动物模型分为实验组和对照组，于造模后每隔48h肌肉注射PDTC10mg／kg，对照组仅肌注生理盐水0．1ml，术后6周后处死大鼠，观察实验组和对照组一氧化氮的免疫组化染色，比较两组问有无差异。结果：实验组和对照组一氧化氮免疫组化染色阳性细胞分数分别为51．8±10．0和70．2±12．4，二者间差异有统计学意义。结论：NF-kappaB抑制剂能够抑制大鼠骨关节炎一氧化氮的表达，有潜在治疗骨关节炎的意义。