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目的:研究重组质粒pEGFP-N2/Pim-3转染对内毒素脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)引起的大鼠胰腺AR4-2J细胞损伤的保护机制?方法:实验分为4组:A组(正常对照组),B组(5 μg/mL LPS处理组),C组(空载质粒pEGFP-N2转染+5 μg/mL LPS处理组),D组(重组质粒pEGFP-N2/Pim-3转染+5 ?滋g/mL LPS处理组)?流式细胞仪检测各组处理24 h后细胞凋亡情况?处理0?6?12?24 h后分别提取各组总RNA及蛋白,RT-PCR及Western blot分别检测Pim-3?细胞间黏附分子(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)?紧密连接蛋白闭锁蛋白(Occludin) mRNA及蛋白的表达?结果:处理24 h,各组细胞凋亡率分别为:A组 (7.85 ± 1.14)%?B组 (53.13 ± 5.73)%? C组 (51.76 ± 5.17)%?D组 (21.13 ± 4.15)%,D组细胞相对B?C组凋亡明显减少,差异有统计学意义(P < 0.05);D组Pim-3表达与A?B?C组之间的差异有统计学意义(P < 0.05);处理12 h后 B?C?D组ICAM-1高表达,24 h达高峰,相对于A组,差异均有统计学意义(P < 0.01),D组与B?C组差异有统计学意义(P < 0.05);处理6 h后,B?C?D组Occludin高表达,12 h达高峰,相对于A组,差异均有统计学意义(P < 0.01),D组与B?C组差异有统计学意义(P < 0.05)?结论:丝/苏氨酸激酶Pim-3能够抑制胰腺细胞炎症反应和胰腺细胞凋亡,可能与上调闭锁蛋白和下调细胞间黏附分子的表达有关?  相似文献   
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