胶质瘤中MKK7与c-Jun磷酸化的表达及其相关性

目的 探讨胶质瘤中MKK7和c-Jun磷酸化（p-c-Jun）的表达及意义，分析两者表达的相关性。方法 选取弥漫型星形细胞瘤（15例）、少突胶质细胞瘤（5例）、间变性星形细胞瘤（11例）、间变性少突胶质细胞瘤（8例）、胶质母细胞瘤（53例）及其瘤旁正常脑组织（25例）共117例，采用免疫组织化学法检测MKK7、c-Jun及p-c-Jun的表达。体外培养神经胶质瘤细胞株U87，用脂质体转染MKK4-siRNA、MKK7-siRNA和对照siRNA，48 h后Western blot检测MKK7、c-Jun及p-c-Jun的表达水平。结果 胶质母细胞瘤中p-c-Jun及MKK7的表达均明显高于其他组织学类型胶质瘤及胶质母细胞瘤瘤旁正常脑组织中的表达（P=0.000, P=0.000）。随着胶质瘤WHO分级的升高，p-c-Jun及MKK7的表达增高，且与WHO分级呈明显正相关（r=0.494, P=0.000; r=0.606, P=0.000）。胶质瘤及胶质母细胞瘤瘤旁正常脑组织中MKK7与p-c-Jun的表达存在正相关关系（r=0.387, P=0.000）。沉默神经胶质瘤细胞株U87 MKK7表达抑制了c-Jun磷酸化水平。结论 MKK7可以通过调控JNK/c-Jun活性进而促进胶质母细胞瘤的发生。     

A metabolomic data fusion approach to support gliomas grading

Magnetic resonance imaging (MRI) is the current gold standard for the diagnosis of brain tumors. However, despite the development of MRI techniques, the differential diagnosis of central nervous system (CNS) primary pathologies, such as lymphoma and glioblastoma or tumor‐like brain lesions and glioma, is often challenging. MRI can be supported by in vivo magnetic resonance spectroscopy (MRS) to enhance its diagnostic power and multiproject‐multicenter evaluations of classification of brain tumors have shown that an accuracy around 90% can be achieved for most of the pairwise discrimination problems. However, the survival rate for patients affected by gliomas is still low. The High‐Resolution Magic‐Angle‐Spinning Nuclear Magnetic Resonance (HR‐MAS NMR) metabolomics studies may be helpful for the discrimination of gliomas grades and the development of new strategies for clinical intervention. Here, we propose to use T₂‐filtered, diffusion‐filtered and conventional water‐presaturated spectra to try to extract as much information as possible, fusing the data gathered by these different NMR experiments and applying a chemometric approach based on Multivariate Curve Resolution (MCR). Biomarkers important for glioma's discrimination were found. In particular, we focused our attention on cystathionine (Cyst) that shows promise as a biomarker for the better prognosis of glioma tumors.     

脑胶质瘤干细胞衍生的外泌体lncRNA HOXA-AS2促进脑胶质瘤的增殖、迁移、侵袭和干细胞特性

背景与目的：外泌体是介导肿瘤微环境中肿瘤细胞与受体细胞间相互作用的重要信使。然而，细胞外泌体长链非编码RNA（long non-coding RNA，lncRNA）在脑胶质瘤干细胞（glioma stem cell，GSC）和脑胶质瘤细胞的细胞间通信中的作用尚不清楚。本研究探究外泌体衍生的lncRNA对脑胶质瘤增殖、迁移、侵袭和干细胞特性的影响。方法：从中国脑胶质瘤基因组图谱（the Chinese Glioma Genome Atlas，CGGA）和癌症基因组图谱（the Cancer Genome Atlas，TCGA）数据库下载包含低级别脑胶质瘤（low-grade glioma，LGG）和高级别脑胶质瘤（high-grade glioma，HGG）lncRNA表达数据的数据集，识别LGG和HGG组织之间的差异表达lncRNA（differentially expressed lncRNA，DelncRNA），并分析HOXA-AS2水平与胶质瘤患者总生存期（overall survival，OS）之间的关系。从人胶质瘤细胞系SHG44中分离GSC，用流式细胞术检测CD133⁺富集的细胞，再用蛋白质印迹法（Western blot）检测干细胞相关蛋白（CD133、SOX2和OCT4）的表达水平。提取和识别SHG44-GSC衍生的外泌体，并用PKH26细胞膜染料进行荧光标记；再将转染了Cy3标记HOXA-AS2的SHG44-GSC与SHG44细胞进行间接共培养；后用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction，RTFQ-PCR）检测SHG44-GSC和SHG44-GSC衍生外泌体中HOXA-AS2的水平。使用pLVX-IRES-PURO HOXA-AS2慢病毒质粒和含靶向HOXA-AS2质粒的慢病毒shRNA进行慢病毒转染。采用细胞计数试剂盒-8（cell counting kit-8，CCK-8）和transwell实验检测SHG44-GSC衍生的外泌体HOXA-AS2对SHG44细胞增殖和侵袭能力的影响。结果：HOXA-AS2在胶质瘤中呈现高表达，且与患者较差的OS相关（P<0.01）。SHG44-GSC中CD133⁺细胞比例明显高于SHG44细胞（P<0.000 1），SHG44-GSC中干细胞相关蛋白（CD133、SOX2和OCT4）的表达水平明显高于亲代SHG44细胞（P<0.000 1），并且SHG44-GSC中HOXA-AS2水平显著升高（P<0.000 1）。PKH26标记的外泌体被SHG44细胞吸收，且SHG44细胞中可观察到Cy3标记的HOXA-AS2；HOXA-AS2 OE转染的SHG44-GSC细胞（SHG44-GSC/HOXA-AS2 OE）和SHG44-GSC/HOXA-AS2 OE衍生的外泌体（SHG44-GSC/HOXA-AS2 OE-Exo）中HOXA-AS2水平显著升高（P<0.01），在与SHG44-GSC/HOXA-AS2 OE细胞共培养的SHG44细胞中HOXA-AS2水平显著升高（P<0.01）。SHG44-GSC/HOXA-AS2 OE-Exo可显著促进SHG44细胞增殖、迁移和侵袭。结论：来自SHG44-GSC的外泌体HOXA-AS2能显著促进胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭和干细胞特性，提示HOXA-AS2可能是脑胶质瘤潜在的治疗靶点。     

人脑胶质瘤手术加局部热化疗研究

目的　探讨脑胶质瘤手术加局部热化疗的可行性和安全性。方法　回顾性分析脑胶质瘤手术加术中、术后间断热化疗等综合治疗 2 4例患者 (综合组 )的资料 ,与同期手术治疗的 46例未行热化疗的脑胶质瘤患者 (对照组 )进行比较。热化疗方法是术中用双极电凝直接加热瘤体残腔化疗药 ,43～ 44℃ ,持续2 5min。术后第 2天始 ,隔日将化疗药注射入埋置于头皮下的Ommaya药囊中 ,并用微波辐射加温 45min ,共 9次。结果　综合组平均生存 3 0 .75个月 ,对照组平均生存 8.85个月 ,综合组较对照组生存年限延长 (P <0 .0 0 1) ,而并发症并未增加。结论　脑胶质瘤术中和术后间断局部热化疗可提高手术疗效 ,减少肿瘤复发 ;微波辅助术后局部化疗药液加温是安全可行的     

<Superscript>11</Superscript>C-<Emphasis Type="SmallCaps">l</Emphasis>-Methionine Positron Emission Tomography in the Clinical Management of Cerebral Gliomas

Positron emission tomography (PET) using l-[methyl-¹¹C]-methionine (MET) is the most popular amino acid imaging modality in oncology, although its use is restricted to PET centers with an in-house cyclotron facility. This review focuses on the role of MET–PET in imaging of cerebral gliomas. The biological background of tumor imaging with methionine is discussed with particular emphasis on cellular amino acid transport, amino acid utilization in brain, normal metabolism of methionine, and its alterations in cancer. The role of MET–PET in clinical management of cerebral gliomas in initial diagnosis, differentiation of tumor recurrence from radiation injury, grading, prognostication, tumor-extent delineation, biopsy planning, surgical resection and radiotherapy planning, and assessment of response to therapy is also reviewed in detail.     

BOLD-fMRI用于邻近大脑初级运动皮层脑胶质瘤术后调强放疗的可行性

目的初步探讨BOLD-fMRI指导邻近大脑初级运动皮层(PMC)脑胶质瘤术后调强放疗(IMRT)的可行性。方法收集30例邻近PMC脑胶质瘤术后拟行放疗患者,行常规MR平扫+增强及BOLD-fMRI检查。获取PMC相关数据并与相应的MRI、CT图像融合,导入放疗计划系统并依此勾画靶区、危及器官及PMC,采用IMRT技术分别制定考虑(IMRT-PMC)与不考虑PMC(IMRT-noPMC)剂量保护的两种放疗计划并进行比较。结果IMRT-PMC与IMRTnoPMC相比较,计划靶区(PTV)的所受最大辐射剂量(Dmax)、平均辐射剂量(Dmean)及适形指数(CI)、剂量均匀性指数(HI)差异均无统计学意义(P均>0.05),常规危及器官的Dmax及Dmean差异均无统计学意义(P均>0.05)。IMRT-PMC计划中患侧、健侧PMC的Dmax及Dmean均明显低于IMRT-noPMC计划(P均<0.05)。结论 BOLD-fMRI能够明确PMC的位置及与脑胶质瘤术后放疗靶区的关系,有助于制定保护性放疗方案,最大程度减低PMC所受辐射剂量,从而降低放疗后发生放射性损伤的可能。     

顶枕叶胶质瘤非共面三维适形放疗与调强放疗的剂量学对比研究

目的比较顶枕叶脑胶质瘤非共面三维适形放疗(three-dimensional conformal therapy,3D-CRT)与调强放疗(intensity modulated radiation therapy,IMRT)对靶区剂量分布及周围正常组织的影响,为临床应用提供参考。方法选择2010-07-01-2012-08-01广东药学院附属第一医院肿瘤科顶枕叶脑胶质瘤患者8例,每例患者分别设计非共面3D-CRT及IMRT计划。比较两种放疗计划的靶区剂量学特点以及脑干、视交叉和视神经等正常组织的受照射剂量及体积。结果 IMRT计划中靶区覆盖V95(98.40±1.04)优于3D-CRT(96.27±0.64),差异有统计学意义,P<0.001。两组计划的适形指数(conformity index,CI)相仿,差异无统计学意义,P>0.05;IMRT计划中的均匀指数(homogeneity index,HI)值(1.03±0.009 0)小于3D-CRT的HI值(1.05±0.006 5),差异有统计学意义,P<0.05。IMRT计划中脑干D5、Dmean和Dmax与3D-CRT的参考指标比较差异无统计学意义,P>0.05。其他危及器官视交叉、视神经、垂体、晶体及眼球,IMRT计划受量大于3D-CRT的,差异均有统计学意义,P值均<0.05。IMRT计划中正常脑组织V24Gy(42.32±6.08)、V18Gy(45.82±6.15)大于3D-CRT(35.01±6.86,39.33±7.21),P<0.05。结论顶枕叶胶质瘤,IMRT与3D-CRT均能满足靶区要求及保护危及器官,虽然IMRT在靶区覆盖率、均匀性方面优于3D-CRT,但同时也增加了正常脑组织的照射剂量。     

C6胶质瘤荷瘤大鼠刀照射后胶质瘤细胞死亡方式实验研究

目的 采用放射线照射大鼠C6脑胶质瘤模型，分析放射线诱导胶质瘤细胞死亡方式的发生规律。方法选用24只生后5—6周雌性SD大鼠，购自安徽医科大学实验动物中心。大鼠C6胶质瘤细胞购自中科院细胞库。所有大鼠均采用立体定向法制作脑胶质瘤模型，即人脑皮质下5mm注入4m体外培养和传代后的C6细胞悬液。随机抽签法将大鼠分为9Gy照射组、12Gy照射组和模型组，每组8只。前2组分别于造模后21d行照射剂量分别为9Gy、12Gy伽玛刀治疗，模型组未给予照射。治疗后1周取大鼠肿瘤与脑组织交界处组织，采用流式细胞仪检测肿瘤细胞坏死率及凋亡率，HE染色观察组织学变化。结果纳入大鼠24只，模mm和实验组2分别有1只大鼠在麻醉意外中死亡，其余22只大鼠均进入结果分析。①肿瘤细胞坏死率及凋亡率：两剂量照射组肿瘤细胞凋亡率和坏死率均高于模型组，差异有统计学意义（P〈0．05）；9Gy照射组肿瘤细胞的凋亡率高于12Gy照射组，坏死率低于12Gy照射组，差异有统计学意义（P〈0．01）。②组织学变化：各组肿瘤与脑组织均可见肿瘤生长，伽玛刀两剂量组治疗后出现了肿瘤中心坏死，坏死区细胞稀疏，向外细胞渐增多，其间含有很多的破碎细胞，再向外则为密集的瘤细胞，并有细胞内、外的水肿和出血，同时也有不同程度的核固缩细胞，12Gy照射组较9Gy照射组坏死增加。结论伽玛刀可诱导脑胶质瘤模型大鼠肿瘤细胞凋亡和坏死，在治疗剂量范围内，随着剂量的增加肿瘤坏死有增加趋势。