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1.

Background  Chemotherapy is the most frequently adopted adjuvant therapy of pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC), but the development of drug resistance reduces its effectiveness. Clarification of the mechanism of multidrug resistance (MDR) development in PDAC is needed to improve the therapeutic effect of chemotherapy. This study was aimed to investigate the molecular mechanism of MDR of PDAC and to identify genes associated with MDR development.
Methods  The gene expression profiles of cell line SW1990 and three drug-selected pancreatic chemoresistant sub-lines, SW1990/5-Fu, SW1990/ADM and SW1990/GEM, were obtained using an oligonucleotide microarray (Affymetrix HG U133 2.0 plus) that contained approximately 38 000 human genes. The microarray results were validated by real-time quantitative polymerase chain reaction and Western blot analysis.
Results  There were 165 genes and expressed sequence tags, some of which have never been linked to drug resistance, that were up- or down-regulated at least 2-fold in all resistant sub-lines when compared with SW1990. According to Gene Ontology annotation, differentially expressed genes related to MDR in pancreatic cancer belong to many functional families and with diverse biological processes. Genes related to antioxidant activity, apoptosis, the cell cycle, signal transduction and intracellular adhesion may undergo epigenetic changes preceding MDR development. A hierarchical clustering was conducted and several interesting clusters were discovered that may be primarily related to cell cycle and developmental regulation. A prediction rule was built from the expression profiles of 117 genes after support vector machine (SVM) analysis, and the prediction result was examined by cytotoxic testing. As a result, a differential gene expression pattern was constructed in multidrug resistant pancreatic cancer cells.
Conclusions  The findings of this study prove that construction of a chemoresistance prediction rule, based on gene expression patterns, is practical. These data provide new insights into the molecular mechanism of pancreatic cancer MDR development and may be useful for the detection and treatment of MDR in pancreatic cancer patients.

  相似文献
2.
Bmi-1基因过度表达与胃癌分化、转移及预后的关系   总被引:13,自引:0,他引:13  
目的 探讨胃癌组织中Bmi-1基因mRNA表达与胃癌分化、转移及临床预后的关系.方法 收集我院2006年5月~2006年11月共42例行胃癌手术切除标本,提取肿瘤及癌旁组织配对标本的总RNA,用RT-PCR方法测定Bmi-1基因表达,并结合临床资料,对Bmi-1基因差异表达与胃癌病人临床表现的相关性进行分析研究.结果 42例配对标本分别进行Bmi-1 mRNA荧光检测比较,29例标本的肿瘤组织中Bmi-1基因mRNA表达明显高于癌旁正常胃组织.Bmi-1mRNA的表达与胃癌大小、淋巴结转移和浸润深度密切相关(P<0.05),而与患者的性别、年龄、肿瘤分化程度等无关(P>0.05).并且Bmi-1 mRNA阳性表达者生存率明显低于阴性者.结论 Bmi-1基因在胃癌组织中表达状态与胃癌的生长和浸润转移关系密切,Bmi-1基因mRNA可望作为胃癌病情发展及指导临床治疗的标记物之一,Bmi-1 mRNA的测定有助于判断肿瘤预后.  相似文献
3.
Jiang Z  Li XG  Hu J  Lu DR  Zhou W  Jiang YQ  Li CY 《中华医学杂志》2007,87(5):292-297
目的研究肿瘤抑制基因SLC5A8和TMS1/ASC在胶质瘤中的启动子区甲基化和mRNA表达情况,探讨其与临床情况之间的关系。方法通过甲基化聚合酶链反应(MSP)检测SLC5A8和TMS1/ASC基因在88例胶质瘤组织、10例正常脑组织及胶质瘤细胞株U251和SHG-44中的DNA甲基化情况;通过传统逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和实时定量PCR检测SLCSA8和TMS1/ASC的mRNA表达情况;检测去甲基化试剂5-氮杂脱氧胞苷(5-Aza-CdR)作用于细胞株后,对基因DNA甲基化和mRNA表达的影响。结果在88例胶质瘤中,SLC5A8启动子区的甲基化发生率为70.45%(62/88),其甲基化率随胶质瘤恶性程度的增加而增高;TMS1/ASC启动子区的甲基化发生率为51/88(57.95%),其甲基化率随胶质瘤恶性程度的增加而降低。10例正常脑组织中均未检测到SLC5A8和TMS1/ASC基因的甲基化。在各级别胶质瘤中SLCSA8和TMS1/ASC的mRNA与正常脑组织相比均表达下调,差异均有统计学意义(均P〈0.05)。在U251和SHG-44胶质瘤细胞株中均检测到SLC5A8和TMS1/ASC基因的甲基化,去甲基化试剂5-Aza-CdR均能重新激活SLC5A8和TMS1/ASC基因的表达。结论SLC5A8和TMS1/ASC基因在胶质瘤中的启动子区甲基化导致其mRNA表达下调,其甲基化的发生率及mRNA表达与胶质瘤的恶性程度密切相关。  相似文献
4.
目的:观察腺病毒介导的野生型p53基因联合抗血管生成小肽 F56对乳腺癌移植瘤及其肺转移灶的抑制作用.方法:将人乳腺癌BICR-H1细胞接种于裸鼠或NOD/SCID小鼠乳垫内.成瘤后,裸鼠随机分成Adp53 F56组、 Adp53组、F56组和空白对照组,NOD/SCID小鼠则随机分成Adp53 F56组、Adp53组、F56组、Adlacz组和空白对照组,分别采用腺病毒p53、F56或二者联合治疗,以小肽溶剂作对照,NOD/SCID小鼠还加用腺病毒空载体(Adlacz)作对照.观察裸鼠移植肿瘤体积、组织病理学改变,用免疫组织化学方法检测肿瘤p53、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)的表达及微血管密度(microrascular density, MVD);观察NOD/SCID小鼠移植瘤的肺转移情况.结果:p53基因、F56及二者联合治疗均能明显抑制裸鼠移植瘤生长,但以联合治疗组最显著,Adp53 F56组、Adp53组、F56组和空白对照组肿瘤最终的相对生长体积分别为2.47、4.37、4.69和12.49 ;免疫组织化学检测发现,Adp53 F56组和Adp53组肿瘤内p53表达增高,P53阳性率分别增高了9.4%、6.3%,但与空白对照组比较,差异无统计学意义(P=0.693);Adp53 F56组、Adp53组、F56组VEGF表达下降, VEGF阳性率分别下降21.9%、9.4%和3.1%,但与空白对照组比较,差异亦无统计学意义(P=0.284);Adp53 F56组、Adp53组、F56组MVD分别为14.50±2.54、16.28±3.44和18.06±7.66,与空白对照组(24.93±6.53)比较,差异有统计学意义(P=0.000), 且Adp53 F56组、Adp53组、F56组瘤内出现坏死,并以Adp53 F56组最为明显.NOD/SCID小鼠Adp53 F56组、Adp53组、F56组肺转移灶平均数目分别为1.143±0.378, 2.750±0.886, 3.375±0.518,较Adlacz组(5.000±0.816)和空白对照组(5.670±0.817 )都显著减少(P=0.000),尤以Adp53 F56组最少.结论:p53基因联合抗肿瘤血管生成小肽F56可显著抑制肿瘤的生长和转移.p53基因影响肿瘤生长与转移的因素之一可能与p53对VEGF的抑制作用有一定关系.  相似文献
5.
大肠埃希菌耐药基因近年国内研究进展   总被引:11,自引:0,他引:11  
本文就大肠埃希菌耐药基因近年国内研究进展进行扼要的阐述,包括β-内酰胺类药物耐药基因、氨基糖甙类药物耐药基因、喹诺酮类药物耐药基因、广谱抗菌药物耐药基因、消毒剂耐药基因耐药基因载体等。  相似文献
6.
腺病毒介导的野生型p53基因治疗肿瘤研究进展   总被引:11,自引:8,他引:3  
恶性肿瘤的发生与基因突变有密切关系。抑癌基因p53编码转录因子P53蛋白在调控癌基因表达、DNA合成和损伤修复以及细胞凋亡中起关键作用。已证实50%以上肿瘤细胞存在p53基因突变,p53被认为在肿瘤形成中起非常重要作用。p53基因治疗的目的是纠正恶性细胞中突变的p53基因功能,在多种肿瘤的体内外试验中显示出明显疗效。作者就这方面研究进展作一综述,重点讨论腺病毒介导的p53基因治疗。  相似文献
7.
2006年广东省流感病毒流行的分子基础   总被引:11,自引:5,他引:6  
目的了解广东省2006年流行性感冒(流感)流行情况的分子基础。方法选择广东省流感监测网络实验室分离的11株流感毒株,对血凝素基因进行基因和抗原性的分析。此外,还检测人群抗体水平。结果2006年流行的H1N1亚型病毒血凝素蛋白重链(HA1)区氨基酸序列与A/New Caledonia/20/99(H1N1)相比,同源性为95.7%~96.3%,有2个抗原决定簇的氨基酸发生了替换。Victoria系的HA1区基因与B/HongKong/330/2001相比,同源性为97.2%~97.5%,有6个位于抗原决定簇的氨基酸发生了替换,这种变化和B/Malaysia/2506/2004相一致,这在B型的基因种系发生树也得到证实。同时发现人群针对H1N1亚型和B/Victoria的抗体水平较低。结论2006年广东H1N1亚型和B/Victoria系病毒株发生了一定程度的变异,以及人群保护性抗体水平较低,共同造成其在本地的流行。  相似文献
8.
目的:利用羟基磷灰石纳米颗粒(hydroxyapatite nanoparticle, HAT)携带构建的神经营养因子-3 (neurotrophic factor-3,NT-3)-绿色荧光蛋白基因(enhancement type Green fluorescent protein C2, pEGFPC2),通过耳蜗灌注方法转染兴奋毒性损伤后的豚鼠耳蜗螺旋神经节细胞(spinal ganglion cells,SGCs),观察pEGFPC2-NT3的表达及其对耳蜗螺旋神经节细胞的保护作用.方法:构建携带绿色荧光蛋白报告基因的重组质粒pEGFPC2-NT3.通过耳蜗灌注海人酸(kainic acid,KA)建立豚鼠耳蜗兴奋性损伤模型,在给KA 1周后利用HAT携带重组质粒进行耳蜗灌注以转染耳蜗螺旋神经节细胞,免疫组化法观察转染后1周NT-3的表达及4周后电镜下螺旋神经节细胞形态学变化,同时观察对听觉脑干诱发电位(auditory brain-stem response,ABR)的影响.结果:成功构建豚鼠耳蜗兴奋损伤模型.灌注重组质粒后1周免疫组化法观察到螺旋神经节细胞胞浆内NT-3蛋白表达.4周后电镜下螺旋神经节细胞形态学损害减轻,ABR检测听功能较兴奋毒性损害后有恢复.结论:在豚鼠耳蜗灌注KA造成耳蜗兴奋性损伤后第7天,经耳蜗鼓阶转染羟基磷灰石纳米颗粒介导的NT-3基因仍可减轻KA对耳蜗螺旋神经节细胞的兴奋性毒性损伤.  相似文献
9.
2009年新型甲型H1N1流感病毒血凝素基因进化分析   总被引:10,自引:2,他引:8       下载免费PDF全文
目的:探讨2009年新型甲(A)型H1N1流感病毒血凝素(HA)基因与世界各地不同年代分离的A/H1N1代表株HA基因的进化关系。方法:从NCBI数据库下载2009年新型A/H1N1亚型流感病毒的HA基因序列以及以往流行的人、猪和禽的A/H1N1亚型流感病毒参考序列,采用Molecular Evolutionary Genetics Analysis version 4.0(MEGA4.0)软件进行序列比对和构建系统进化树,并分别比较2009年新型甲型H1N1流感病毒HA基因与北美地区、欧洲地区、亚洲地区A/H1N1流感病毒HA基因编码蛋白的氨基酸序列。结果:不同时期人A/H1N1亚型流感病毒代表株HA基因进化分析显示:2009年新型A/H1N1流感病毒HA基因与1976~2007年北美地区分离的7株人A/H1N1亚型流感病毒具有较高的同源性,与欧洲和亚洲地区的同源性较低。不同种属间A/H1N1亚型流感病毒HA基因进化分析显示:2009年新型A/H1N1流感病毒HA基因与1998和2007年北美地区分离的A/H1N1猪流感病毒的HA基因进化关系较近,与欧洲及亚洲地区分离的A/H1N1猪流感病毒及A/H1N1禽流感病毒进化关系较远。氨基酸比对结果显示2009年新型A/H1N1流感病毒HA基因的重要抗原位点与北美地区分离的A/H1N1猪流感病毒相近,与欧洲和亚洲地区分离的A/H1N1猪流感病毒及人类流感病毒疫苗株相比变化较大。结论:2009年新型甲型H1N1流感病毒HA基因可能是北美地区甲型H1N1猪流感病毒长期进化并与该地区人A/H1N1流感病毒部分基因片段重排的结果,对人H1N1甲型流感病毒疫苗可能并不敏感。  相似文献
10.
1190例非综合征性耳聋患者GJB2基因突变序列分析   总被引:10,自引:0,他引:10  
Yu F  Han DY  Dai P  Kang DY  Zhang X  Liu X  Zhu QW  Yuan YY  Sun Q  Xue DD  Li M  Liu J  Yuan HJ  Yang WY 《中华医学杂志》2007,87(40):2814-2819
目的分析非综合征性耳聋(NSHI)患者GJB2基因的突变序列,为绘制中国NSHI人群GJB2基因的突变图谱奠定基础。方法收集北京、河北、黑龙江、吉林、内蒙古、山西、河南、湖北、陕西、甘肃、宁夏、青海、安徽省、江苏、上海、福建、广东、广西等地区聋哑学校1190例NSHI患者及301例正常对照的血样,进行GJB2基因聚合酶链反应(PCR)扩增产物测序,检测GJB2基因的序列改变,对GJB2基因的序列改变进行统计。结果1190例患者中,共检测到明确病理性突变16种。NSHI患者组和对照组之间235delC、299-300delAT、176dell6bp差异有统计学意义(均P〈0.01)。结论确定了235delC为中国NSHI人群中GJB2基因最常见的突变方式,其次为299-300delAT、176ddl6bp,检测结果为绘制中国NSHI人群GJB2基因的突变图谱奠定了理论基础。  相似文献
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