南方红豆杉不同部位紫杉烷类含量累积规律分析

目的:测定南方红豆杉不同组织器官紫杉烷类物质的含量,优选出最佳采收部位,为其开发利用提供依据。方法:分别采集南方红豆杉植株主干树皮、侧皮、根皮、须根、茎、叶六个组织器官材料,运用HPLC法检测紫杉烷类物质含量,确定其最佳利用组织器官。结果:南方红豆杉四种紫杉烷类在组织中的分布明显地受组织分化的影响,其中10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ在叶中最多,7-表-10-去乙酰基紫杉醇在侧皮中最多,紫杉醇、三尖杉宁碱则在根中最多。结论:叶是合成紫杉醇前体物质的主要器官,而皮与根则是合成及积累紫杉醇的主要组织器官。     

利用转录组测序分析与华重楼种子休眠解除相关差异基因

为探究华重楼种子休眠解除过程中差异基因的表达情况及相关代谢通路,以华重楼休眠解除前后种胚为材料,利用新一代高通量测序手段对供试样品进行转录组测序并进行系统生物信息学分析。从cDNA文库中分别获得62 882 650,62 263 366个clean reads,共得到69 248个差异表达基因,上调的表达基因有56 426个,下调的表达基因有12 822个。共有138 267个差异表达基因被GO功能注释到生物进程、分子功能和细胞组分3个大类58个亚类,注释的差异表达基因与代谢过程、生物调控、细胞组分合成和酶催化活性等密切相关。对58 722个差异表达基因进行pathway显著性富集分析,共发现139个代谢通路,休眠前后的DEGs主要富集在碳代谢、次生代谢产物生物合成和多糖代谢等途径。基于KEGG数据库中注释结果,共发现16条与华重楼休眠解除相关的代谢通路。华重楼种子发育与休眠解除过程中大量与种胚形态建成、多糖分解及蛋白质合成的差异基因参与表达,涉及到多个代谢途径的相互作用,构成复杂的休眠解除调控网络。     

南方红豆杉多糖对宫颈癌细胞增殖及凋亡的影响

〔摘 要〕 目的：探究南方红豆杉多糖对宫颈癌 HeLa 细胞株增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法：经体外培养并取 对数生长期人宫颈癌 HeLa 细胞，分别予以不同浓度红豆杉多糖（30、60、90、120 μmol·L-1），将其设为四组，并设对照 组加入等量 0.9 % 氯化钠溶液。应用 MTT 法检测细胞增殖情况，流式法检测细胞凋亡情况，Western blot 法检测 Survivin、 Caspase–3、Bcl–2、P53 蛋 白 表 达 情 况。 结果： 与 对 照 组 相 比，30 μmol·L-1 组、60 μmol·L-1 组、90 μmol·L-1 组、 120 μmol·L-1 组的宫颈癌 HeLa 细胞增殖抑制率、细胞凋亡率显著升高，差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。P53 蛋白表达 量明显升高，Survivin、Bcl–2、Caspase–3 蛋白表水平显著降低，差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。结论：南方红豆杉多糖 可抑制宫颈癌 HeLa 细胞增殖，促进细胞凋亡，其作用机制可能与下调 Survivin、Bcl–2、Caspase–3 表达，上调 P53 表达有关。     

两种柽柳对盐胁迫的生理生化响应

柽柳属(Tamarix chinensis L.)植物,为多年生泌盐盐生植物,是一类重要灌木植物,具有许多独特的生物、生态学特征。本研究以刚毛柽柳(T.hispida Wild)和长穗柽柳(T.elongata Ledeb)为研究对象,采用盆栽实验,开展耐盐性实验:中性盐NaCl设置0、50、100、150和200 mmoL/L 5个浓度水平,通过测定盐胁迫下两种柽柳的光合速率、蒸腾速率、游离脯氨酸含量、干重等生理指标,结果显示:刚毛柽柳和长穗柽柳均表现出较强的耐盐能力,但刚毛柽柳受NaCl胁迫的影响较小,表明刚毛柽柳耐盐性强于长穗柽柳,可作为柽柳属植物耐盐生理和分子机制研究的备选材料。     

Effect of compounds of Galla chinensis on remineralisation of initial enamel carious lesions in vitro

OBJECTIVE: To evaluate the effect of compounds of Galla chinensis on the remineralisation of initial enamel carious lesions in vitro. METHODS: Sixty bovine enamel blocks with early lesions were prepared and randomly divided into six treatment groups. The lesions were subjected to a pH-cycling regime for 12 days. Each daily cycle included 4x1min applications with one of six treatments; 1000ppm F aq. (as NaF, positive control); deionized water (negative control); or 4000ppm aqueous solutions of four G. chinensis extracts (GCEs); GCE, GCE-B, GCE-B1, or GCE-B2. Surface enamel microhardness was measured on the enamel blocks before and after demineralisation, and after pH-cycling, and percentage surface microhardness recovery (%SMHR) was calculated. The enamel specimens were then sectioned (thickness ca. 80microm) and examined by polarized light microscopy. RESULTS: All samples rehardened significantly compared to baseline. Fluoride had a significantly greater effect than all other treatments. In the GCEs groups, %SMHR was significantly greater than DDW for the GCE, GCE-B and GCE-B1 groups. There was no significant difference between the GCE-B2 group and DDW. Polarized light microscopy showed that the thickness of the surface layer increased obviously in all specimens including NaF group, GCE group, GCE-B group and GCE-B1 group. Negative birefringent band appeared in the lesions body and the depth of the lesions was obviously reduced. CONCLUSION: The present study has demonstrated the potential of three GCEs (GCE, GCE-B and GCE-B1) to effect net rehardening of artificial carious lesions under dynamic pH-cyclic conditions.     

超声波协同复合酶提取菟丝子总黄酮工艺优化

目的:将酶解法和超声波法联用,通过工艺优化提高菟丝子总黄酮的含量。方法:实验采用紫外分光光度法测定总黄酮提取率,选取酶解pH、酶解温度和超声时间3个指标为影响因素,菟丝子总黄酮提取率为响应值,Design-Expert 8.0统计分析软件的响应面分析法安排试验后获得最适合工艺参数。结果:最适合的工艺参数是PH为4.0,酶解温度为52.6℃,超声时间为20.3 min,在此条件下得到的总黄酮质量分数为23.39 mg·g~(-1)。结论:此工艺操作简单、稳定性好、总黄酮提取率高,可为菟丝子总黄酮的相关工业生产提供技术支持。     

射干传统功效考证及其实验药理学验证

目的：通过古籍文献及现代文献,了解射干从古至今的功效演变及治疗病种变化,利用药理药效实验手段,对其主要功效进行验证,将传统中药特色优势与现代化科学技术相结合,有助于推进中医药现代化进程,对中药新药研发有效成分、治疗病种的选择具有重要意义。方法：从本草考证射干功能主治、从医籍考证射干治疗病症、基于《普济方》数据库管理系统分析射干复方治疗病种,对射干主要功效主治进行总结,结合现代药理研究射干主要成分抗炎作用机制,筛选动物模型和考查指标,对射干功效进行初步验证。结果：综合古典本草医籍应用情况和方药数据库分析结果表明射干有消痰、利咽的功效,是治疗咽痛喉痹的要药;现代研究中实验组血清及咽喉组织中IL-4、血清及肺组织中IgE、血清中LTC4水平均较模型组显著降低（P＜0.05）。结论：射干提取物对慢性咽炎的治疗作用可能是通过降低血清及肺组织中IgE水平,抑制血清及咽喉组织中IL-4和血清中LTC4的表达等来实现。     

复方枣仁安神胶囊中黄连的定性鉴别和定量分析

目的:建立复方枣仁安神胶囊中黄连质量标准。方法:采用薄层色谱鉴别法对黄连进行定性鉴别,采用UPLC法测定黄连中盐酸小檗碱的含量。色谱条件:色谱柱:Waters Acquity UPLC BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7m);流动相:乙腈-0.05 mo L·L-1磷酸二氢钾溶液(30∶70)(0.5%三乙胺,磷酸调p H值至3.0~4.0);检测波长为345 nm;流速:0.25 m L·min-1;柱温:25℃。结果:在试验条件下,薄层斑点清楚,阴性无干扰,分离效果较好,重复性良好。UPLC方法学考察表明,制剂中盐酸小檗碱在0.25~1.50g范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为97.56%,RSD=1.54%(n=6)。结论:该方法准确、快速,重复性好,可用于复方枣仁安神胶囊中黄连的质量控制。     

五味子抗氧化作用研究

目的优化五味子抗氧化物的提取条件;分析湖北产和辽宁产五味子提取物的DPPH清除能力。方法以DPPH自由基的清除能力为参考指标,采用单因素实验的方法,考察溶剂种类、乙醇浓度、料液比、提取时间、提取次数和提取方法等因素对五味子提取物抗氧化作用的影响。结果五味子抗氧化物的最优提取条件为:以60%的乙醇为提取溶剂,超声法提取,料液比为1∶30(g·m L-1),提取次数3次,每次提取20min,室温提取;湖北产和辽宁产五味子提取物清除DPPH自由基的IC50分别为3.79mg·m L-1和7.60mg·m L-1。结论五味子提取物具有较强的抗氧化作用,且湖北产五味子提取物的抗氧化作用比辽宁产五味子的强。     

IgE- and T-lymphocyte-Dependent Hypersensitivity Responses Induced in Mice by Exposure to Shrimp (Fenneropenaeus chinensis) Proteins

Shellfish allergy is a common cause of food-induced anaphylaxis in the human, and shrimp is one of the most frequently reported causes of allergic reactions. To identify the immunoglobulin E (IgE)-binding proteins of Chinese shrimp (Fenneropenaeus chinensis), the crude extracts were analyzed by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS–PAGE) and Western blotting. After exposure of shrimp extracts to mice, the levels of shrimp allergen-specific IgE were determined by indirect ELISA. Histological and immunohistochemical staining of intestinal tract were further performed for immunological analysis. IgE-binding components with molecular masses of 40, 37, 28, 22, and 20 kDa at a high frequency are supposed to be major allergens of F. chinensis. In vivo experiments showed that shrimp extracts could lead to allergen-specific IgE reactivity, and increase mast cell degranulation and numbers of T lymphocytes. IgE- and T-lymphocyte-dependent hypersensitivity plays important roles in allergic reactions triggered by F. chinensis allergens.