基于HPLC指纹图谱、多指标成分含量测定结合化学计量学的怀牛膝质量评价＊

目的 本实验采用HPLC方法建立来自3个产地15批怀牛膝药材的指纹图谱，并对β-蜕皮甾酮，25R-牛膝甾酮，25S-牛膝甾酮进行含量测定，同时通过化学计量学的方法对15批怀牛膝进行质量评价。方法 选用Waters SunFire C₁₈（150 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，检测波长280 nm，以乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱，流速为1.0 mL·min^-1，柱温25℃，进样量10 μL。以β-蜕皮甾酮峰为参照峰，运用软件《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）》对15批怀牛膝药材进行相似度分析，使用Metabo Analyst 5.0网站进行聚类热图分析，使用SIMCA 14.1软件进行PCA和PLS-DA分析。结果 标定了31个共有指纹峰，指认了3个已知成分，并对其进行含量测定，化学计量学分析结果将15批怀牛膝药材样品分为3类，并且筛选了不同产地间潜在的差异性成分。结论 该方法具有良好的精密度、重复性以及稳定性，可为怀牛膝的质量评价与控制提供科学依据及参考。     

蒙药朱日亨滴丸源头把控——基于Q-Exactive高分辨质谱结合指纹图谱技术的蒙药广枣药材质量评价研究

目的 运用Q-Exactive高分辨质谱结合指纹图谱评价不同批次广枣药材质量,为朱日亨滴丸源头把控提供参考。方法 采用Agilent ZORBAX ECLIPSE XDB-C18色谱柱,以0.1%甲酸水-甲醇梯度洗脱30min,柱温为30℃,流速为1.0ml.min^-1。采用电喷雾(ESI)质谱离子源,在正离子与负离子模式下采集数据,检测范围为m/z 100-1500。依据精确质量数以及二级碎片离子,结合标准物质及相关数据库信息,对蒙药广枣药材主要化学成分进行定性研究。同时测定10批广枣药材,应用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A)”建立广枣指纹图谱,并对各共有峰进行化学成分归属,对鞣花酸进行定量,评价各批次药材的质量。结果 鉴定出广枣中的37种化合物,并以鞣花酸为参照物,建立广枣药材指纹图谱,10批次广枣药材相似均在0.90以上。不同批次广枣药材鞣花酸含量差异明显。结论 建立基于Q-Exactive高分辨质谱结合指纹图谱技术的蒙药广枣药材质量评价研究方法为广枣药材质量控制提供参考,也为主日亨滴丸源头保证提供科学依据。     

高乌头炮制品的HPLC指纹图谱研究及其2种生物碱成分含量测定

目的 建立不同产区高乌头炮制品的HPLC指纹图谱,并测定2种生物碱成分的含量,为高乌头制品质量控制提供参考依据。方法 通过HPLC梯度洗脱建立高乌头炮制品的指纹图谱,并采用中药指纹图谱相似度评价系统(2012版)、主成分分析(PCA)和聚类分析(CA)对指纹图谱进行分析。结果 建立了高乌头炮制品指纹图谱,10批高乌头制品的相似度均大于0.90,标定共有峰18个,并对其中2主要成分(高乌甲素、冉乌头碱)进行含量测定;聚类分析(CA)将所有批次高乌头制品分为4类,反映了10批不同产区高乌头制品的质量特征;主成分分析(PCA)筛选出累计贡献率达到88.824%的4个主成分,得到决定高乌头药材质量7个化学成分。结论 该方法重现性好、特征性强可用于高乌头炮制品全面质量评价。     

川芎地上部位的质量评价

目的:基于指纹图谱和含量测定对川芎地上部位(茎叶)进行质量评价。方法:采用Kromasil C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以0.1%磷酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,流速:1.0mL/min,进样量20μL,柱温35℃,检测波长254nm,建立HPLC指纹图谱;采用Kromasil C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以水(A)-甲醇(B)(34∶66)为流动相,等度洗脱,流速:1.0mL/min,进样量10μL,柱温35℃,330nm和237nm双波长测定藁本内酯和丁烯基苯酞的含量。结果:建立了13批川芎地上部位的HPLC指纹图谱,标定了20个共有峰,指纹图谱相似度在0.89以上;13批样品中藁本内酯和丁烯基苯酞的含量分别为0.0642%~0.2633%和0.0057%~0.0325%。结论:该方法操作简便,结果准确,重现性好,可以为川芎地上部位的质量评价和质量控制提供参考。     

三黄汤HPLC指纹图谱初步研究

目的通过HPLC指纹图谱探索三黄汤的药效物质基础。方法采用迪马公司Diamonsil C18色谱柱(250mm×4.6 mm,5μm),甲醇(A)-1%磷酸水溶液(B)梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1,柱温30℃,检测波长277nm,对10批三黄汤样本进行检测分析,建立三黄汤HPLC指纹图谱,对比相同条件下体外复方图谱、单味药材图谱、药材阴性图谱及混合对照品图谱,初步确认三黄汤主要有效成分及来源。结果在该色谱条件下,三黄汤指纹图谱中标示出44个共有峰,7个成分得到认定,其中绿原酸来源于茵陈;盐酸小檗碱来源于黄柏;黄芩苷来源于黄芩;甘草酸铵来源于甘草;大黄酸、大黄素、大黄酚来源于大黄。结论该方法准确可靠,重复性好,为三黄汤有效成分的确定提供了一定的实验依据。     

An analysis of whorl patterns for determination of hand

On crime scenes, whole set of the ten digit fingerprints are rarely found and usually chance prints in the form of single digit fingerprint are encountered. Determination of hand (Right or left) can be of vital importance to reduce the burden on the investigator and may thereby aid in fixation of absolute identity of the donor. In the present investigation, 500 randomly selected and bilateral rolled fingerprints of 250 healthy, consenting adult subjects of a central Indian (Marathi) population with whorl patterns were examined to determine the hand. It was found that by studying various parameters like; slope of apex ridges (towards right, left or absent), rotation of innermost ridges (either clockwise, anti-clockwise or absent), angle formed at both sides of core, position of the perpendicular bisector on the delta line (with respect to core), ridge tracing (outer, inner or meeting), higher ridge count, angle between deltas and core (at deltas), direction of the pattern (tilting/inclination) and distance between the deltas & the core; it is possible to successfully determine the hand of the print. Applying chi-square test, the results were found to be statistically significant at p < 0.01 levels.     

逍遥丸指纹图谱和掺伪检验方法的建立

目的:建立掺伪检验方法分析逍遥丸指纹图谱。方法:首先淹没逍遥丸制成粉末待用,试验相关的混合对照品溶液和供试品溶液,通过专属性试验、线性关系分析、精密度、重复性和稳定性试验以及加样回收率试验考察逍遥丸指纹图谱方法的严谨性,采用气相色谱法(GC法)和气相色谱法-质谱法联用法(GC-MS法)检测样品中薄荷脑和香芹酮的含量,并建立掺伪检验方法。结果:专属性、线性关系、精密度、重复性和稳定性和加样回收率试验结果均显示良好。A厂逍遥丸供试品中未检出香芹酮,而B、C厂均检测出含有香芹酮,且C厂香芹酮PA值高于B厂。薄荷脑和香芹酮的GC-MS特征离子峰分别是m/z 41、55、71、81、95和m/z 39、54、82、93、108。结论:基于建立掺伪检验方法对逍遥丸进行指纹图谱检测,可有效控制其药物质量。     

注射用血栓通(冻干)的HPLC指纹图谱研究

目的:建立注射用血栓通(冻干)的高效液相色谱指纹图谱。方法:色谱柱为Zorbax SB-Aq-C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),检测波长为203nm。结果:确定了注射用血栓通(冻干)的13个共有峰,并得到了以人参皂苷Rg1为内标的相对保留时间及峰面积比值,非共有峰面积未超过总峰面积的5%。结论:本方法简单、可靠,可用于注射用血栓通(冻干)的质量控制。     

竹节参化学成分及指纹图谱初步研究

目的:研究竹节参中皂苷类化学成分,并对其指纹图谱进行初步研究。方法:利用大孔吸附树脂柱、硅胶柱、制备型高效液相色谱(HPLC)法进行化合物的分离纯化,根据其理化性质和光谱数据进行结构鉴定;并研究湖北恩施产竹节参药材的HPLC指纹图谱。结果:从竹节参中分离得到3种皂苷类化合物,鉴定了其中2种,分别为人参皂苷Rd和人参皂苷Re。2个已鉴定化合物在湖北恩施产竹节参药材中含量较低。结论:本试验可为科学评价及有效控制竹节参药材的质量奠定基础。     

丹参多酚酸HPLC指纹图谱研究

目的:建立丹参多酚酸原料的指纹图谱研究方法。方法:以丹酚酸B为参照物,采用高效液相色谱法,色谱柱为Luna C18(2)100A(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.026%磷酸水溶液(梯度洗脱),检测波长为286nm,柱温为30℃,流速为1mL.min-1。结果:从所建指纹图谱中确定了5个共有峰,建立了丹参多酚酸的共有模式;在10批丹参多酚酸中有6批样品的指纹图谱相似度在0.90以上。结论:本方法简便、准确、重现性好,可为评价丹参多酚酸原料药的质量提供依据。