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1.
目的:探讨枳术丸水煎液及其拆方对大鼠结肠Cajal间质细胞(ICC)增殖和凋亡的影响及其分子机制,并从细胞分子层面分析中医攻补兼施法治疗慢传输型便秘可能的机制。方法:将40只大鼠随机分成白术组、枳实组、枳术丸组、空白血清组,每组10只。白术组灌以17.7 g·kg-1·d-1白术水煎液,枳实组灌以8.9 g·kg-1·d-1枳实水煎液,枳术丸组灌以26.4 g·kg-1·d-1枳术丸水煎液,空白血清组灌以无菌蒸馏水3 mL,每日1次,连续7 d,取血制备含药血清和空白血清。将4组含药血清分别配成5%,10%,15%,20%4个体积分数,干预24 h,观察ICC的数量、形态,用细胞增殖毒性检测试剂盒(CCK-8)检测各组细胞增殖情况,测定各组最佳干预体积分数。将大鼠结肠ICC细胞分为正常组、空白血清组、白术组、枳实组、枳术丸组,5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(EdU)检测各组ICC的增殖情况,流式细胞仪检测各组ICC的凋亡情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组ICC中X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP),增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达情况。结果:与正常组比较,空白血清组、白术组、枳实组最佳干预体积分数均为10%,枳术丸组最佳干预体积分数为5%。与正常组比较,所有实验中空白血清组对ICC增殖和凋亡的影响没有明显差异;与正常组及空白血清组比较,白术组、枳实组、枳术丸组ICC增殖率有显著差异(P0.05,P0.01),与白术组和枳实组比较,枳术丸组对ICC增殖率明显增加(P0.05,P0.01);与枳实组比较,白术组对ICC增殖率变化不明显。与正常组及空白血清组比较,白术组、枳实组、枳术丸组ICC的凋亡率无明显差异;与正常组及空白血清组比较,白术组、枳实组、枳术丸组内的XIAP,PCNA蛋白水平均明显上调(P0.05,P0.01),三组间比较差异不明显。结论:枳术丸、枳实、白术在一定浓度下均能通过增加XIAP,PCNA蛋白表达促进ICC的增殖,且对ICC的凋亡无明显影响;以攻补兼施法立法的方剂枳术丸能促进ICC的增殖,并且其增殖效果优于攻伐单药枳实和补益单药白术。 相似文献
2.
孙曼怡 《国际内分泌代谢杂志》2016,(3)
目的 探讨糖尿病结肠动力障碍大鼠结肠Cajal间质细胞(ICC)的凋亡及ICC的间隙连接蛋白43(Cx43)表达的变化在结肠动力障碍发生中的意义.方法 雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠36只,根据体质量及血糖按随机数字表法分为正常6周组、正常10周组、糖尿病6周组、糖尿病10周组,每组9只.腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型,检测体质量、空腹血糖及胃肠推进率;HE染色观察ICC;TUNEL法检测ICC的凋亡指数;免疫组化检测ICC的c-Kit、Cx43蛋白表达.结果 (1)糖尿病组较同时间点正常组体质量下降,空腹血糖升高,胃肠推进率降低,ICC的c-Kit、Cx43蛋白表达降低(F=76.68,1397.24,18.87,137.65,87.73,P均<0.05).(2)糖尿病10周组较糖尿病6周组空腹血糖升高,胃肠推进率降低,ICC的c-Kit、Cx43蛋白表达降低(F=76.68,1397.24,18.87,137.65,87.73,P均<0.05).(3)糖尿病组ICC的凋亡指数与同时间点正常组相比,差异无统计学意义;糖尿病10周组与糖尿病6周组ICC的凋亡指数差异也无统计学意义(P均>0.05).结论 ICC数量减少、Cx43蛋白表达降低可能是糖尿病结肠动力障碍的发生机制之一,且上述改变随病程发展而加重;ICC数量减少可能与ICC凋亡无关. 相似文献
3.
《陕西医学杂志》2020,(3):285-288
目的:观察出口梗阻性便秘(OOC)患者(OOC组)相对于混合痔患者(对照组)直肠肌壁的黏膜层、黏膜下层和肌层中Cajal间质细胞的异常变化,研究OOC患者疾病发生的病理生理机制。方法:通过改良TST法切除手术收集出口梗阻性便秘(OOC)患者及混合痔患者的梗阻段直肠黏膜及肌壁各36例,应用免疫组化标记物CD117标记Cajal间质细胞,然后人工计数和免疫组化分析软件观察CD117在患者黏膜层和黏膜下层中的表达有无异常改变。结果:出口梗阻性便秘患者直肠黏膜下层和肌层中CD117的表达数量较对照组减少(P<0.05)。出口梗阻性便秘患者直肠黏膜固有层中CD117的表达数量与对照组比较变化不大,甚至有所升高。结论:出口梗阻性便秘直肠黏膜下层及肌层中CD117的表达下调,这可能和Cajal间质细胞的分化障碍有关。 相似文献
4.
《中国药房》2019,(20):2757-2762
目的:探讨补阳还五汤对特发性肺纤维化(IPF)模型大鼠肺组织内皮间质转化(EndMT)的影响,并探讨其可能机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组[0.405 mg/(kg·d)]和补阳还五汤低、中、高剂量组[6.435、12.87、25.74g/(kg·d),以生药总质量计],每组8只。除正常组外,其余各组大鼠均于气管内注射博来霉素以复制IPF模型。自造模后第2天起,正常组和模型组大鼠均灌胃水[10 m L/(kg·d)],各给药组大鼠灌胃相应药物,每日1次,连续28 d。末次给药24 h后,采用免疫组化法检测大鼠肺组织中内皮细胞标志物[血小板内皮细胞黏附分子1、血管内皮细胞钙黏蛋白]和间质细胞标志物[α-平滑肌肌动蛋白、成纤维细胞特异性蛋白1]的表达情况,采用蛋白质印迹法检测大鼠肺组织中Notch4、DLL4的表达情况。结果:与正常组比较,模型组大鼠肺组织中内皮细胞标志物的表达水平均显著降低,间质细胞标志物以及Notch4、DLL4的表达水平均显著升高(P<0.01)。各给药组大鼠肺组织中内皮细胞标志物的表达水平均显著高于模型组,补阳还五汤低剂量组上述指标显著低于地塞米松组;间质细胞标志物以及Notch4、DLL4的表达水平均显著低于模型组,补阳还五汤低剂量组上述指标显著高于地塞米松组(P<0.05或P<0.01)。结论:补阳还五汤可通过干预EndMT来减轻大鼠的IPF,其机制可能与抑制DLL4/Notch4信号通路有关。 相似文献
5.
《中国老年学杂志》2019,(5)
目的建立过氧化氢介导的瓣膜内皮细胞(ECs)氧化应激(OS)模型,探讨OS作用下ECs和间质细胞(VICs)之间的相互作用关系。方法不同浓度过氧化氢(H_2O_2)处理ECs不同时间后,收集OS-ECs上清;上清作用于VICs,通过检测细胞增殖、凋亡、分化及存活率,验证OS-ECs上清对VICs生长有一定影响。结果随着处理时间的延长,ECs和VICs均有不同程度受损。其中,50μmol/L H_2O_2处理ECs,OS-ECs上清可稳定VICs生长状态。结论 50μmol/L H_2O_2处理ECs并收集上清,作用于VICs是建立OS细胞模型的最佳条件。ECs对VICs有一定程度的保护作用。 相似文献
6.
7.
乳腺癌是一种具有异质性的全身性疾病,其微环境主要由肿瘤细胞及多种非肿瘤细胞组成。其中间充质干细胞在肿瘤的发生发展中发挥着重要作用。间充质干细胞可直接通过缝隙连接、膜受体和微管或间接通过可溶性分子与肿瘤细胞及其微环境相互作用。肿瘤相关成纤维细胞来源于癌旁成纤维细胞或间充质干细胞,在肿瘤耐药过程中发挥重要作用。在乳腺癌中,肿瘤干细胞与其所处微环境处于动态平衡状态,其表型受细胞因子的密切调控。间质细胞通过与乳腺癌细胞的相互作用,进而对其生物学特性产生重要影响。另外,间质细胞可改变肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,进而使其产生耐药。因此,解决肿瘤间质细胞介导的化疗耐药是成功治疗中晚期乳癌的关键。本文主要阐述了间质细胞在乳腺癌微环境中介导化疗耐药的研究进展。 相似文献
8.
Xiao-Nan Dai Shan Liu Li Shao Chao Gao Li Gao Jia-Yin Liu Yu-Gui Cui 《Asian journal of andrology》2014,16(5):689-693
SET蛋白是一个多功能蛋白,在调节包括DNA复制、核小体装配、染色体修饰、DNA转录、细胞周期、细胞凋亡等细胞生物学过程中起重要作用。前期研究发现,SET在卵巢中调节雄激素合成。然而,SET在睾丸组织中的表达及其功能仍然不明确。在此,我们检测不同年龄段小鼠睾丸组织中SET表达,探讨其在精子发生及睾酮生成方面的潜在功能。48只不同年龄段的雄性小鼠(1周龄的ICR雄性小鼠作为幼年期组,4周龄小鼠作为性发育前组,12周龄小鼠作为性成熟期组,12月龄作为老年组)。免疫组织化学方法观察SET各年龄段小鼠的定位表达;qRT-PCR和Western Blot分别检测睾丸中SET mRNA和蛋白水平表达。SET表达定位于生精小管中的精原细胞、精母细胞,在青春期前及成熟期的单倍体和四倍体生殖细胞中高表达;成熟期及老年期的睾丸间质细胞中也有SET的表达;支持细胞中很少量表达。青春期前SET的mRNA与成熟期相比表达量最高(P〈0.05),而SET蛋白在性成熟期小鼠睾丸中表达最高(P〈O.05)。SET主要表达于精原细胞和精母细胞,少量表达于支持细胞,表明SET可能与精子发生有关。SET还表达于睾丸间质细胞,则与睾酮生成有关。 相似文献
9.
骨髓间质干细胞转染牙本质涎磷蛋白基因的实验研究 总被引:3,自引:1,他引:3
目的 评价牙本质涎磷蛋白(DSPP)转基因修饰骨髓问质干细胞(BM-MSC)后,对BM-MSC生物学特性及DSPP表达的影响。方法构建含小鼠DSPP基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)/DSPP,用脂质体介导转染大鼠BM-MSC;RT-PCR检测转染后细胞的Pax-9和DMP-1基因表达情况;检测转染细胞矿化诱导后Von Kossa钙盐染色计算单位面积钙结节形成率。结果成功构建DSPP真核表达载体pcDNA3.1(+)/DSPP,酶切后得到3.0kb和5.4kb的片段,与回收的目的基因和载体基因片段大小相符;经转染BM-MSC后24h可见DSPP基因表达,48h后可见有Pax-9基因表达,无DMP-1基因表达;转基因后的BM-MSC免疫组化染色显示DSPP阳性;转染细胞矿化诱导后钙结节形成率高于未转染细胞。结论BM-MSC转基因表达DSPP能够增强其矿化能力,并诱导牙齿发育相关基因的表达,提示DSPP可能在牙齿发育早期具有一定作用。 相似文献
10.
胃肠道间质瘤 总被引:3,自引:0,他引:3
胃肠道间质瘤(gastrointestinalstromaltumor,GIST)是一种非定向分化的消化道间质肿瘤,作为一组独立的疾病,既特殊又常见,在消化道间叶性肿瘤中占有重要地位,大多数间叶性肿瘤应该是GIST,平滑肌瘤、平滑肌肉瘤不常见,雪旺瘤(神经鞘瘤)、神经纤维瘤更少,颗粒细胞瘤、血管肉瘤等则十分罕见。GIST无论在形态、免疫表型、遗传特征上都有不同于平滑肌瘤及雪旺瘤的特征。其诊断标准为形态学上似平滑肌或神经的梭形细胞和上皮样肿瘤,经免疫组化和/或电镜检查,c-kit/CD117阳性或c-kit/CD117阴性而CD34阳性,且伴平滑肌分化或神经分化或双向分… 相似文献