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1.
  目的  建立超高效液相色谱-质谱联用(UFLC-MS/MS)法分析蜈蚣中3种酶解多肽成分TD1(LEEDLERSEERL)、TD2(EEKDKALQNAEGEVAAL)、TD3(MILPTGASSF), 比较不同品种蜈蚣中肽类成分的差异, 寻找蜈蚣特异性多肽, 用于蜈蚣的鉴别。  方法  3种肽类成分的UFLC-MS/MS法, 色谱柱为XSelect HSS T3(4.6 mm×150 mm, 3.5 μm); 流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液,梯度洗脱。采用三重四极杆质谱检测器, 电喷雾离子化(ESI), 正离子模式下多反应监测(MRM)进行信号采集。样品采用正交试验方法, 对蛋白提取方法进行优化, 最终确定提取方法为蛋白裂解液超声处理60 min。得到的蜈蚣蛋白提取溶液经胃蛋白酶酶解并脱盐后, 注入液质联用仪分析。测定了20批蜈蚣及8批其他动物药中3种肽类成分, 并对结果进行比较。  结果  在地龙、僵蚕、水蛭、土鳖虫和全蝎中未检出TD2和TD3, TD1与TD2在少棘巨蜈蚣与哈氏蜈蚣、墨江蜈蚣中存在较大差异, TD3在少棘巨蜈蚣与黑头蜈蚣、多棘蜈蚣中有较大差异。  结论  该方法可用于区分少棘巨蜈蚣与地龙、僵蚕、水蛭、土鳖虫和全蝎, 同时通过比较3种肽段的差异, 区分药典品种少棘巨蜈蚣和4种常见非药典品种蜈蚣, 为蜈蚣的质量评价和基础研究提供参考。   相似文献   
2.
目的探讨肺癌患者化疗后的癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和鳞状上皮细胞癌抗原(SCC-Ag)表达变化。方法选取2017年5月至2020年2月间南京市六合区人民医院收治的100例肺癌患者,将这些患者作为肺癌组,另随机选取同期100例健康体检人员作为健康组。统计分析两组人员化疗前的血清NSE、CEA、SCC-Ag表达水平、肺癌组化疗成功患者化疗前后的血清NSE、CEA、SCC-Ag表达水平、肺癌组化疗失败患者化疗前后的血清NSE、CEA、SCC-Ag表达水平。结果肺癌组患者化疗前的血清NSE、CEA和SCC-Ag表达水平均高于健康组,差异均有统计学意义(均P <0.05)。肺癌组化疗成功患者化疗后的血清NSE、CEA和SCC-Ag表达水平均低于化疗前,均高于健康组,差异均有统计学意义(P <0.05)。肺癌组化疗失败患者化疗后的血清NSE、CEA、SCC-Ag表达水平均高于化疗前,均高于健康组,差异均有统计学意义(P <0.05)。结论对肺癌患者的NSE、CEA、SCC-Ag表达水平进行检测能够将化疗效果有效反映出来,进而有效指导临床的下一步治疗工作,从而有效改善患者预后。  相似文献   
3.
目的:基于 SEER数据库探讨不同治疗模式对局部早期下咽鳞状细胞癌(hypopharyngealsquamouscellcar cinoma,HPSCC)患者(T1/2N+)生存的影响,构建并验证列线图模型。方法:提取 SEER数据库中 2004~2015年确诊 的伴颈部淋巴结转移的局部早期 HPSCC(T1/2N+)患者 1168例,采用单因素、多因素 Cox风险回归分析的方法获取影响患者预后的独立危险因素并构建列线图模型,用于预测 HPSCC患者 2年、3年及5年的总体生存率(overallsur vival,OS)和肿瘤特异性生存率(cancer specificsurvival,CSS)。采用一致性指数(C index)、ROC曲线及校准图检验预 测模型的预测效能。利用 Kaplan Meier和 Log rank检验分析不同治疗模式对预后的影响。结果:患者3年和5年 OS 率分别为 51.4%、41.5%,3年和 5年 CSS率分别为 60.3%、53.8%。多因素 Cox风险回归分析结果表明年龄、T分 期、N分期、是否手术、是否放疗及是否化疗是影响局部早期 HPSCC患者(T1/2N+)OS及 CSS的独立危险因素。OS 的 C index为 0.618,其 2、3、5年 ROC曲线下面积分别为 0.656、0.639、0.615;CSS的 C index为 0.629,其 2、3、5年 ROC曲线下面积分别为 0.657、0.635、0.623,表明预测模型具有一定准确度,预测结果可信。Kaplan Meier生存分析 结果显示,手术联合放化疗患者的 OS和 CSS均优于单纯放疗患者(P<0.01)。亚组分析发现手术能明显改善 T1分 期肿瘤患者的 OS(P=0.046),且N1及N2分期的患者的化疗与更好的 OS及 CSS相关(P<0.01)。结论:本研究建 立的伴颈部淋巴结转移的局部早期(T1/2N+)HPSCC列线图可以用于预测患者生存率,手术联合放化疗的治疗模式可明显改善患者预后。  相似文献   
4.
目的 对Allergy Screen与EUROLINE Atopy过敏原特异性免疫球蛋白E(specific immunoglobulin E, sIgE)检测结果进行一致性和等级相关性研究,为临床合理应用检测方法和解读检验结果提供依据。方法 收集过敏性疾病患儿血清样本180份,其中男86例,女94例,年龄3~15岁。分别应用Allergy Screen法和EUROLINE Atopy法检测血清样本中树花粉、混合草、尘螨、猫毛、狗毛、屋尘、蟑螂、霉菌、牛奶、鸡蛋、牛肉、贝类、虾、蟹过敏原sIgE。结果 两种检测方法Kappa分析得出:尘螨、牛奶、蟹三项一致性最高(Kappa值分别为0.846、0.845、0.813)。混合草、屋尘、蟑螂、霉菌、鸡蛋、虾等六种过敏原一致性较高(Kappa值分别为0.719、0.722、0.662、0.652、0.780、0.710)。树花粉、牛肉一致性中等(Kappa值分别为0.483、0.486)。猫毛、贝类一致性一般(Kappa值分别为0.392、0.389)。狗毛一致性较差(Kappa值为0.142)。两种检测方法过敏原sIgE的等级资料Spear...  相似文献   
5.
6.
7.
目的 探讨血清共刺激分子B7同源体4(B7-H4)、组织多肽特异性抗原(TPS)水平与肺腺癌患者胸腔镜根治术后复发的相关性。方法 选择2018年2月—2019年2月本院拟行胸腔镜根治术治疗的97例肺腺癌患者作为研究对象,入院时测定实验室指标,术后随访2年,统计2年复发情况,比较复发与未复发患者基线资料和实验室指标,重点分析血清B7-H4、TPS水平与肺腺癌患者胸腔镜根治术后复发的相关性。结果 以复发作为终点时间,全部患者随访时间为3-24个月,平均(12.11±3.02)个月;97例患者,随访期间累计30例复发,复发率为30.93%;复发患者血清糖类抗原125(CA125)、糖类抗原(CA19-9)、B7-H4、TPS水平高于未复发患者(P<0.05),组间其他资料比较差异无统计学意义(P>0.05);经Logistic回归分析结果显示,肺腺癌患者胸腔镜根治术前血清CA125、CA19-9、B7-H4、TPS与术后复发有关,血清CA125、CA19-9、B7-H4、TPS水平过表达可能是肺腺癌患者胸腔镜根治术后复发的风险因子(OR>1,P<0.05);绘制ROC...  相似文献   
8.
9.
目的采用竞争性等位基因特异性PCR(KASP)法、单碱基末端延伸(SNaPshot)法对载脂蛋白E(APOE)进行分型检测,并与Sanger测序法比较,以期获得更为高效、稳定、经济的中、高通量APOE分型手段。方法选取既往收集的覆盖全部6种常见APOE分型的阿尔茨海默病(AD)及轻度认知障碍(MCI)患者全血核酸样本48份,根据KASP法和SNaPshot法技术原理设计实验识别APOE 2个关键单核苷酸多态性(SNP)位点rs429358和rs7412,并对样本进行APOE分型检测。调整样本顺序重复检测以验证方法的稳定性和可重复性。扩大样本量,收集AD、MCI患者全血样本107份,采用上述两种方法进行APOE分型检测,Sanger测序法验证。结果采用KASP法和SNaPshot法对48份已知APOE分型样本的2次检测结果与原分型完全一致。进一步扩大样本量对107例样本进行分型检测,与Sanger测序法得到的结果完全一致。结论采用KASP法和SNaPshot法进行APOE分型检测具有快速、准确、结果直观等特点,应用中、高通量APOE分型检测相对于Sanger测序法效率更高、成本更低,具有一定推广应用价值。  相似文献   
10.
周思含  刘忞之  杨燕  王伟 《药学学报》2022,(7):2234-2239
病原链球菌为逃避宿主的免疫反应,分泌一种可特异地裂解免疫球蛋白G的降解酶(immunoglobulin G-degrading enzyme of Streptococcus pyogenes, IdeS)。IdeS既可作为工具酶用于IgG的指纹分析,又可用于治疗与自身免疫反应相关的疾病。本研究基于质粒pCold构建了两种重组IdeS的表达载体,并在大肠杆菌Shuffle T7中进行异源表达,经亲和色谱纯化后检测其蛋白活性。结果表明N-端含有His6-标签的重组IdeS产量为4 mg·L-1,其与抗体IgG1以1∶200 (m/m)在37℃反应30 min即可完全酶解。而N-端含有His6-标签且C-端含有硅胶亲和标签(SiBP)的重组IdeS产量为1.5 mg·L-1,其与抗体IgG1以1∶20 (m/m)在37℃反应30 min才可反应完全。C-端融合肽对于IdeS产量与活性都有较大的影响,使其活性降低,不利于后续应用于药物研发。上述结果表明,本系统所表达的N-端含有His6-标签的IdeS重组蛋白具有较高的活性,完全能满足抗体类药物研发...  相似文献   
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