健脾消癌方通过PI3K/Akt信号通路抑制结肠癌血管生成的研究＊

目的 观察结肠癌HCT116细胞健脾消癌方的条件培养液对HUVEC细胞管腔形成的影响，从PI3K/Akt生物轴调控角度探讨其作用机制。方法 培养HCT116细胞，细胞设3组：对照组，健脾消癌方组（加入15%健脾消癌方含药血清）及人参皂苷Rg3组；制备HCT116细胞健脾消癌方条件培养液（分组及制备方法见实验方法），用条件培养液干预HUVEC（脐静脉内皮细胞，Human Umbilical Vein Endothelial Cells），Matrigel基质胶法检测HCT116细胞健脾消癌方条件培养液对HUVEC小管形成的影响。随后采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组HCT116细胞磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B（Akt）、p-Akt、VEGF（血管内皮生长因子，Vascular endothelial growth factor）蛋白表达。最后在结肠癌HCT116荷瘤小鼠中验证健脾消癌方对肿瘤生长速度的影响，并经瘤组织VEGF蛋白表达、CD31免疫组化染色检测肿瘤内血管生成情况。结果 模型组HUVEC细胞管腔形成较空白血清组显著增加（P<0.05）；健脾消癌方组及人参皂苷Rg3组较模型组HUVEC细胞管腔形成显著减少（P<0.01）。p-Akt和VEGF蛋白表达水平模型组高于空白血清组（P<0.05），健脾消癌方组及人参皂苷Rg3组显著低于模型组（P<0.01）；PI3K、Akt蛋白表达量组间差异无统计学意义。与对照组比较，模型组荷瘤小鼠肿瘤体积显著性增大，瘤组织内VEGF表达、CD31阳性面积显著性增加，差异有统计学意义（P<0.05）；与模型组比较，健脾消癌方组及人参皂苷Rg3组荷瘤小鼠肿瘤体积显著减小，瘤组织内VEGF表达、CD31阳性面积降低，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 健脾消癌方可抑制肿瘤的血管生成和生长，其作用机制可能与PI3K/Akt生物轴调控VEGF表达有关。     

健脾益肝方对非酒精性脂肪性肝病患者脂肪分布及脂代谢的影响

目的:探讨健脾益肝方对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者脂肪分布及脂代谢的影响。方法:将80例NAFLD患者随机分为对照组和治疗组各40例。两组患者均在多学科联合管理下给予个体化的饮食、运动等生活方式指导,治疗组患者在此基础上加用健脾益肝方,疗程均为3个月。通过生物电阻抗技术测量患者治疗前后脂肪质量及分布,定期监测肝肾功能、血脂指标。比较两组患者肥胖、脂肪分布、血脂指标变化。结果:治疗组患者有效率为97.5%,明显高于对照组的82.5%,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组患者BMI、BFP、WHR、TC、TG及LDL-C水平明显低于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05);治疗组患者躯干及内脏脂肪沉积改善明显优于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:生活方式干预联合健脾益肝方治疗NAFLD患者能显著改善患者的肥胖及脂代谢紊乱,并且与躯干和内脏脂肪质量的下降密切相关。     

补肾活血汤对小卵泡排卵不孕症患者卵泡发育、卵巢动脉血流的影响

目的:观察补肾活血汤对小卵泡排卵(SFO)不孕症患者卵泡发育、卵巢动脉血流的影响。方法:将80例SFO不孕症患者随机分为两组,对照组40例接受枸橼酸氯米芬口服治疗,观察组40例,在对照组基础上加用补肾活血汤治疗,两组均治疗3个月经周期。统计两组临床疗效,并比较两组最大卵泡平均直径、子宫内膜厚度、成熟卵泡排卵率、未破裂卵泡黄素化综合征(LUFS)、妊娠率、早期自然流产率、性激素与卵巢动脉血流。结果:观察组治疗的临床总有效率为82.50%,明显高于对照组的62.50%(P<0.05)。与治疗前比较,两组治疗后最大卵泡平均直径、子宫内膜厚度均明显增加(P<0.05),且治疗后观察组以上指标均高于对照组(P<0.05)。观察组成熟卵泡排卵率和妊娠率高于对照组(P<0.05),LUFS发生率、早期自然流产率低于对照组(P<0.05)。与治疗前比较,治疗后两组血清LH、E₂水平、卵巢动脉PSV、EDV均明显增加(P<0.05),血清FSH、RI均明显降低(P<0.05),且治疗后观察组上述指标均优于对照组(P<0.05)。结论:补肾活血汤可明显促进SFO不孕症患者卵泡发育,增加成熟卵泡排卵率与妊娠率,并改善性激素与卵巢动脉血流循环。     

新加归肾丸通过调节mTOR信号通路促进体外培养大鼠卵巢颗粒细胞增殖

目的:观察补肾活血中药复方新加归肾丸对体外培养大鼠卵巢颗粒细胞增殖的影响。方法:体外培养大鼠卵巢颗粒细胞,分为空白组,模型组,中药低、中、高剂量组共五组,空白组用1%胎牛血清培养基培养,其余四组滴加雷帕霉素,20 min后中药各组加入不同浓度的中药水提醇沉液。分别在培养24、48、72 h后采用流式细胞仪检测细胞周期各时相的变化,并计算细胞增殖指数(PI); 免疫印迹法检测磷酸化-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、细胞周期蛋白D₂(Cyclin D₂)的表达水平。结果:用药24、48、72 h 这3个时段,中药各组S期细胞比率、PI均高于模型组(P<0.05),其中中药中剂量组最为明显(P<0.05)。用药24、48、72 h这3个时段,中药各个剂量组p-mTOR、Cyclin D₂表达水平均高于模型组(P<0.05)。中药各个剂量中以中药中剂量组效果最明显(P<0.05)。结论:补肾活血中药复方新加归肾丸能通过激活mTOR信号通路活性,上调Cyclin D₂蛋白表达,促使颗粒细胞由G₁期向S期转化,加速卵巢颗粒细胞周期进程,促进颗粒细胞增殖来实现改善卵泡发育。     

补肾化浊方联合粪菌移植对来曲唑诱导的多囊卵巢综合征大鼠生殖、代谢功能及相关炎症因子的影响

目的以肠道微生态为切入点探讨补肾化浊方联合粪菌移植治疗多囊卵巢综合征(PCOS)潜在机制。方法将30只6周龄SD大鼠随机分为空白组、模型组、中药组、粪菌移植组、中药+粪菌移植组,每组6只。来曲唑1 mg/(kg d)灌胃51 d,第22日起,中药组加灌补肾化浊方21.7 g/(kg d),粪菌移植组加灌新鲜粪便2 g/(kg d),中药+粪菌移植组加灌补肾化浊方21.7 g/(kg d)和新鲜粪便2 g/(kg d),连续30 d,另设空白组。干预结束后,腹主动脉取血检测大鼠血清性激素、空腹胰岛素(FINS)、空腹血糖(FPG),ELISA检测大鼠血清白细胞介素(IL)-18、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,HE染色观察大鼠卵巢形态学变化。结果与空白组比较,模型组大鼠卵巢呈多囊样改变,体质量、睾酮、黄体生成素(LH)/促卵泡激素(FSH)、FPG、HOMA-IR、IL-18、TNF-α水平均明显升高(P<0.01,P<0.001);与模型组比较,中药+粪菌移植组可显著改善上述指标(P<0.05,P<0.01,P<0.001),中药组可显著改善除TNF-α外各项指标(P<0.05,P<0.01),粪菌移植组可显著降低PCOS大鼠LH/FSH、IL-18水平(P<0.01,P<0.001);在降低IL-18水平方面,中药+粪菌移植组作用显著优于中药组(P<0.01)。结论中药联合粪菌移植可显著改善PCOS大鼠生殖和代谢功能,改善慢性炎症状态。     

益气健脾方对老年慢性肾功能不全患者营养状况影响的临床研究及机制探讨

目的探讨益气健脾方对老年慢性肾功能不全患者营养状况的影响及作用机制。方法将60例老年慢性肾功能不全营养不良患者随机分为对照组和研究组,每组30例。在常规治疗基础上,对照组予以复方α-酮酸片每次2.52 mg,3次/d,口服;研究组在对照组基础上予以益气健脾方每次150 mL,2次/d,口服。两组患者均治疗3个月。比较两组间临床疗效、血清生化营养学指标水平、肾功能、血清炎症因子水平,及药物不良反应发生率。结果对照组总有效率66.67%(20/30)低于研究组总有效率90.00%(27/30),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,与对照组比较,研究组血清前白蛋白(PA)、白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC)、转铁蛋白(TRF)水平较高,血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平较低,肾小球滤过率(GFR)水平较高,血清C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平较低,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗过程中,两组出现的不良反应为恶心呕吐、食欲不振。研究组不良反应发生率为13.33%(4/30),对照组不良反应发生率为6.67%(2/30),两组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论益气健脾方能有效改善老年慢性肾功能不全患者的营养状况,其作用可能与提高肾功能及缓解微炎症状态有关,而且具有较高安全性。     

健脾疏肝降脂方干预非酒精性脂肪肝病肥胖小鼠肝功能、游离脂肪酸机制探讨

目的:观察健脾疏肝降脂方治疗非酒精性脂肪肝(NAFLD)肥胖小鼠ALT、AST、FFA及光镜下病理组织学改变,并与壳脂胶囊治疗组比较,观察其疗效。方法:将72只小鼠随机分为模型组、健脾疏肝降脂方高、中、低剂量组、壳脂胶囊对照组和空白组。采用饲养高脂饲料及皮下注射5%CCl₄复制NAFLD肥胖小鼠模型,分别以相应药物灌胃6周,检测血清中ALT、AST及FFA的含量,光镜下观察肝组织的脂肪变程度。结果:①各个用药组相比模型组,血清ALT、AST均降低有统计学意义(P<0.01),且中药各浓度组较壳脂胶囊组血清ALT、AST降低,差异有统计学意义(P<0.05); 中药高、中剂量组相比模型组FFA降低,比较有统计学意义(P<0.05); 但与壳脂胶囊组相比,中药各剂量组改善FFA,差异无明显统计学意义(P>0.05)。②光镜可见:各用药组光镜下病理组织改变均较模型组明显,以中、高剂量组较低剂量组小鼠肝细胞脂肪变程度减轻较明显。结论:健脾疏肝降脂方能有效降低NAFLD肥胖小鼠的肝功能、其与浓度无关; 可以降低FFA及改善光镜下肝脏的脂肪变,其有效程度与浓度有一定的关系。     

补肾活血壮骨汤对椎体压缩性骨折患者的临床疗效及骨代谢的影响

目的:探讨补肾活血壮骨汤对椎体压缩性骨折患者的临床疗效及骨代谢的影响。方法:收集我院骨伤科收治的椎体压缩性骨折患者70例,随机分为试验组和对照组,各35例。两组患者均接受椎体成形术(Percutaneous Vertebroplasty,PVP),对照组术后予以阿法骨化醇软胶囊;试验组在对照组的基础上予以补肾活血壮骨汤。两组均以4周为一个疗效,连续服用3个疗程。比较两组患者视觉模拟评分法(Visual Analogue Scale,VAS)、椎体前壁高度(Anterior Vertebral Body Height,AVBH)、椎体后凸角度(Cobb)、骨密度(Bone Mineral Density,BMD)、血清骨钙素(BGP)、碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,ALP)、I型前胶原氨基端肽(N-terminal Propeptide of Type I Procollagen,PINP)以及骨保护素(Osteoprotectin,OPG)水平。结果:治疗后两组VAS、Cobb、PINP低于治疗前,BGP、ALP、OPG、AVBH以及BMD高于治疗前(P<0.05);试验组VAS、Cobb、PINP低于对照组,BGP、ALP、OPG、AVBH以及BMD高于对照组(P<0.05)。结论:补肾活血壮骨汤能够显著缓解患者疼痛,促进骨折愈合,改善脊柱功能以及骨密度,其治疗机制可能与调节骨代谢水平具有相关性。     

芪地固肾方治疗特发性膜性肾病的临床分析

目的:回顾性分析芪地固肾方治疗特发性膜性肾病(IMN)的临床疗效与安全性。方法:选取2014年1月至2017年6月陕西中医药大学附属医院肾病科门诊及住院IMN患者141例,根据用药方案分为西药组(西药标准疗法)、中西药结合组(芪地固肾方+西药标准疗法)和中药组(芪地固肾方)3组各47例,观察3组患者治疗后临床疗效、复发率及不良反应等。结果:治疗6个月后,中西药结合组和西药组总有效率72.34%、68.09%高于中药组,治疗12个月时3组有效率比较差异无统计学意义,治疗18个月后中药组和中西药结合组总有效率75.76%、78.72%高于西药组。中药组和中西药结合组在治疗12个月和18个月后较西药组在提高中医证候疗效、减少中医证候积分上更具优势。中药组和中西药结合组复发率更低,3组均未出现严重不良反应。结论:芪地固肾方能提高IMN缓解率,在提高中医证候疗效、降低复发率上更具优势,远期疗效可观,值得进一步推广应用。     

祛痰化瘀解毒散结法联合疏肝健脾汤治疗肝脾失调、痰瘀互结证甲亢突眼症临床研究

目的:观察祛痰化瘀解毒散结法联合辅以疏肝健脾汤治疗肝脾失调、痰瘀互结证甲亢突眼症的临床疗效。方法:选取弥漫性毒性甲状腺肿(GD)合并突眼症患者100例为研究对象,根据治疗药物不同分为对照组和观察组,每组50例。对照组使用常规激素治疗,观察组使用祛痰化瘀解毒散结法辅以疏肝健脾汤治疗,对比两组的治疗有效率,治疗前后中医症状积分变化、突眼度变化及抗体水平中TGAb、TPOAb变化,治疗期间不良反应发生情况。结果:观察组的治疗有效率高于对照组(P<0.05)。治疗后3个月两组上睑下垂、眼球肿胀、神疲乏力、舌淡红、脉滑、胸闷纳呆等中医症状积分、突眼度、TGAb、TPOAb均有所改善,其中观察组均优于对照组,不良反应发生率低于对照组(P<0.05)。结论:祛痰化瘀解毒散结法辅以疏肝健脾汤治疗肝脾失调、痰瘀互结证甲亢突眼症临床疗效好,患者的临床症状体征明显改善,不良反应发生率低,安全性高。