肾衰宁片对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的改善作用及机制研究

目的:探讨肾衰宁片对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化(RIF)的改善作用，并分析其可能机制。方法:选取Wistar雄性大鼠45只，随机分为假手术组(S组)、模型组(U组)和治疗组(T组),每组15只。造模成功后，T组从术后的第1日起每日用肾衰宁片0.19 g/(kg·d)灌胃，U组和S组每日给同体积的0.9%氯化钠溶液灌胃。三组大鼠在术后7、14、21 d分别处死5只。检测血清肌酐(CREA)、尿素氮(BUN)和尿微量白蛋白(mAlb)并进行比较。采用HE染色法观察三组大鼠RIF病变严重程度并进行评分比较。采用Masson染色法观察三组大鼠肾间质胶原体积分数(CVF)变化情况。采用免疫组化染色检测肾间质中Wnt和β-catenin的平均光密度(AOD)并进行比较。结果:术后7、14、21 d, U组血清CREA、BUN水平显著高于S组和T组，且T组高于S组(均P<0.05)。术后7、14 d,三组大鼠尿mAlb水平比较差异无统计学意义(均P>0.05)。术后21 d三组大鼠尿mAlb水平出现显著变化，S组尿mAlb水平最低，T组次之，U组最高，三组比较差异有统计学意...     

异牡荆素对非小细胞性肺癌细胞自我更新和凋亡的影响

目的研究异牡荆素(ISO)对非小细胞性肺癌(NSCLC)细胞的影响和潜在的机制。方法将A549和H1650细胞分别分为空白组、低剂量实验组(4μmol·L^-1 ISO)和高剂量实验组(16μmol·L^-1 ISO)。用噻唑蓝法检测NSCLC细胞活性,用肿瘤球形成实验检测NSCLC细胞的细胞球形成率,用Western blot法检测NSCLC细胞凋亡、自我更新、无翅型MMTV整合位点家族/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路相关蛋白的表达水平。结果与空白组比较,低、高剂量实验组中A549和H1650细胞在24,48和72 h的细胞活性均显著降低。低、高剂量实验组和空白组中A549细胞的细胞球形成率分别为(4.18±0.45)%,(2.01±0.67)%和(6.02±0.57)%,切割的半胱氨酸蛋白酶-3相对表达量分别为0.24±0.08,1.25±0.13和0.06±0.07,SRY相关高迁移率族盒蛋白-2相对表达量分别为0.49±0.04,0.25±0.03和1.00±0.09,Kruppel样因子4相对表达量分别为0.68±0.04,0.44±0.03和1.01±0.06,Wnt1相对表达量分别为0.63±0.06,0.28±0.04和1.00±0.06,β-catenin相对表达量分别为0.41±0.05,0.22±0.03和1.01±0.09;与空白组比较,低、高剂量实验组中A549细胞的上述指标的差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。上述3组中H1650细胞的上述指标也呈现一致的现象。结论ISO可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路来抑制NSCLC细胞活性和自我更新,并促进其凋亡。     

菊花总黄酮含药血清对干眼细胞模型AR、NF-κB磷酸化蛋白及TGF-β1表达的影响＊

目的 观察菊花总黄酮在体外条件下对泪腺上皮细胞中雄激素受体（Androgen Receptor，AR）的调控作用及对下游的核因子κB（Nuclear Factor kappa B，NF-κB）、转化生长因子-β1（transforming growth factor-beta1，TGF-β1）的表达影响。方法 以过氧化氢（H₂O₂）诱导泪腺上皮细胞凋亡，建立细胞模型，设立无雄激素培养空白对照组、含雄激素培养对照组、无雄激素培养黄酮治疗组。以MTT法摸索含药血清最佳干预加入量；免疫印迹实验（Western Blot）以及实时荧光定量PCR法（Quantitative Real-Time PCR，qPCR）检测泪腺上皮细胞中AR、NF-κB及TGF-β1的表达情况；并应用雄激素受体阻断剂氟他胺进行AR阻断后再次检测上述指标 。结果 MTT法检测后计算得出含药血清干预细胞的最终浓度为13.2%；无雄激素培养黄酮治疗组及含雄激素培养对照组中AR、NF-κB及TGF-β1的表达增强，与空白对照组对比有显著差异（P<0.01）；无雄激素培养黄酮治疗组中NF-κB表达量比含雄激素培养对照组表达量低，两者间的差异有统计学意义。氟他胺及含药血清干预后，无雄激素培养黄酮治疗组及含雄激素培养对照组中AR及NF-κB的表达未见提高，无统计学意义。结论 菊花总黄酮对泪腺上皮细胞可能存在拟雄激素效应，从而使AR、NF-κB表达增加，并通过上调TGF-β1的表达，可能起到在泪腺局部的抗炎作用。     

半夏泻心汤对DSS诱导的溃疡性结肠炎小鼠肠道微生态及Th17/Treg细胞平衡的影响＊

目的 观察半夏泻心汤对饮用葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导建立的溃疡性结肠炎（UC）模型小鼠Th17/Treg细胞平衡及肠道微生态的影响，从免疫失衡及菌群紊乱角度分析半夏泻心汤治疗UC的作用机制。方法 将40只C57BL/6J雄性小鼠随机分为空白组、模型组、阳性药（美沙拉嗪）组及半夏泻心汤组，除空白组外的各小鼠采用2.5% DSS水溶液自由饮用7天诱导建立UC小鼠模型。自实验第8日起，分别采用灭菌水、美沙拉嗪水溶液、半夏泻心汤水溶液给上述各组别小鼠灌胃。采用HE染色观察结肠组织病理学变化，ELISA方法检测组织炎症因子含量，流式细胞术检测Th17及Treg细胞的相对数量，16S rRNA测序技术进一步检测模型小鼠粪便中菌群的变化。结果 与空白组比较，模型组小鼠结肠损伤严重，血清炎症因子含量显著升高（P<0.01）；与模型组比较，中药干预组小鼠结肠损伤减轻，血清TNF-α、IFN-γ含量显著下降（P<0.05）。较空白组小鼠相比，模型组小鼠Th17细胞百分比显著升高（P<0.01），而Treg细胞百分比显著降低（P<0.01）。经半夏泻心汤干预后，其小鼠Th17细胞数量均显著降低（P<0.05），Treg细胞数量则显著升高（P<0.05）。同时，半夏泻心汤可升高门水平上Firmicutes、属水平上Lachnospiraceae_NK4A136_group、unclassified_f_Lachnospiraceae、Prevotellaceae_UCG-001、Alistipes；降低门水平上Actinobacteriota，科水平上Bifidobacteriaceae、Atopobiaceae、Clostridiaceae，属水平上Clostridium_sensu_stricto_1、Coriobacteriaceae_UCG-002、Bifidobacterium的相对丰度。结论 半夏泻心汤可使Treg细胞相对数量升高、Th17细胞相对数量降低，以维持Th17/Treg细胞动态平衡；同时可降低有害菌Clostridium_sensu_stricto_1、Coriobacteriaceae_UCG-002的相对丰度，升高产短链脂肪酸类菌Lachnospiraceae_NK4A136_group、Prevotellaceae_UCG-001、unclassified_f_Lachnospiraceae等菌属的相对丰度，调控肠道微生物结构及动态平衡，从而发挥治疗UC的作用。     

山柰酚调控Wnt/β-catenin途径对前列腺癌小鼠T细胞的影响及作用机制北大核心CSCD

目的:探究山柰酚调控Wnt/β-catenin途径对前列腺癌小鼠T细胞的影响及作用机制。方法:皮下注射人去势抵抗性前列腺癌细胞系PC3构建前列腺癌小鼠模型。将30只模型小鼠随机分为对照组、山柰酚低剂量组和山柰酚高剂量组(n=10)。山柰酚灌胃干预,剂量分别为15 mg/kg和30 mg/kg,检测肿瘤生长情况。Western blot检测增殖和转移相关蛋白Cyclin D1、Ki67、MMP2和MMP9表达,TUNEL染色检测细胞凋亡。比较各组Wnt/β-catenin通路的转录和翻译水平。流式细胞术和ELISA检测各组CD4^(+)、CD8^(+)、IFN-γ和IL-2水平。结果:三组小鼠各项指标比较差异有统计学意义(P<0.05)。山柰酚低剂量组和山柰酚高剂量组的肿瘤体积、质量、Cyclin D1、Ki67、MMP2、MMP9、Wnt3a、β-catenin mRNA和蛋白水平均显著低于对照组,凋亡指数均显著高于对照组(P<0.05)。且山柰酚高剂量组的肿瘤体积[(180.56±21.56)mm3]、质量[(0.21±0.03)g]、Cyclin D1、Ki67、MMP2、MMP9、Wnt3a、β-catenin mRNA和蛋白水平均显著低于山柰酚低剂量组,凋亡指数[(17.43±1.89)%]显著高于山柰酚低剂量组[(10.05±1.05)%](P<0.05)。三组小鼠的CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、IFN-γ和IL-2水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。山柰酚低剂量组和高剂量组中CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、IFN-γ、IL-2水平均显著高于对照组(P<0.05)。山柰酚高剂量组中CD4^(+)[(23.81±1.36)%]、CD4^(+)/CD8^(+)(1.51±0.13)、IFN-γ[(9.15±1.12)ng/ml]和IL-2[(1.78±0.11)ng/ml]水平均显著高于山柰酚低剂量组[(19.45±1.24)%、1.20±0.11、(7.23±0.87)ng/ml,(1.40±0.09)ng/ml,P<0.05]。结论:山柰酚可能通过调控Wnt/β-catenin途径抑制前列腺癌小鼠模型的肿瘤生长和转移,并缓解免疫抑制状态。     

桦木酸对大鼠肺纤维化模型肺组织的影响＊

目的 探讨桦木酸对大鼠肺纤维化模型肺组织中NF-κB、β-arrestin2表达的影响。方法 15只SPF级雄性SD大鼠分为对照组、模型组、桦木酸组，每组5只。对照组予以单次气管内注射1 mL·kg^-1 0.9%生理盐水，模型组和桦木酸组予单次气管内快速注射5 mg·kg^-1博来霉素建立大鼠肺纤维化模型。造模1天后，对照组及模型组给予10 mL·kg^-1 1%可溶性淀粉溶液，桦木酸组给予50 mg·kg^-1的桦木酸悬浮液，持续21天。HE、Masson染色方法观察肺组织病理改变。酶联免疫吸附法（ELISA）检测肺组织匀浆IL-6的水平。免疫组化法检测肺组织中NF-κB、β-arrestin2、IκBα的表达。结果 与对照组相比，模型组肺组织匀浆中IL-6水平升高，NF-κB、β-arrestin2、IκBα蛋白表达均上调（P<0.05）。与模型组相比，桦木酸组肺组织匀浆中IL-6水平降低，肺组织中NF-κB、β-arrestin2、IκBα蛋白表达均下调（P<0.05）。结论 桦木酸可减轻肺部炎症、减慢肺纤维化的发生发展，可能与下调肺组织中NF-κB、β-arrestin2有关。     

胎膜组织人β防御素2、核因子KB p65、Toll样受体-4表达与未足月胎膜早破孕妇绒毛膜羊膜炎发生的关系

目的 探讨胎膜组织人β防御素2(HBD-2)、核因子κB p65(NF-κB p65)、Toll样受体-4(TLR-4)表达与未足月胎膜早破(PPROM)孕妇绒毛膜羊膜炎发生的关系。方法 选取铜仁市人民医院2019年5月-2020年12月106例PPROM孕妇，根据分娩时胎膜组织病理结果分为绒毛膜羊膜炎组(n=51)、非绒毛膜羊膜炎组(n=55),并将绒毛膜羊膜炎组按照炎症程度分为轻度炎症组(n=16)、中度炎症组(n=18)、重度炎症组(n=17)三个亚组，观察不同组别胎膜组织HBD-2、NF-κB p56、TLR-4 mRNA表达水平，通过绘制受试者工作曲线(ROC)评价三项指标对疾病的诊断评估价值，分析PPROM孕妇发生绒毛膜羊膜炎的危险因素。结果 绒毛膜羊膜炎组胎膜组织HBD-2、NF-κB p56、TLR-4 mRNA表达水平高于非绒毛膜羊膜炎组(P<0.05);胎膜组织HBD-2、NF-κB p56、TLR-4 mRNA表达水平联合检测评估PPROM合并绒毛膜羊膜炎ROC曲线下面积为0.906,高于各项指标单独检测ROC曲线面积0.787、0.818、0.759(P<0.05);Logistic回归分析显示妊娠期肥胖、合并阴道炎症、合并妊娠期糖尿病、HBD-2 mRNA高表达、NF-κB p56 mRNA高表达、TLR-4 mRNA高表达是PPROM孕妇发生绒毛膜羊膜炎的影响因素(P<0.05)。结论 PPROM合并绒毛膜羊膜炎孕妇胎膜组织HBD-2、NF-κB p56、TLR-4表达水平升高，其升高趋势是PPROM合并绒毛膜羊膜炎发生的影响因素，三者结合可作为疾病诊断的生物标志物。