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1.
孙瑞红    杨璐    陶子琦    张世昌    谢梦晓    谢而付    穆原    蒋叶   《现代检验医学杂志》2022,(6):158-161+176
目的 评价不同浓度胆红素对酶法测定总胆固醇(total cholesterol, TC)的影响,应用多元回归分析建立校正公式并验证其校正效果。方法 收集100 例来自于南京医科大学第一附属医院2020 年12 月门诊或住院患者的新鲜无黄疸血清标本。配制一系列浓度梯度的胆红素溶液,分别加入其中50 例患者的血清标本中,检测各标本总胆红素(total bilirubin,TB)和TC 浓度,分析胆红素水平对TC 检测结果的影响及二者的相关性。应用多元回归分析建立校正公式,并利用另外50 例患者标本验证该校正公式的性能。结果 黄疸实验组与生理盐水对照组间差异具有统计学意义(F=3.947,P<0.01),标本TC 浓度与TB 浓度呈负相关(r2=0.989 4);在胆红素加入浓度分别为100,200,300,400,500 和600 μmol/L 的实验组中,TC 浓度的平均偏倚依次为:-6.65%±4.89%,-14.21%±8.89%,-29.00%±13.43%,-31.07%±14.62%,-38.21%±13.95% 和-43.51%±12.69%,且初始浓度TC < 3 mmol/L 的标本产生的平均偏倚均明显高于TC ≥ 3 mmol/L 的标本,差异具有统计学意义(t=9.192 ~ 14.836,均P < 0.01);设无黄疸血清标本的TC 浓度为Y,其对应人工黄疸标本的TC 实测浓度为Z,TB 浓度为X,经多元回归分析,校正公式为Y =0.002 353·X + 0.973·Z+ 0.000 337·X·Z - 0.013 34;经公式校正后92.67% 的黄疸标本TC 浓度偏倚小于±10%。结论 黄疸患者血清标本中高胆红素水平可导致其TC 的检测结果偏低,偏倚大小与TB 浓度以及初始TC 浓度相关,运用校正公式可有效校正高胆红素对TC 测定的干扰,符合临床要求。  相似文献   
2.
摘要:目的 探讨 miRNA 381 通过改变细胞周期蛋白 A2(CCNA2)的表达水平,对乳腺癌增殖、迁移和预后的影响。方法 选 择 2017 年 6 月至 2018 年 6 月于上海市静安区中心医院接受手术治疗的乳腺癌患者血清标本 122 例作为乳腺癌组。选择同 期体检健康者血清标本 75 例作为对照组。采用实时荧光定量 PCR(RT PCR)检测各组血清和乳腺癌细胞系中miRNA 381和 CCNA2 的表达水平。结果 乳腺癌组血清 miRNA 381 的表达水平明显低于对照组(1.71±0.64 vs 2.66±0.89,t = 8.693,P< 0.01),术后乳腺癌患者血清 miRNA 381 的表达水平较术前(2.46±0.76 vs 1.71±0.64,t = 8.338,P<0.01)明显升高;而乳腺癌组 血清 CCNA2 的表达水平较对照组(2.91±0.95 vs 2.33±0.73,t = 4.528,P<0.01)明显升高,术后血清 CCNA2 的表达水平(2.42± 0.63 vs 2.91±0.95,t = 4.748,P<0.01)较术前明显降低。miRNA 381 抑制乳腺癌细胞 CCNA2 基因和蛋白质的表达(P<0.01),且 对乳腺癌细胞的增殖和迁移具有明显的抑制作用(P<0.01)。乳腺癌患者血清 miRNA 381 和 CCNA2 的表达水平在淋巴结转 移与否、TNM 分期和 Ki67 比率之间的差异具有统计学意义(P<0.01)。与死亡组比较,生存组血清 miRNA 381 的表达水平明 显升高(P<0.01),而血清 CCNA2 的表达水平明显降低。血清 miRNA 381 和 CCNA2 的表达在预测乳腺癌患者术后 3 年内出 现死亡时具有较高的预测效能,二者联合检测的敏感性为 75.0%,特异性为 84.7%,AUCROC 为 0.876,均显著高于miRNA 381 (Z= 1.993,P<0.05)和CCNA2(Z= 2.539,P<0.05)单独检测。结论 miRNA 381 通过改变 CCNA2 的表达,影响乳腺癌细胞的 增殖和迁移,血清 miRNA 381 和 CCNA2 在预测乳腺癌预后方面具有重要临床意义。  相似文献   
3.
目的探讨RhoA基因对唾液腺腺样囊性癌(salivary adenoidcysticcarcinoma,SACC)细胞的迁移和侵袭能力的影响。方法将液氮冻存的20例SACC及正常癌旁组织研磨匀浆,分别提取总RNA和总蛋白检测RhoA的表达情况。同时构建RhoA?siRNA转染2个细胞株SACC?LM和SACC?83细胞进行细胞学实验,实验分为实验组(转染RhoA?siRNA基因),阴性对照组(转染siRNA?NC基因)和空白对照组。通过qRT?PCR检测各组细胞RhoA的mRNA表达并确定转染效率;Western blot分析各组细胞RhoA及上皮-间充质转换(epithelial?mesenchymal transition,EMT)标志分子(E?cadherin、N?cadherin、Vimentin)的蛋白表达;Transwell实验及划痕实验分析各组细胞侵袭和迁移能力的变化。结果与正常癌旁组织相比,RhoA mRNA和蛋白相对表达量在SACC组织中增高(P<0.01);实验组与对照组相比,RhoA mRNA的相对表达量和蛋白的相对表达量降低,E?cadherin蛋白的相对表达量增加,N?cadherin、Vimentin蛋白的相对表达量降低(P<0.01);实验组细胞侵袭和迁移能力降低(P<0.01)。结论RhoA在SACC组织中表达增高;体外沉默RhoA基因可有效抑制SACC?LM和SACC?83细胞迁移和侵袭能力,其可能通过作用EMT影响SACC细胞迁移和侵袭能力。  相似文献   
4.
目的:探讨沉默PI3K基因对雌激素刺激下的子宫内膜癌细胞增殖、迁移、凋亡的影响。方法:培养子宫内膜癌Ishikawa细胞,构建LV-PI3K-RNAi慢病毒载体转染Ishikawa细胞。实验分组Control组未经任何处理的Ishikawa细胞;Ishikawa组经E2刺激的Ishikawa细胞;NC组经E2刺激并转染阴性对照慢病毒的Ishikawa细胞;PI3Ki组经E2刺激并转染LV-PI3K-RNAi慢病毒的Ishikawa细胞。Real-time PCR、Western blot法检测各组VEGF、bFGF、PI3K mRNA及蛋白表达水平,MTT法、流式细胞仪分别检测细胞增殖能力及凋亡的情况。结果:与Ishikawa组、NC组比较,PI3Ki组的VEGF、bFGF、PI3K mRNA及蛋白表达水平明显降低,细胞增殖能力显著降低,凋亡率增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:PI3K基因低表达可干扰E2在基因、蛋白水平激活Ishikawa细胞产生VEGF、bFGF,从而下调E2对子宫内膜癌细胞增殖和抑制凋亡的影响。  相似文献   
5.
张娜  张霄  马媛媛 《新中医》2021,53(11):66-70
目的:观察补中益气丸辅助5-氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)治疗尖锐湿疣(CA)的临床疗效。方法:选取CA患者82例,按随机数字表法分为研究组和对照组各41例。2组均暂停性生活,并采取常规西医治疗,对照组采取ALA-PDT,研究组在对照组基础上给予补中益气丸口服。比较2组临床疗效,检测治疗前后血清Th1/Th2型细胞因子[干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-10 (IL-10)、白细胞介素-2 (IL-2)]、淋巴细胞趋化因子(LTN)、转化生长因子-β1 (TGF-β1)含量及生活质量(CECA10)评分,并于治疗后3个月、6个月、9个月随访疾病复发率。结果:研究组总有效率为92.68%,高于对照组75.61%,差异有统计学意义(P0.05)。治疗前,2组血清IFN-γ、IL-10、IL-2水平比较,差异无统计学意义(P0.05)。治疗后,2组IFN-γ、IL-2、IL-10水平较治疗前改善(P0.05);且研究组IFN-γ、IL-2水平高于对照组,IL-10水平低于对照组(P0.05)。治疗前,2组血清LTN、TGF-β1水平比较,差异无统计学意义(P0.05)。治疗后,2组血清LTN、TGF-β1水平较治疗前增高,且研究组高于对照组(P0.05)。治疗前,2组CECA10量表评分比较,差异无统计学意义(P0.05)。治疗后,2组CECA10量表评分较治疗前升高,且研究组高于对照组(P0.05)。治疗后9个月,研究组复发率(11.11%)低于对照组(36.67%)(P0.05)。结论:补中益气丸辅助ALA-PDT治疗CA患者疗效确切,可提高血清LTN、TGF-β1水平,增强机体免疫功能,改善生活质量,降低疾病复发率。  相似文献   
6.
目的 对 3 例血清学定性为 A weak B 亚型的血标本进行 ABO 基因检测,探讨其分子遗传学特点,并探讨 B( A) 亚型与 CisAB、A 亚 B 型的鉴别要点。 方法 用 PCR?SSP 对常规血清学方法定型困难的 3 例标本进行 ABO 基因分型,并对其 ABO 基 因第 6、7 外显子扩增后进行直接测序及单倍型测序,确定其基因型。 结果 3 例标本血型血清学结果均为 Aweak B 型,存在不 规则抗 A 抗体。 基因分型均为 B(A)04 型,其 B 等位基因在第 7 外显子存在 nt640A>G 突变,标本 1 为 B(A)04 / O02,标本 2、3 为 B(A)04 / O01。 结论 当血清学检测结果正反定型不一致时,应采用分子诊断技术进行辅助诊断,并采用配血相合输血策 略,可确保临床输血安全。  相似文献   
7.
目的:构建敲减人雄激素受体(AR)基因的慢病毒质粒,转染Hep3B细胞使其表达目的蛋白并探索其对PTEN、p-AKT蛋白表达的影响。方法:设计合成3对针对AR基因特异性敲减的寡核苷酸片段,分别连接于重组慢病毒载体pLKO.1,构建3条AR干扰载体。利用验证正确的3个慢病毒载体转染293T细胞得到慢病毒上清液。采用RT-PCR和Western blot在5株肝癌细胞中挑选AR高表达的细胞系进行AR慢病毒上清液感染。RT-PCR和Western blot检测3条AR干扰质粒在Hep3B细胞内的表达及其对PTEN、p-AKT蛋白表达的作用。结果:测序鉴定证实3条AR慢病毒干扰载体构建成功,干扰Hep3B细胞后,RT-PCR和Western blot结果显示其中1条AR干扰后的mRNA和蛋白表达明显降低,细胞内PTEN蛋白表达升高,p-AKT表达降低。结论:成功构建3条AR干扰载体,其中1条干扰效率较高,能在Hep3B细胞中干扰AR的表达,感染细胞后上调抑癌基因PTEN的蛋白表达对p-AKT有抑制作用,提示AR和PTEN/AKT信号通路可能具有相关性。  相似文献   
8.
目的 探讨LincRNA-P21通过靶向miR-17-3p对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞迁移和侵袭作用的影响。方法 qPCR检测30例TNBC患者肿瘤组织、癌旁正常组织以及6种乳腺细胞(乳腺正常细胞MCF-10A,乳腺癌细胞MDA-MB-231、MDA-MB-435、MDA-MB-468、BT549、T47D)LincRNA-P21和miR-17-3p的表达。取MDA-MB-231细胞,单独过表达LincRNA-P21(实验设对照组、pcDNA3.1空白组、pcDNA-LincRNA-P21组),抑制miR-17-3p表达(实验设对照组、miR-17-3p空白组、miR-17-3p抑制剂组),过表达LincRNA-P21+抑制miR-17-3p表达(实验设对照组、miR-17-3p抑制剂组和pcDNA-LincRNA-P21+miR-17-3p inhibitor组)。CCK-8法检测MDA-MB-231细胞增殖,集落形成实验检测细胞的集落数量,细胞划痕实验检测细胞的迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力。Western blot检测E-cadherin和Vimentin蛋白表达。结果 TNBC患者组织中LincRNA-P21的表达明显低于癌旁组织(0.48±0.03 vs. 1.03±0.06,t=11.714,P<0.01),miR-17-3p的表达显著高于癌旁组织(2.93±0.17 vs. 1.02±0.04,t=15.593,P<0.01)。乳腺癌细胞系中LincRNA-P21表达量明显低于MCF-10A,miR-17-3p表达量高于MCF-10A(P<0.01)。单独过表达LincRNA-P21或抑制miR-17-3p后,MDA-MB-231细胞增殖能力、集落形成数量、迁移和侵袭能力均明显下降。过表达LincRNA-P21的同时抑制miR-17-3p,MDA-MB-231细胞增殖能力、集落形成数量、迁移和侵袭能力出现进一步下降,且上调E-cadherin的表达,抑制Vimentin的表达(P<0.05)。结论 LincRNA-P21通过竞争性结合miR-17-3p来抑制MDA-MB-231细胞增殖、集落形成、迁移和侵袭。  相似文献   
9.
10.
目的构建针对小鼠NLRP3基因的腺病毒干扰载体(Ad-NLRP3-shRNA),并在Min6和RAW264.7细胞中验证其基因沉默效率。方法针对小鼠NLRP3基因设计、合成3对NLRP3 shRNA 1-3干扰序列,重组至pHBAd-U6-CMV质粒载体。在HEK293T细胞内包装Ad-NLRP3-shRNA。感染Min6和RAW264.7细胞后,采用实时定量-聚合酶链式反应(RTQ-PCR)检测NLRP3基因表达。结果 Ad-NLRP3-shRNA 1-3在Min6和RAW264.7细胞的干扰效率分别达到44.38%、46.61%和82.83%以及47.23%、49.59%和78.64%。结论成功构建出Ad-NLRP3-shRNA载体,为研究NLRP3基因的功能提供有效工具。  相似文献   
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