巴豆生物碱对Lewis小鼠肺腺癌细胞生长和凋亡的影响及机制研究

目的 通过研究巴豆生物碱（CA）对Lewis小鼠肺腺癌细胞生长及对凋亡相关蛋白（Survivin、Caspase-3、Bax）、YAP蛋白的调控作用,探讨CA对肺腺癌细胞生长和凋亡的影响及其具体的作用机制。方法 培养Lewis鼠源性肺腺癌细胞（LLC）,复制小鼠皮下成瘤模型,分为5组,每组10只,分别为对照组、低剂量CA组、中剂量CA组、高剂量CA组及顺铂组。皮下成瘤1周后给予药物干预,第22天对5组小鼠取瘤称重,计算抑瘤率并通过光学显微镜观察各组病理形态学的变化,判断CA对瘤体生长的抑制作用;Western blotting检测Survivin、Caspase-3、Bax及YAP蛋白相对表达量;qRT-PCR法检测Survivin、Caspase-3、Bax及YAP mRNA相对表达量。结果 中剂量CA组和高剂量CA组小鼠的一般生存状态较对照组、低剂量CA组及顺铂组好。低剂量CA组、中剂量CA组、高剂量CA组及顺铂组肿瘤细胞出现不同程度细胞凋亡现象,对照组肿瘤细胞多为坏死细胞。低剂量CA组、中剂量CA组、高剂量CA组及顺铂组的抑瘤率分别是13.91％、14.83％、27.84％和68.45％,4组抑瘤率比较,差异有统计学意义（P <0.05）,各组抑瘤率依次升高,顺铂组肿瘤生长最慢。不同剂量CA组中Survivin mRNA相对表达量低于对照组（P <0.05）,CA剂量越高,Survivin mRNA相对表达量越低;而不同剂量CA组中Caspase-3和Bax mRNA相对表达量高于对照组（P <0.05）,CA剂量越高,Caspase-3和Bax mRNA的相对表达量越高;各组YAP mRNA的相对表达量比较,差异无统计学意义（P >0.05）。结论 CA对Lewis肺腺癌小鼠瘤体生长有抑制作用,并引起细胞凋亡。CA通过促进Bax和Caspase-3表达及抑制Survivin表达来调控Lewis小鼠肺腺癌细胞凋亡;其调控机制可能是通过下调Survivin的表达,从而使得Survivin对Caspase-3的抑制作用减弱,而Bax上调可进一步激活Caspase-3,从而诱导Caspase级联效应促进细胞凋亡,为肺腺癌治疗提供了新思路。     

鼠源性神经生长因子联合甲钴胺治疗糖尿病周围神经病变的效果观察

目的观察鼠源性神经生长因子联合甲钴胺治疗糖尿病周围神经病变的临床效果。方法糖尿病周围神经病变患者86例,按照随机数字法分为观察组、对照组各43例。观察组给予鼠源性神经生长因子联合甲钴胺治疗,对照组给予单纯甲钴胺治疗。比较两组神经传导速度、临床效果、不良反应。采用SPSS 13.0统计软件,计量资料比较采用t检验,率的比较采用χ2检验,P≤0.05为差异有统计学意义。结果观察组治疗后正中神经、腓总神经及腓浅神经的传导速度均快于对照组(均P<0.05);观察组治疗改善率97.7%(42/43),显著高于对照组的76.7%(33/43),(χ2=6.672、P=0.01);两组发生注射部位疼痛、头晕及低血糖差异无统计学意义(均P>0.05)。结论鼠源性神经生长因子联合甲钴胺治疗糖尿病周围神经病变安全、有效,且效果优于单纯甲钴胺治疗。     

疫区灭鼠的再认识

疫区灭鼠是预防和控制鼠源疾病的重要措施,但近年来开展规模越来越少,究其原因,主要是疫区灭鼠要求高,必需面积大,质量高,维持久,目标准,才能收到良好的流行病学效果。当前的社会发展形势和条件,越来越不同于过去,沿用过去的做法越来越难。因此,必须转变观念,从疫区灭鼠的定位、策略、方案、经费、体制等方面作相应的调整。既考虑需要,又照顾可能,以提高措施的可行性,发挥它在现有条件下应有的作用。     

mGM-CSF-GnRH3 与mGM-CSF-GRP6 融合蛋白体外抗肿瘤作用及生物信息学预测

[摘要] 目的：制备鼠源粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(mouse granulocyte-macrophage colony stimulating factor,mGM-CSF)与促性腺激素释放激素(gonadotropin releasing hormone,GnRH)的融合蛋白mGM-CSF-GnRH3（mGGn）和mGM-CSF与胃泌素释放肽（gastrin-releasing peptide,GRP）的融合蛋白mGM-CSF-GRP6（mG6）,探讨这两种融合蛋白在体外对黑色素瘤B16F10 细胞的抑制效果,并对其等电点、相对分子质量、疏水性、稳定性、亚细胞定位、信号肽、空间结构、潜在抗原表位等进行初步预测。方法：mGGn与mG6 融合蛋白制备成功后,通过显微观察、划痕实验、CCK-8 法、流式细胞术分别检测不同浓度蛋白对B16F10 细胞形态、细胞迁移、细胞增殖、细胞周期的影响,利用蛋白质在线分析系统EXPASY、GOR4、SWISS MODEL对重组融合蛋白进行基本属性、二三级结构分析预测,运用IEDB和ABCpred软件综合预测其Ｂ细胞抗原表位,采用SYFPEITHI、BlMAS和NetCTL软件综合预测其CTL表位,利用NetMHCIIpan 3.1 Server 和IEDB软件综合预测其Th 表位。结果：mGGn和mG6 融合蛋白均抑制肿瘤细胞的增殖和迁移;mGGn能使B16F10 细胞周期阻滞于G1 期,mG6 能使B16F10 细胞周期阻滞于S期,不能进入G2 期,从而抑制瘤细胞的增殖。mGGn和mG6 结构丰富,含有较多潜在的B细胞、CTL和Th表位。结论：mGGn与mG6 融合蛋白在体外对黑色素瘤B16F10细胞具有抑制作用,其生物信息学预测为进一步研究两种融合蛋白的生物学功能和免疫活性奠定了基础。     

书讯

虫媒和鼠源性疾病病种多,分布广,发病率高,严重危害人民健康。为便于国际交流,提高病媒防控水平,国内有关杂志论文摘要普遍采用中、英文并列形式。好的英文摘要,能够准确呈现作者研究的目的,采用的方法,以及得倒的结果,是科技论文写作重要内容。韩招久研究员、姜志宽研究员参考大量文献,并结合多年实践主编的《病媒防控论文英文摘要编写》即将由苏州大学出版社出版发行。全书内容共有10章10附录。第1章为概论;第2章为标题、     

卡介苗对鼠源性巨噬细胞株释放一氧化氮和IFN-γ的影响

目的:观察卡介苗(BCG)对鼠源性巨噬细胞株RAW264释放的诱导型一氧化氮(NO)合成酶(iNOS)及γ干扰素(IFN-γ)表达的影响.方法:在鼠源性巨噬细胞株RAW264培养液中加入BCG,Griess检测法测定NO释放量,半定量RT-PCR法检测iNOS及IFN-γ的表达.结果:BCG添加后使巨噬细胞NO产生量增加,IFN-γ、iNOS的mRNA表达增强.结论:在巨噬细胞吞噬、杀灭结核分枝杆菌时IFN-γ具有活化巨噬细胞的作用.     

猪链球菌2型二元信号转导系统ciaR基因敲除突变株的构建及生物学功能研究

目的构建猪链球菌2型强毒株05ZYH33二元信号转导系统1094HK／1095RR的反应调节因子ciaR基因敲除突变株（△ciaR）,并研究△ciaR的生物学功能。方法和结果基于同源重组原理筛选ciaR基因缺失株,PCR分析及Southern杂交结果均显示突变株构建成功。通过检测OD600值绘制生长曲线,发现突变株在37℃和40℃其OD600明显低于野生株;与40mmol／L过氧化氢共作用15min后涂板计数,突变株存活率明显低于野生株;不同pH值的培养基中培养,发现在pH5.0的酸性环境中突变株OD600显低于野生株;野生株与突变株对BALB／c小鼠攻毒（约1×10^9cFu／只）,各10只,两组16h后均死亡9只。结论成功获得05ZYH33ciaR基因敲除突变株;发现删除ciaR基因会导致细菌的生长繁殖能力减弱,抗氧化应激能力下降,在酸性环境生长存活能力下降;但对小鼠毒力无差别。     

农杆菌介导鼠源轮状病毒vp4基因转化马铃薯条件优化研究

目的　获得马铃薯再生和农杆菌介导的遗传转化体系。方法　以马铃薯品种“台湾红”为受体材料 ,对其再生和农杆菌介导的遗传转化体系进行了研究。结果　诱愈培养基为MS + 0 1mg L 2 ,4-D + 1mg LBA ,出芽培养基为MS + 1mg LZT +5 0mg LGA3 ,卡那霉素浓度为 5 0mg L ,农杆菌液浓度为A6 0 0 =0 5。通过该体系将一鼠源轮状病毒外壳蛋白基因vp4导入马铃薯中 ,获得了具卡那霉素抗性的转化植株。经PCR验证 ,外源基因已导入马铃薯基因组中。结论　获得相对高效的马铃薯遗传转化体系 ,并成功地将外源基因转入马铃薯中。     

鼠源性单克隆抗体F(ab′)2片段制备工艺

目的制备符合临床应用质量标准的鼠源性mAb F(ab′)2片段.方法采用胃蛋白酶消化小鼠腹水抗体,疏水作用色谱法纯化F(ab′)2片段的新工艺,替代原有的木瓜蛋白酶消化IgG,阴离子交换色谱法纯化的旧工艺.结果新工艺所制备的F(ab′)2 片段经SDS-PAGE检测纯度达98%以上,ABC免疫组化法测定免疫活性为1∶8000,回收率大于 50%,核酸含量及热原均合格,整个工艺流程可在48 h内完成.结论新工艺制备人用鼠源性mAb F(ab′)2片段更简便高效、安全实用,能够适应中试放大及大规模生产的要求.     

抗重组SARS病毒N蛋白单克隆抗体制备及性质初步研究

目的：制备抗重组SARS病毒N蛋白单克隆抗体。方法：重组SARS病毒N蛋白免疫BALB／c雌性小鼠获得免疫脾细胞，利用杂交瘤技术将免疫脾细胞同骨髓瘤Sp2／0细胞融合，间接ELISA方法筛选阳性克隆并扩增。结果：获得了能稳定分泌抗重组SARS病毒N蛋白抗体的杂交瘤细胞株，经鉴定分泌的抗体IgG亚类为IgM。结论：制备了鼠源性单克隆抗体并初步研究了该抗体性质。