RPMI1640,DMEM及不同生长因子对大鼠颌下腺细胞生长作用的观察

目的　观察RPMI 16 4 0、DMEM及不同生长因子对大鼠颌下腺细胞增殖能力的影响 ,探讨最有利于大鼠颌下腺细胞的培养方法。方法　在RPMI 16 4 0或DMEM培养基中分别加入一定浓度的FBS(胎牛血清 )、EGF(表皮生长因子 )、HC(氢化可地松 )、INS(胰岛素 ) ,观察纤维细胞和腺细胞在不同培养基中的增殖能力。结果　在含5 %FBS、10ng/mlEGF、5 μg/mlHC、5 μg/mlINS的DMEM培养基中 ,上皮细胞生长良好 ,在只含血清的RPMI 16 4 0培养基中 ,纤维细胞生长旺盛 ,上皮样细胞生长不良 ,在不含血清的培养基中所有细胞均生长缓慢。结论　含有 5 %血清、10ng/mlEGF、5 μg/mlHC及 5 μg/mlINS的DMEM培养基最适合鼠涎腺上皮样细胞的生长     

α1-肾上腺素受体在颌下腺的表达及苯肾上腺素对唾液分泌调节的动物实验

目的研究α-肾上腺素受体亚型在家兔颌下腺的表达和分布，及其激动剂——苯肾上腺素促家兔颌下腺唾液分泌的相关机制。方法应用RT—PCR和Western blot检测家兔正常颌下腺α1-肾上腺素受体亚型mRNA及蛋白质的表达；免疫组化法检测颌下腺α1-肾上腺素受体亚型的分布及水通道蛋白5的表达；经颌下腺导管插管给予（1×10^-8）-（1×10^-6）moL／L的苯肾上腺素，观察家兔心率和血压的变化及促颌下腺唾液分泌的量效关系。结果家兔颌下腺有α1A-α1B和α1D-肾上腺素受体3种亚型的mRNA及蛋白质的表达，并广泛分布于导管和腺泡细胞的胞膜及胞质中。给予1×10^-7moL／L苯肾上腺素7d，促进颌下腺唾液分泌增加，而对心率、血压无明显影响；水通道蛋白5在腺泡及导管细胞的顶膜和侧膜的表达增加。结论家兔颌下腺存在α1A-、α1B-和α1D-肾上腺素受体3种亚型的mRNA和蛋白质的表达。经颌下腺导管给予低剂量苯肾上腺素促进唾液分泌是安全有效的；水通道蛋白5的表达增加可能与苯肾上腺素促唾液分泌的机制有关，该研究为临床治疗领下腺功能低下提供了初步依据。     

EGFR、p53在db/db自发性糖尿病小鼠颌下腺的表达

目的 观察表皮生长因子受体（EGFR）、p53在糖尿病小鼠颌下腺中的表达。方法 选取3、4、6、8、10月龄db／db糖尿病小鼠及相应月龄的db／＋m正常小鼠颌下腺。应用HE染色及免疫组织化学方法染色后进行图像分析，统计EGFR、p53在颌下腺组织内表达的细胞阳性率。结果 随着糖尿病的发展，颌下腺组织出现腺叶萎缩及实质细胞排列不整齐，堆集呈簇。纤维及血管增多；EGFR、p53在对 照组及糖尿病组颌下腺中均有表达。其细胞阳性率随月龄增大均呈增高趋势。且糖尿病组显著高于对照组。结论 ①db／db糖尿病可导致颌下腺组织萎缩及实质细胞形态学改变。②EGFR、p53表达增多。说明糖尿病时EGFR作为多效应受体，可能被激活从而诱导了颌下腺的细胞凋亡；p53表达的上升。提示随着糖尿病发展，颌下腺实质细胞有凋亡趋势。     

大鼠腮腺及颌下腺唾液的收集

目的:探讨大鼠腮腺及颌下腺唾液的收集方法。方法:采用微型Lashley吸盘法收集大鼠腮腺唾液,经口内颌下腺导管口直接插管法收集颌下腺唾液。毛果芸香碱刺激唾液分泌,假设唾液的比重为1.0 g/cm3,以唾液重量代表其体积,记录唾液流率。结果:大鼠腮腺唾液流率(9.9±1.4)μL/m in,颌下腺导管插管唾液流率(19.9±10.8)μL/m in。结论:可以采用微型吸盘法收集大鼠腮腺唾液,经口内颌下腺导管口直接插管法收集大鼠颌下腺唾液。     

单侧腮腺及颌下腺不同病理类型肿瘤1例

本文报道1例单侧涎腺不同病理类型肿瘤。患者女性,术后病检结果示左侧腮腺腺样囊性癌和左侧颌下腺多形性腺瘤。并结合文献报道,对涎腺多发性原发性肿瘤的分类、临床组织病理学特征、诊断及机制等进行讨论。     

颌下腺导管结石的矿物学研究

本研究用红外吸收光谱法对5枚颌下腺导管结石进行了分析,并用X射线粉晶衍射对另外3枚结石中央和周边部进行了测定。实验结果表明结石为混合性结石,中央部为正磷酸钙〔Ca_3(PO_4)_2〕或透磷钙石〔CaHPO_4·2H_2O〕,周边部为羟磷灰石〔Ca_5(PO_4)_3(OH)〕。根据实验数据,对涎石成因进行了讨论。     

关于唾液分泌机制的研究

应用全细胞膜片钳技术（ｐａｔｃｈ—ｃｌａｍｐｗｈｏｌｅｃｅｌｌｒｅｃｏｒｄｉｎｇ）对即刻分离的颌下腺腺泡细胞进行膜电流的测量。实验中发现乙酰胆碱、ＧＴＰ—ｒ—ｓ以及肌醇１．４．５－三磷酸二者均可引起性质相同的、振动性的、内向性的Ｃｌ－离子电流。由于Ｃａ２＋离子螯合剂能够消除三者引起的电流反应，因此这种振动性的Ｃｌ－离子电流是细胞内游离Ｃａ（２＋）离子浓度振动性变化的表示。即乙酰胆碱通过ＧＴＰ结合蛋白的激活，ＩＰ３的产生，引起Ｃａ（２＋）振动。     

颌下腺多形性腺瘤及其复发的临床研究

目的:评价颌下腺多形性腺瘤及其复发的临床特点及原因。方法:对8例颌下腺多形性腺瘤复发的临床特点和24例颌下腺手术野术中脱落细胞学进行分析及检测。结果:本院颌下腺多形性腺瘤术后有3例复发(3/366例,0.8%),另5例复发性颌下腺多形性腺瘤均为外院转入我院。8例病例复发时间均在1年以上,其中1例第2次复发时间为第1次复发术后5个月。1例复发性颌下腺多形性腺瘤术中见瘤体深叶处存留少许腺细胞,7例无腺细胞残留。术中脱落细胞显示8例原发性肿瘤手术野冲洗前有3例检测到腺泡细,5例为血液细胞,冲洗后2例为腺泡细胞,6例为血液细胞,8例复发性肿瘤冲洗前后均为1例腺泡细胞,7例血液细胞。8例非瘤性病变冲洗前1例为腺泡细胞,7例血液细胞,冲洗后均为血液细胞,3组之间无显著性差异(P>0.05)。结论:颌下腺多形性腺瘤复发罕见,可能与细胞学穿刺及瘤旁腺泡有关。     

体外培养大鼠颌下腺细胞的生物学特性研究

目的 :研究体外培养颌下腺细胞生物学特性。方法 :应用胰酶消化法进行颌下腺细胞的分离纯化 ,然后进行颌下腺细胞原代和传代培养。绘制培养细胞的生长曲线 ;MTT法检测培养细胞活力大小。透射电镜 (TEM )观察结合免疫组化检测鉴定细胞来源及性质。结果 :整个颌下腺细胞生长期间为呈多样性的上皮细胞 ,细胞可传 4～ 5代 ,成活 3 0～ 40d。随培养时间延长 ,各组细胞数量都有不同程度的增加 ,比较培养 72h原代、第 2代与第 4代细胞吸光度值 ,原代、第 2代与第 4代相比较有显著性差异 (P <0 .0 5 )。超微结构观察及免疫组化染色培养细胞表现为腺上皮细胞的特征。结论 :原代和传代培养第 1代、第 2代颌下腺细胞活性较强 ,可在进一步的实验得以应用