血小板活化因子对生育与不育男性精子顶体反应的影响

<正>在动物与人类受精过程中,获能和顶体反应(AR)是精子穿透卵子透明带,并与卵膜融合,最后发生受精的必要条件。只有获能的精子才能发生顶体反应。同样,只有经过顶体反应的精子才能与卵子受精[1]。已知大量的内源性因子可以调节精子     

猪精子细胞中胰岛素诱导产生的一氧化氮自由基促进精子获能

近期,胰岛素被证实具有诱导猪精子获能的能力。在不同的哺乳动物中,精子获能被认为与一氧化氮信号通路相关;因此,本研究使用荧光激活细胞分选技术探究经胰岛素处理的猪精子中一氧化氮水平。在同一样本中,用金霉素染色、蛋白质酪氨酸磷酸化模式和顶体状态来评估精子获能。结果显示经胰岛素处理的精子内一氧化氮水平及三种评价精子获能的指标均有显著提高;相反,用一氧化氮合成酶抑制剂（N-硝基-L-精氨酸甲酯）或抗胰岛素受体β抗体预处理的精子中胰岛素相关的作用全被逆转。这些结果表明胰岛素具有增强猪精子细胞内一氧化氮浓聚的能力并且提示胰岛素可能通过一氧化氮促进精子获能。     

受精调控机制的研究进展

人类和哺乳动物的受精机制是近年来的研究热点.通过生物化学、转基因和基因敲除等研究得出的受精机制主要分为4个部分：①精子获能;②精子结合至卵子透明带;③精子与透明带结合诱发顶体反应（AR）;④精子与卵子的结合和膜融合.笔者拟就近期研究阐明的精子获能、AR及精、卵融合的新信息、新观点,进行综述如下.     

壬基酚和镉离子在体外对小鼠精子顶体反应的影响

目的:研究壬基酚和镉离子在体外对小鼠精子顶体反应(AR)的影响。方法:从小鼠的输精管获得精子,体外培养使精子获能,加30μmol/L的A23187诱导精子顶体反应,然后使用不同浓度的壬基酚(10、20、30、60、100μmol/L),或者镉离子(500、2500、5000μmol/L)处理,对照组使用相应的载体溶剂处理。用FITC-PSA荧光染色法分析精子顶体反应。结果:当壬基酚浓度<30μmol/L时,小鼠精子顶体反应率与对照组比较没有显著差异(P>0.05),而当壬基酚浓度>60μmol/L时能够显著地抑制小鼠精子顶体反应发生率(P<0.01),并且观察到精子存活率随着壬基酚浓度增加而降低。与壬基酚作用不同,用镉离子对小鼠精子进行处理,在所选浓度内(500~5 000μmol/L)均对精子顶体反应无显著影响(P>0.05),且精子存活率与镉离子浓度变化无关。结论:壬基酚与镉离子对小鼠精子发生的作用是通过不同的途径来实现的,前者可以直接抑制顶体反应,而后者则与精子顶体反应无关。     

精子受精功能

精子 在与卵细胞受精融合之前，须经历一系列的生理和生化,炮括成熟、获能，顶体反应、膨化、融合等一系列过程，最近的研究观察到一些精子改变的细胞表现，并探讨其影响因素。     

IL-1对冷冻复温人精子顶体反应的影响

目的：研究复温温度和白细胞介素－1（IL－1）对冷冻精子复温后存活率和顶体反应率的影响。方法：采用精液速冻法，不同浓度IL－1作用于解冻后的精液，以三色染色法检测顶体反应率。结果：对冻融精子37℃水浴复温效果优于41℃，10ng/ml,50ng/ml IL-1可减少精子存活率和顶体反应率。结论：一定剂量IL－1可降低精子存活率和顶体反应率，可能是由于IL－1可使Na^ -K^ -ATP酶活性降低，而对丙二醛（MDA）无影响。     

考马斯亮蓝染色法检测人精子形态和顶体反应

目的 :探讨考马斯亮蓝G2 5 0染色法在人精子畸形率、顶体完整率和顶体反应检测中的应用。　方法 :用瑞 吉染色法和考马斯亮蓝G2 5 0染色法分别对获能前后和孕酮诱导顶体反应后的人精子进行涂片染色 ,观察其形态 ,并计算精子畸形率、顶体完整率及顶体反应率。　结果 :瑞 吉染色法和考马斯亮蓝G2 5 0染色法在检测人精子畸形率和顶体完整率上差异无显著性 (P >0 .0 5 )。孕酮诱导顶体反应后的精子用考马斯亮蓝G2 5 0染色后呈现两种类型 :顶体区染成紫蓝色和不着色或染成淡紫色 ,后者随诱导时间延长而增加 ,可能代表了已发生顶体反应的精子。诱导 1h的顶体反应率为 (75 .1± 3.8) %。　结论 :考马斯亮蓝G2 5 0染色法可作为检测人精子形态和顶体反应的可靠而实用的方法     

精子正常形态率、顶体完整率、顶体反应率与卵子体外受精率的相关性研究

目的:通过检测常规体外受精中(in vitro fertilization IVF)精液常规分析正常男性的精子正常形态率、顶体完整率、顶体反应率并分析其与卵子的体外受精率之间的关系,旨在为辅助生殖技术提供几种可靠的判断精子生育力的参数与指标。方法:选择2008年7月1日到2009年12月30日间在广西医科大学第三附属医院生殖医疗中心进行控制性长方案超排卵下行常规IVF-ET的100对夫妻,共100个周期的资料做前瞻性分析,男方精液常规分析属正常范围,分析100份标本精子正常形态率、精子顶体完整率以及精子顶体反应率;观察并记录获卵个数、成熟卵个数、受精卵个数、未受精卵个数,计算其受精率。然后应用计量资料t检验,F检验以及线性相关等统计学方法对精子各项参数与卵子受精率之间的相关性进行分析。结果:实验组1,精液标本按其正常精子形态百分率分为3组,A组:≥5%而<10%、B组:≥10%而<15%、C组:≥15%,卵子体外受精率分别为67.05%、74.51%、82.49%,各组间两两相比差异有统计学意义(P<0.05)。实验组2,按顶体完整率分为两组,A组:≤85%组、B组:>85%组,卵子体外受精率分别为74.25%和82.14%,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。实验组3,按顶体反应率分为三组,A组:<14%、B组:≥14%而≤25%、C组:>25%,其卵子体外受精率分别为73.45%、77.19%、82.74%,各组间的差异有统计学意义(P<0.05)。实验组4,按精子正常形态百分率分为两组<15%和>15%组,所对应的顶体完整率分别为79.51%、87.27%,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。实验组5,用多重线性回归分析,精子正常形态率、顶体完整率、顶体反应率的标准化系数和P值分别为0.352、0.497、0.271;0.045、0.005、0.017,各个系数均有统计学意义。其中又以顶体完整率的标准化系数最大。结论:1.对于精液常规分析正常的男性,约有50%存在着不同程度的精子形态异常。卵子的受精率随正常形态精子所占百分率的升高而增高;其正常精子形态率≥5%,仍可得到一个较好的体外受精率,因此可行常规体外受精助孕。2.对于精液常规分析正常的男性,约有65%男性的精子顶体完整率>85%,随着精子顶体完整率的增加,卵子的受精率也明显增高;3.对于精液常规分析正常的男性,其78%男性精子顶体反应率≥14%,在体外受精中卵子的受精率随着精子顶体反应率所占百分比的增加而增高;4.上述三者都是影响卵子受精的重要因素,卵子体外受精率与以上三项指标间存在较强的相关关系,而其中又以顶体完整率对卵子体外受精率的影响程度最大。5.对于精液常规分析正常的男性,若正常精子形态率≥5%,在体外受精助孕前,精子顶体完整率和精子顶体反应率的检测,可不作为常规检查项目。     

IgA抗精子抗体对精子顶体反应的影响

目的 探讨精浆中IgA抗精子抗体对人精子顶体反应的影响。方法 利用免疫珠法（IBT）筛选出IgA抗精子抗体阳性精浆标本同正常人精子孵育，以孕酮诱发精子顶体反应；以特异性荧光标记物．络合异硫氰酸荧光素的花生凝集素（FITC-PNA）标记精子顶体，通过流式细胞仪检测精子顶体完整性。结果 与IgA抗精子抗体阳性精浆孵育的精子，其孕酮诱发的顶体反应发生率明显低于正常精浆及精子培养液组（P〈0．01），正常精浆组及精子培养液组间无显著性差异（P〉0．05）；IgA抗精子抗体阳性精浆组、正常精浆组、精子培养液组自发顶体反应的发生率无显著性差异（P〉0．05）。结论 免疫性不育患者精浆中的IgA抗精子抗体可以明显抑制孕酮诱发的顶体反应的发生，可能是导致不育的原因之一。