冰片对黄芪甲苷和三七总皂苷配伍有效成分在脑缺血/再灌注模型大鼠脑组织分布的影响

目的探讨冰片是否具有促进黄芪甲苷(AST IV)和三七总皂苷(PNS)配伍时主要有效成分透过大脑中动脉栓塞(MCAO)再灌注模型大鼠血脑屏障的作用。方法大鼠随机分为假手术组、模型组、冰片组、AST IV组、PNS组、AST IV+PNS组、冰片+AST IV+PNS组,制备MCAO再灌注大鼠模型,以液相色谱-质谱联用法(LC-MS/MS)测定大鼠患侧与健侧大脑皮层、小脑中AST IV和PNS有效成分(人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1)的含量。结果 AST IV无论是单用还是与PNS、冰片配伍,其口服后主要分布在大脑皮层,尤其是患侧大脑皮层。冰片+AST IV+PNS能使患侧与健侧大脑皮层中AST IV含量显著增加。PNS单用,其有效成分人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1主要分布在患侧小脑。冰片+AST IV+PNS能使患侧大脑皮层中人参皂苷Rb1含量显著增加,使健侧和患侧大脑皮层中人参皂苷Rg1含量增加,使大脑皮层尤其是患侧大脑皮层及小脑中三七皂苷R1含量增加。结论大鼠脑缺血再灌注后,AST IV与PNS的有效成分人参皂苷Rb1、Rg1及三七皂苷R1在大脑皮层和小脑均有一定的分布。AST IV单用时,AST IV主要分布在大脑皮层;PNS单用时,人参皂苷Rb1、Rg1及三七皂苷R1主要分布在小脑。冰片与AST IV、PNS合用后,能促进AST IV及人参皂苷Rb1、Rg1及三七皂苷R1向大脑皮层富集,尤其是向缺血再灌注侧大脑皮层富集;而且能不同程度地促进AST IV,人参皂苷Rb1、Rg1及三七皂苷R1在大脑皮层的吸收,尤其是在患侧大脑皮层的吸收。     

针刺预处理对缺氧缺血性脑病模型乳鼠血脑屏障的保护作用

目的：观察针刺预处理对缺氧缺血性脑病 （HIE） 模型乳鼠血脑屏障 （BBB） 的保护作用，探讨针刺治疗 HIE 的作用机制。方法：将 70 只 SPF 级乳鼠随机分为假手术组、模型组、针刺预处理组。除假手术组外，采用结扎左侧颈总动脉然后进行 3.5 h 缺氧以建立 HIE 模型。采用悬吊实验评估实验动物的运动能力，苏木素-伊红（HE）染色观察神经细胞缺氧缺血后的病理学变化，透射电镜观察 BBB 亚显微结构，脑干湿重法测量含水量，蛋白免疫印迹法检测脑缺氧缺血后闭锁蛋白 （Occludin）、紧密连接蛋白-1 （ZO-1） 表达水平。结果：与假手术组比较，模型组乳鼠悬吊实验维持时间减少 （P＜0.05），缺氧缺血侧脑组织含水量增加 （P＜0.05），皮层组织 Occludin、ZO-1 蛋白表达下降 （P＜0.05）。与模型组比较，针刺预处理组乳鼠悬吊实验维持时间增加 （P＜0.05），缺氧缺血侧脑组织含水量减少 （P＜0.05），皮层组织 Occludin、ZO-1 蛋白表达升高 （P＜0.05）。结论：针刺可能通过上调 Occludin、ZO-1 蛋白表达维持 BBB 的完整性，从而改善缺氧缺血性脑损伤。     

大鼠脑缺血再灌注损伤后HMG-COA还原酶抑制剂下调Caveolin-1表达对血脑屏障的影响

目的采用线栓法构建大鼠的中动脉缺血再灌注(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,应用不同剂量辛伐他汀(HMG-COA reductase inhibitor)下调Caveolin-1表达,研究被不同程度抑制的Caceolin-1对BBB的作用。方法 160只雄性SD大鼠分成高、中、低剂量的辛伐他汀预处理组,同等剂量生理盐水缺血组及假手术组。预处理及生理盐水组连续灌胃给药7 d,最后一次灌胃3 h后建立MCAO,缺血2 h后抽出线栓再灌,假手术组仅结扎颈外动脉。手术24 h后进行神经功能评分,取脑分别进行TTC染色检测脑梗死体积、干湿质量法测量脑含水量、分光光度计测OD值测量伊文思蓝渗出、免疫组化法及蛋白印记杂交检测Caveolin-1的表达。结果神经功能评分结果显示,全部辛伐他汀组明显优于生理盐水组(P0.05);TTC染色示,低剂量及中剂量预处理组梗死体积百分比明显小于生理盐水缺血组(P0.01),高剂量组未见优势,各预处理组两两比较,低及中剂量组梗死体积小于高剂量组(P0.05);干湿质量百分率测定预处理组湿质量明显小于生理盐水缺血组(P0.05),且各预处理组间两两比较发现中剂量组湿质量小于高剂量组(P0.05);分光光度计测伊文思蓝渗透OD值结果,各给药组伊文思蓝渗透水平均低于生理盐水缺血组(P0.05),各预处理组两两比较,低剂量组优于中及高剂量组且中剂量组优于高剂量组(P0.05);Western Blot定量分析结果显示,各预处理组Caceolin-1表达水平均低于生理盐水缺血组(P0.05),各给药组两两比较发现,随剂量增加Caveolin-1被降低水平增加即低剂量组中剂量组高剂量组(P0.05);免疫组化示,Caveolin-1蛋白在各组大鼠脑组织中均沿微血管阳性表达,免疫组化染色半定量测量分布于血管内皮的Caveolin-1表达,除中与高剂量间差异无统计学意义(P0.05)外,与Western Blot分析结果大概一致。结论大鼠MCAO再灌注模型中Caveolin-1蛋白的表达量会增加。辛伐他汀的预处理可以有效抑制Caveolin-1的表达,适当剂量辛伐他汀可以通过抑制Caveolin-1表达保护血脑屏障完整,但过高或过低水平Caveolin-1蛋白都会破坏血脑屏障增大梗死的体积。     

癫痫清颗粒对阿尔茨海默病模型小鼠血脑屏障的影响

目的研究癫痫清颗粒对阿尔茨海默病模型小鼠血脑屏障通透性和学习记忆能力的影响。方法ICR小鼠随机分为假手术组、模型组、癫痫清颗粒组、盐酸多奈哌齐组、BD1047组和癫痫清+BD1047组,侧脑室注射Aβ25-35,制作小鼠AD模型,连续给药21 d,每日1次。第15天进行Y迷宫实验,第16~21天进行水迷宫实验。末次给药结束1 h后进行伊文斯蓝渗漏实验。表达采用免疫组化检测VEGF和GFAP,RT?PCR测定皮层中Cx43和occludin mRNA表达。结果与假手术组比较,模型组小鼠自发交替反应率降低(P<0.05);潜伏期和伊文斯蓝渗漏量增加(P<0.01);GFAP和VEGF表达降低(P<0.01);皮质中的Cx43和occludin mRNA表达降低(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,癫痫清颗粒组的自发交替反应率提高(P<0.05);潜伏期缩短(P<0.01);伊文斯蓝渗漏量和海马中GFAP的表达降低(P<0.01);皮质中VEGF及Cx43、occludin mRNA的表达升高(P<0.01)。癫痫清+BD1047组的自发交替反应率、潜伏期、伊文斯蓝渗漏量、Cx43mRNA、GFAP和VEGF表达与模型组比较差异无统计学意义,但occludin mRNA表达增加(P<0.05)。结论癫痫清颗粒可通过影响Sigma 1受体,抑制星形胶质细胞过度活化,增加VEGF和Cx43、occludin mRNA表达,降低血脑屏障通透性,进而改善AD模型小鼠的学习记忆能力。     

血脑屏障通透性与接受溶栓的急性脑梗死患者预后的相关性

目的 探讨血脑屏障通透性与接受溶栓治疗的急性脑梗死患者预后的相关性。方法 纳入绵阳市盐亭县人民医院在2018年5月-2019年5月收治的急性脑梗死且接受溶栓治疗的患者共76例,随访3个月,根据预后情况分为预后良好组和预后不佳组,比较2组患者临床资料、实验室检查指标水平、血脑屏障通透性等。结果 所有研究对象随访3个月后共有8例患者失访,其中mRs评分为良好(0～1分)共32例,为预后良好组,余为预后不佳组(2～6分)共36例; 2组患者性别、BMI、梗死部位、冠心病史、高血压病史、糖尿病史、高脂血症史、脑卒中史、发病时间、吸烟史、饮酒史、家族史、应用药物、基线NIHSS评分、Cr,BUN,HDLc,LDLc,PLT,HGB,APTT,DD、空腹血糖、糖化血红蛋白水平均无明显差异(P>0.05); 预后良好组患者年龄、房颤史的比例、UA水平与预后不佳组比较均有明显差异(P<0.05); 2组患者AUC无明显差异(P>0.05); 预后良好组患者K_trans及V_P与预后不佳组比较均有明显差异(P<0.05); 进行logistics回归分析显示年龄(OR=1.190,P=0.026)、K_trans(OR=1.104,P=0.005)为预后不佳的危险因素,V_P(OR=0.556,P=0.022)为保护因素。结论 血脑屏障通透性为影响接受溶栓治疗的急性脑梗死患者预后的相关因素。     

冰片衍生物对血脑屏障通透性影响的研究

【目的】 探讨10种合成的冰片衍生物对血脑屏障通透性的影响。【方法】 采用多功能酶标仪检测小鼠脑组织中伊文思蓝的含量来评价2-氯苯甲酸冰片酯、3，5-二硝基苯甲酸冰片酯、3-硝基苯甲酸冰片酯、4-硝基苯甲酸冰片酯、1-萘乙酸冰片酯、4-氯苯甲酸冰片酯、苯甲酸冰片酯、3-甲基苯甲酸冰片酯、4-甲基苯甲酸冰片酯、三氯乙酸冰片酯10种冰片衍生物的血脑屏障通透性效果。【结果】 酶标仪法测定结果显示，10种冰片衍生物中只有2-氯苯甲酸冰片酯的血脑屏障通透性效果显著优于右旋冰片组（阳性对照），两者具有显著性差异（P < 0.001）。【结论】 2-氯苯甲酸冰片酯对血脑屏障通透性具有促进作用。     

水通道蛋白4与脑血管病

水通道蛋白4（aquaporin4,AQP4）是水通道蛋白家族成员，在中枢神经系统主要表达于星形胶质细胞终足。大量实验研究显示，AQP4表达对不同类型卒中后脑水肿的发生、发展和消退起着重要作用。此外，AQP4表达还可通过影响血脑屏障完整性以及促进星形胶质细胞迁移、神经再生、神经炎性反应等机制影响脑血管病的发展过程。探讨AQ P4在脑内物质跨膜转运和细胞内外环境平衡中的调节机制及其在脑血管病模型中的表达，对于理解临床脑血管病的发生、发展、保护和治疗具有重要的意义。