温阳解郁颗粒调节BDNF/TrkB/ERK信号通路保护皮质酮诱导损伤型海马神经细胞的作用机制研究＊

目的 观察温阳解郁颗粒（Wenyang Jieyu granule，WYJY）对皮质酮（Corticosterone，CORT）诱导损伤型小鼠海马神经细胞（TH22 cell）的保护作用，基于脑源性神经营养因子（Brain derived neurotrophic factor， BDNF）/酪氨酸激酶B（Tyrosine kinase B， TrkB）/细胞外信号调节蛋白激酶（Extra cellular regulated protein kinases， ERK）信号通路探讨WYJY保护海马神经细胞的作用机制。方法 体外构建小鼠海马神经细胞皮质酮诱导损伤模型，以不同浓度的WYJY和氟西汀（Fluoxetine，FXT）含药血清作用于模型细胞，细胞增殖-毒性检测（Cell Counting Kit-8， CCK-8）法分析细胞活性，倒置显微镜下观察给药前后细胞形态结构的改变，采用蛋白免疫印迹法（Western Blot）、实时荧光定量PCR（Quantitative real-time PCR， qPCR）法检测神经细胞内凋亡因子（BCL2-Associated X， Bax）、抗凋亡因子（B-cell lymphoma-2， Bcl-2）、BDNF、Trkb、ERK以及丝氨酸/苏氨酸激酶（Phospho-p90RSK， RSK）、环磷腺苷效应元件结合蛋白（cAMP-response element binding protein， CREB）蛋白表达水平以及相关基因的表达水平。结果 在浓度为459.5 μmol·L^-1的CORT作用24 h后，HT22细胞的活性抑制率达到50%，在此条件作用下细胞形态结构损伤明显，凋亡程度严重，细胞上清中BDNF的含量显著减少（P<0.05），细胞内凋亡相关因子Bax/Bcl-2的比值明显升高（P<0.01），BDNF、Trkb、ERK、RSK、CREB磷酸化蛋白表达水平和mRNA表达水平明显降低（P<0.01）；以5%的浓度为2.85 g·kg^-1的WYJY和10%的FXT含药血清作用于受损的HT22细胞后，HT22细胞存活率明显提升（P<0.01），细胞结构的损伤明显改善，细胞凋亡程度减轻，细胞外BDNF的含量显著升高（P<0.05），细胞内Bax/Bcl-2比值显著下调（P<0.01），BDNF、Trkb、ERK、RSK、CREB磷酸化蛋白表达水平和mRNA表达水平显著提升（P<0.05，P<0.01）。结论 温阳解郁颗粒可有效保护高浓度CORT造成的小鼠海马神经细胞损伤。调控BDNF/Trkb/ERK通路，放大CREB信号传导，影响Bcl-2、BDNF水平，可能是其保护海马神经元，发挥抗抑郁疗效的重要机制。     

电针和CO2激光灸对奥沙利铂所致周围神经毒性大鼠的外周保护机制

目的观察电针与CO_2激光灸对奥沙利铂所致的周围神经毒性大鼠的缓解作用及其外周保护机制。方法SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组、电针组和CO_2激光灸组,每组10只。除对照组外,其余各组行奥沙利铂溶液腹腔注射2 mg/kg,隔日1次,共4次。对照组采用等体积的5%葡萄糖溶液腹腔注射。分别采用电针和CO_2激光灸双侧足三里穴对电针组和CO_2激光灸组进行相应治疗,隔日1次,共7次。检测各组大鼠足底机械痛阈和冷刺激抬足反应率,应用透射电镜技术观察大鼠坐骨神经形态学改变,Western blot法测定坐骨神经瞬态电压感受电位锚定蛋白(TRPA1)和神经生长因子(NGF)的表达。结果与对照组比较,模型组机械性痛阈显著降低(P0.01);与模型组比较,造模后第7天和第13天电针组机械性痛阈显著升高(P0.01)。与对照组比较,模型组的冷刺激抬足反应率显著升高(P0.05);与模型组比较,造模后第7天和第13天电针组和CO_2激光灸组的冷刺激抬足反应率均下降(P0.01)。透射电镜结果显示模型组坐骨神经出现比较严重的髓鞘变性,电针组和CO_2激光灸组均有一定改善。与对照组比较,模型组大鼠坐骨神经TRPA1蛋白表达水平显著增加,而NGF表达显著下调(P0.01);与模型组比较,电针组和CO_2激光灸组TRPA1表达水平显著降低,而NGF的表达水平显著上调(P0.05)。结论电针和CO_2激光灸均可以缓解大鼠奥沙利铂诱导的周围神经病变,其作用机制可能与调节外周坐骨神经TRPA1和NGF的表达有关。     

大补元煎通过上调BDNF/TrkB/CREB信号通路改善APP/PS1双转基因痴呆小鼠海马突触可塑性

目的:观察大补元煎对APP/PS1痴呆小鼠海马突触可塑性及脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸蛋白激酶受体B(TrkB)/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)信号通路的作用,并探讨其改善突触可塑性的可能机制。方法:将APP/PS1小鼠36只分为模型组、多奈哌齐组(6.5×10~(-4)g·kg~(-1)·d~(-1))和大补元煎组(13.2 g·kg~(-1)·d~(-1)),野生鼠12只设为正常组,正常组和模型组给予等体积生理盐水,各组连续灌胃30 d。应用Morris水迷宫检测各组小鼠的学习记忆能力,应用尼氏染色和高尔基染色观察海马区神经元和突触的病理形态变化,应用免疫荧光(IF)观察海马突触后致密蛋白95(PSD95)及突触素(SYN)的蛋白表达水平,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马中BDNF,TrkB,CREB及磷酸化CREB(p-CREB)的蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组小鼠平台潜伏期和游泳总路程增加(P0.01),穿越平台次数和目标象限停留时间减少(P0.01),小鼠海马CA3区神经元胞内尼氏体减少或消失,小鼠海马CA3区神经元及树突分支数量、树突棘密度减少(P0.01),小鼠海马SYN,PSD95,BDNF,TrkB及p-CREB的蛋白表达水平减少(P0.01)。与模型组比较,多奈哌齐组和大补元煎组小鼠平台潜伏期和游泳总路程减少(P0.05,P0.01),穿越平台次数和目标象限停留时间增加(P0.05,P0.01),小鼠海马CA3区神经元胞内尼氏体数量增多,小鼠海马CA3区神经元及树突分支数量,树突棘密度增加(P0.05,P0.01),小鼠海马SYN,PSD95,BDNF,TrkB及p-CREB的蛋白表达水平增加(P0.05,P0.01)。结论:大补元煎改善APP/PS1双转基因小鼠突触可塑性的机制可能与其上调小鼠海马中BDNF/TrkB/CREB信号通路有关。     

越鞠丸联合盐酸氟西汀胶囊治疗抑郁症临床研究

目的:观察越鞠丸联合盐酸氟西汀胶囊治疗抑郁症的临床效果及对血清脑源性神经营养因子(BDNF)水平的影响。方法:纳入因抑郁症就诊的64例患者,随机分为对照组与治疗组各32例。对照组给予盐酸氟西汀胶囊抗5-羟色胺(5-HT)治疗,治疗组在对照组基础上联合越鞠丸治疗。比较2组治疗前后汉密尔顿抑郁量表(HAMD-24)评分、抑郁症状学快速自评量表(QIDS-SR16)、血清BDNF水平及总体疗效。结果:治疗前后比较,2组HAMD-24评分、QIDS-SR16评分均下降,血清BDNF水平升高(P<0.05),组间比较,治疗组2项评分下降更多,血清BDNF水平升高更多(P<0.05)。治疗后,治疗组总体疗效为90.63%,优于对照组的68.75%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:越鞠丸联合盐酸氟西汀胶囊治疗抑郁症,可更加有效减缓患者抑郁症状,升高血清BDNF水平,增加临床疗效,有效保护患者脑功能,值得临床推广。     

“固本通络”电针法对糖尿病周围神经病变患者IGF-1、BDNF、NGF水平的影响

摘要：目的 探讨“固本通络”电针法对糖尿病周围神经病变（DPN）患者血清胰岛素样生长因子1（IGF-1）、人脑源性神经营养因子（BDNF）、人神经生长因子（NGF）水平的影响。方法 选取2018年1月~2019年6月本院门诊DPN患者100例，随机分为观察组（n=50）和对照组（n=50）。观察组采取电针治疗，对照组给予α-硫辛酸治疗。比较两组治疗前后神经传导速度、临床疗效各症状评分、血清各指标水平及毒副作用发生情况。结果 治疗后两组正中神经和腓总神经的运动神经传导速度（MNCV）和感觉神经传导速度（SNCV）均显著高于治疗前（P＜0.05），且治疗后观察组神经传导速度均显著高于对照组（P＜0.05）；治疗后观察组灼热感、麻木、感觉异常、疼痛评分显著低于治疗前（P＜0.05），且治疗后观察组以上评分均显著低于对照组（P＜0.05）；治疗后两组IGF-1、BDNF、NGF水平均显著高于治疗前（P＜0.05），且治疗后观察组以上因子水平均显著高于对照组（P＜0.05）；观察组不良反应发生率显著低于对照组（P＜0.05）。结论 “固本通络”电针法治疗糖尿病周围神经病变疗效显著，不仅能改善血清各生长因子水平，还能调节周围神经传导速度，且安全性高。     

鼠神经生长因子联合神经节苷酯治疗新生儿重度缺氧缺血性脑病的临床研究及预后分析

目的分析新生儿重度缺氧缺血性脑病应用鼠神经生长因子联合神经节苷酯治疗的效果及预后。方法选取2014年7月～2017年7月在我院治疗的108例重度HIE患儿临床资料,按不同治疗方案分2组各54例,对照组施予神经节苷酯治疗,观察组在其基础联合鼠神经生长因子治疗,比较两组疗效及预后。结果观察组治疗总有效率94.44%比对照组75.93%高;观察组治疗后NBNA评分(38.74±3.34)分比对照组(35.12±3.14)分高(P0.05)。观察组后遗症发生率11.11%比对照组27.78%低(P0.05)。结论通过鼠神经生长因子、神经节苷酯联合治疗后,患儿缺氧缺血性脑病得以控制,疗效提高,有效改善神经功能,且后遗症发生率减小,预后较佳。     

鼠神经生长因子治疗老年脑出血临床疗效及对患者血清NSE、hs-CRP、TNF-α、IL-8、MMP-9影响

目的探析鼠神经生长因子(mNGF)治疗老年脑出血临床疗效及对患者血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、白介素(IL)-8、肿瘤坏死因子(TNF)-α、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、金属基质蛋白酶(MMP)-9和生活质量影响。方法选取本院2017年5月至2018年6月收治的老年脑出血患者58例,双盲法数字随机分组,对照组(29例)给予降血压、营养细胞、依达拉奉及尼莫地平等常规用药,观察组(29例)则常规用药基础联合m NGF治疗,比较两组血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、炎性因子,评价临床疗效及生活质量。结果两组治疗4w后hs-CRP、TNF-α、IL-8、MMP-9、NSE、NIHSS评分、血肿量及水肿面积均明显低于治疗前(P0.05),且观察组hs-CRP、TNF-α、IL-8、MMP-9、NSE、NIHSS评分、血肿量及水肿面积改善幅度明显优于对照组(P0.05);观察组治疗有效率明显高于对照组(P0.05)。两组治疗4w后Barthel指数、SIS评分均明显高于治疗前(P0.05),且观察组Barthel指数、SIS评分提高幅度明显优于对照组(P0.05)。结论老年脑出血患者采取m NGF治疗效果良好,可减轻炎症反应,血肿吸收及缓解水肿,促进神经功能恢复,改善生活质量。     

鼠神经生长因子对原发性闭角型青光眼视功能的影响

目的研究鼠神经生长因子对原发性闭角型青光眼患者视功能的影响。方法选取2015年2月至2017年12月濮阳市人民医院收治的原发性闭角型青光眼患者76例,采用随机数表法将患者分为对照组和观察组,每组38例。两组患者均接受小梁切除术,对照组术后采取甲钴胺治疗,观察组采取鼠神经生长因子治疗。对两组患者治疗前后视力、视野、眼压变化进行观察和比较,对患者血清一氧化氮(NO)和内皮素-1(ET-1)水平进行检测和评估。结果两组患者治疗后1个月视力和眼压比较,差异无统计学意义(均P>0.05);治疗后1个月,观察组患者视敏度值高于对照组,缺损值低于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。治疗后1个月观察组患者血清NO水平高于对照组,ET-1水平低于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论鼠神经生长因子用于原发性闭角型青光眼可改善患眼视力,降低眼压,改善视野并促进视神经功能恢复,鼠神经生长因子保护视功能的作用机制可能与升高患者血清NO水平和降低血清ET-1水平有关。