血清TP、TS、DPD 表达与SOX 方案治疗晚期胃癌疗效的相关性

目的　探讨血清TS、TP 及DPD 表达与替吉奥化疗治疗晚期胃癌患者疗效的相关性。方法　选择符合要求的晚期胃癌患者化疗前血清标本，使用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测患者外周血中TP、TS、DPD 的表达水平，分析其与患者化疗疗效的相关性。结果　晚期胃癌患者血清中TS 低表达者化疗有效率高于高表达者（77.78% vs. 28.57%，P<0.05），TP 高表达者化疗有效率高于低表达者（66.67% vs. 25%，P<0.05），DPD 低表达者化疗有效率高于高表达者（62.5% vs. 21.43%，P<0.05）。结论　晚期胃癌患者血清TS、TP、DPD 表达水平与SOX 方案化疗的临床疗效有关，TS、DPD 阴性及TP 阳性的晚期胃癌患者SOX 方案化疗的疗效更好。     

转染胸苷磷酸化酶基因对5'-脱氧氟脲苷抗结肠癌细胞株活性的影响

目的 探讨人结肠癌细胞系SW480和LOVO细胞株转染胸苷磷酸化酶(TP)基因后转化5′-脱氧氟脲苷(5′-DFUR)为氟尿嘧啶(5-FU)能力的变化及5′-DFUR抗癌细胞株活性的变化.方法 构建包含TP cDNA的真核表达载体,用慢病毒包装后转染结肠癌细胞株SW480和LOVO.转染5代后以免疫荧光法和流式细胞技术检测转染效率;RT-PCR和Western blot法分别检测2株细胞的TP mRNA和TP蛋白表达.然后以高效液相色谱法(HPLC)检测2株细胞转染前后转化5′-DFUR为5-FU的量;MTT法检测5′-DFUR对2株细胞转染前后半数抑制浓度(IC50).结果 转染TP基因后SW480-TP与LOVO-TP 5代细胞转染效率稳定在95％左右.2株转染细胞的TP mRNA表达分别比野生型细胞增加(695±172)倍(t=-7.00,P=0.002)和(282±87)倍(t=-5.61,P=0.030),Western blot显示TP蛋白表达也明显增强.转染后的SW480-TP与LOVO-TP在培养基中分别使5′-DFUR转化为5-FU的量增加(t=19.406 ～66.921,P＜0.01).5′-DFUR对SW480的IC50由(1641±53) μmol/L降至(587±17) μmol/L(t=-32.59,P＜0.01);对LOVO的IC50由(1607±57) μmol/L降至(1088±89) μmol/L(t=-8.52,P＜0.01).结论 慢病毒载体能够高效地将TP cDNA转染至人结肠癌细胞SW480和LOVO并稳定传代,转染后2株细胞的TP mRNA和TP蛋白表达明显增高,使5′-DFUR转化为5-FU的量增加,对结肠癌细胞株SW480和LOVO的抑制作用增强.     

TP在子宫内膜癌中的表达及其临床意义

目的检测子宫内膜癌中胸苷磷酸化酶(TP)的表达情况,探讨它与子宫内膜癌预后的相关性及临床意义。方法采用免疫组化SP法检测15例正常内膜,10例不典型增生内膜,48例子宫内膜癌石蜡标本中的TP蛋白表达情况。结果子宫内膜癌TP表达显著高于正常内膜(PTP=0.029)。TP表达与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移及临床病理分期无相关性(P>0.05)。结论 TP的过度表达可能与子宫内膜癌的预后有关。     

干扰素α2a对人结肠癌细胞胸苷磷酸化酶表达和5′-脱氧氟尿苷抗癌活性的影响

目的 探讨干扰素-α2a(IFN-α2a)对人结肠癌细胞胸苷磷酸化酶(TP)mRNA表达水平以及5′-脱氧氟尿苷(5′-DFUR)和氟尿嘧啶(5-FU)抗癌效应的影响.方法 不同剂量IFN-α2a分别处理人结肠癌细胞LOVO和SW480,荧光定量PCR检测TP mRNA表达水平;MTT法检测联合应用IFN-α2a前后5-FU和5′-DFUR对LOVO和SW480抑制作用的半数有效浓度(IC50)变化情况.结果 与0 U/ml IFN-α2a浓度组相比,500 U/ml及5000 U/ml组可明显上调LOVO和SW480细胞TPmRNA表达(P＜0.01),而50 U/ml则对上述两种细胞TPmRNA表达水平无明显影响(P＞0.05).联合应用浓度为20 U/ml的IFN-α2a后,5-FU对LOVO和SW480细胞的IC50无明显改变(P＞0.05),但5′-DFUR的IC50则明显降低(P＜0.05).结论 IFN-α2a能上调结肠癌细胞TP mRNA的表达水平,并可使5′-DFUR对结肠癌细胞的IC50明显下降,而对5-FU则无明显影响.     

缺血性脑卒中患者甲硫腺苷磷酸化酶基因的表达

目的：研究甲硫腺苷磷酸化酶（methylthioadenonine phosphorylase,MTAP）基因在缺血性脑卒中患者中的表达,探讨MTAP基因与缺血性脑卒中发病的关系。方法：采用聚合酶链式反应（ PCR）方法,检测并比较50例缺血性脑卒中患者和50例对照组人群 MTAP基因的表达情况,分析MTAP表达与缺血性脑卒中的相关性。结果：MTAP基因在缺血性脑卒中患者与正常对照组比较,差异无统计学意义（ P ＞0．05）。结论：缺血性脑卒中的发病机制可能与MTAP基因表达无关。     

MTAP基因rs7850937多态性与脑梗死的相关性

目的探讨甲硫腺苷磷酸化酶(MTAP)基因多态性及其与脑梗死发病的关系。方法以rs7850937位点为遗传标记,采用聚合酶链式反应和限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测273例脑梗死患者和344例对照者的基因型。用Logistic回归分析基因多态性与脑梗死的关系。结果脑梗死组rs7850937位点A等位基因频率较对照组增高(x2=6.251,P=0.044),脑梗死组AA、GA、GG基因型频率较对照组增高(x2=4.970,P=0.026)。Logistic回归分析显示MTAP基因rs7850937位点AG+AA基因型是脑梗死发病的独立危险因素。结论 MTAP基因rs7850937位点多态性与脑梗死的发病可能有关,AG+AA基因型为脑梗死患者发病的独立危险因素。     

糖原磷酸化酶同工酶BB的临床应用

糖原磷酸化酶同工酶BB(GPBB)是一种心肌细胞中含量较高的酶,该酶对心肌缺血缺氧敏感,在心肌损伤早期(小于4h)即可释放入血,是急性心肌损伤早期诊断的一项很好的指标。随着生物化学、免疫、分子生物学及其检测技术的发展,发现GPBB对缺血性心肌损伤的早期诊断、产科、儿科学等方面的研究颇具价值。     

基因工程菌发酵表达核苷磷酸化酶条件的优化

目的 优化苷磷酸化酶（包括嘌呤和嘧啶核苷磷酸化酶）基因工程菌的发酵表达条件。方法通过工程菌摇瓶培养,测定吸光度D值,考马斯亮蓝（Bradford）法测定蛋白,SDS—PAGE电泳和凝胶成像扫描分析表达量,优化表达条件;通过正交试验优化50L发酵罐发酵条件。结果摇瓶培养起始pH为7．0～7．2,于30℃培养4h,加入终浓度为0．4mmol／L的异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）诱导8h后收获菌体,可得到较高的生物量和重组酶蛋白表达量。50L发酵罐的最佳条件为起始pH为7．0～7．2,于32oC培养4h,加入终浓度为0．4mm01／L的IPTG诱导9h后收获菌体,每升发酵液可得2g以上的酶蛋白。结论基因工程菌发酵表达核苷磷酸化酶产量较高,可工业化生产．为酶法合成核苷酸类似物的研究奠定了基础。     

急性心肌梗死伴糖尿病患者糖原磷酸化酶同工酶BB及脂蛋白相关磷脂酶A2浓度与心功能的关系

目的分析急性心肌梗死伴糖尿病患者糖原磷酸化酶同工酶BB(glycogen phosphorylase isoenzyme BB,GPBB)及脂蛋白相关磷脂酶A2(lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PLA2)浓度与心功能的相关性,为临床诊断及治疗提供参考。方法以河北医科大学第一医院2013年1月至2017年12月期间诊治的急性心肌梗死伴糖尿病患者120例为研究对象。以本院同期健康体检者(对照组,n=80)、单纯糖尿病患者(单纯糖尿病组,n=50)、单纯急性心肌梗死患者(单纯急性心肌梗死组,n=70)为对照。比较各组血清中GPBB及Lp-PLA2浓度的差异并分析急性心肌梗死伴糖尿病患者血清中GPBB及Lp-PLA2浓度与心功能的关系。结果与对照组比较,单纯糖尿病组、单纯急性心肌梗死组及急性心肌梗死伴糖尿病组患者血清中GPBB和Lp-PLA2浓度明显升高,差异均有统计学意义(P0.05),且急性心肌梗死伴糖尿病组患者血清中GPBB和Lp-PLA2浓度最高。随着心功能分级的升高,患者血清GPBB及Lp-PLA2浓度逐步升高,差异有统计学意义(P0.05)。血清GPBB及Lp-PLA2浓度与心功能分级呈明显的正相关(r=0.458、0.449,P0.05)。发生心血管事件患者的血清GPBB及Lp-PLA2浓度明显高于未发生心血管事件患者,差异有统计学意义(P0.05)。结论急性心肌梗死伴糖尿病患者血清中GPBB及Lp-PLA2浓度与心功能呈明显的正相关性。     

H-FABP与GPBB早期诊断AMI的价值研究

目的:探讨H-FABP(心肌型脂肪酸结合蛋白)与GPBB(糖原磷酸化酶同工酶)在临床早期诊断急性心肌梗死(AMI)的应用指标及实用价值.方法:选取48例正常人与42例急性心肌梗死病人采用用双抗体夹心ELISA法对急性胸痛的病人在0～1h、1～3h、3～6h内快速检测H- FABP与GPBB.结果:本实验研究结果表明H-...