健脾化湿解毒方对急性肝损伤小鼠肠屏障功能的影响

目的:探讨健脾解毒凉血方治疗肝损伤肠屏障功能障碍的作用靶点。方法:选取C57BL/6雄性小鼠32只,随机分为正常组、模型组、中药组、培菲康组,腹腔注射硫代乙酰胺100 mg/kg造模;中药组予以健脾解毒凉血方灌胃,培菲康组给予培菲康溶液灌胃;16 h后采集小鼠血清、肝组织、小肠组织,观察小鼠肝功能、肠道组织HE染色变化,免疫组织化学染色方法观察小肠闭锁小带蛋白-1表达。结果:模型组、中药组、培菲康组小鼠的ALT、AST均显著高于正常组,模型组、中药组、培菲康组比较差异无统计学意义(P0.05)。小肠组织在光镜和电镜下均可观察到中药组病变轻于模型组和培菲康组,免疫组织化学染色在小肠上皮细胞上可见闭锁小带蛋白-1棕黄色阳性标记,模型组、中药组、培菲康组阳性标记均显著少于正常组,中药组阳性标记显著多于模型组(P0.05)。结论:健脾解毒凉血方治疗硫代乙酰胺诱导急性肝损伤小鼠,可维护肠上皮细胞紧密连接部闭锁小带蛋白-1表达,修复肠屏障功能。     

甘草总黄酮抑制硫代乙酰胺诱导肝纤维化大鼠肝组织中TGF-β1及Caspase-3的表达

目的:研究甘草总黄酮(LF)对硫代乙酰胺(TAA)诱导慢性大鼠肝纤维化的抑制作用及对肝脏中转化生长因子-β₁(TGF-β₁)和半胱天冬酶-3(Caspase-3)蛋白表达的影响。 方法:SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、LF组(400,200,100,50 mg·kg^-1·d^-1)及水飞蓟素(silymarin,30 mg·kg^-1·d^-1)阳性药物组共7组。除正常对照组外,其余各组均按150 mg·kg^-1剂量给予腹腔注3% TAA,每周2次,连续12周诱导大鼠慢性肝纤维化模型。期间正常对照组、模型组灌胃给予1 mL·kg^-1·d^-1的生理盐水。造模及药物干预后,HE,Masson染色法观察肝组织病理变化及肝纤维化的形成程度;采用生化法检测血清中ALT,AST,ALP及肝组织中羟脯氨酸(HYP)的含量;采用放免法测定血清透明质酸(HA)的含量;采用免疫组织化学法测定肝组织中TGF-β₁和Caspase-3的蛋白表达,qRT-PCR方法检测肝组织中TGF-β₁的mRNA表达。 结果 :与模型组相比较,甘草总黄酮能够保护肝组织结构的完整,并能明显减轻肝细胞变性坏死和纤维组织增生程度;甘草总黄酮能够显著降低血清中AST,ALT和ALP的水平;降低血清HA水平的同时降低肝组织中HYP的含量;甘草总黄酮能够剂量依赖性的下调肝组织中TGF-β₁,Caspase-3蛋白的表达同时,下调肝组织中TGF-β₁的mRNA的表达。 结论:甘草总黄酮具有抗硫代乙酰胺诱导大鼠慢性肝纤维化的作用;其作用机制可能与下调TGF-β₁和Caspase-3的蛋白表达有关。     

6，7-二乙酰黄芩素对大鼠急性肝性脑病的防治作用及机制研究

目的 研究6,7-二乙酰黄芩素对硫代乙酰胺致大鼠急性肝性脑病模型的防治作用及机制。方法 Wistar雄性大鼠60只,随机分为对照组、模型组、乳果糖（阳性药,6 g/kg）组和6,7-二乙酰黄芩素低、中、高剂量（6.25、12.50、25.00 mg/kg）组,每天ig给药1次,连续给药7 d。第5天给药结束后,除对照组外,采用硫代乙酰胺（300 mg/kg）连续ip 2 d建立大鼠肝性脑病模型。观察大鼠状态,考察大鼠肝性脑病评分与死亡率;测定各组大鼠血氨、结肠pH值、血清天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）、总胆红素（TBIL）水平;采用苏木素-伊红（HE）染色法观察大鼠肝组织病理学变化;采用ELISA试剂盒法检测大鼠脑组织中γ-氨基丁酸（GABA）、谷氨酸（Glu）、血浆中的5-羟色胺（5-HT）、去甲肾上腺素（NE）的含量;采用Western Blotting试验测定脑组织中GABA-α₁蛋白的表达。结果 造模48 h后,与模型组比较,6,7-二乙酰黄芩素高剂量组大鼠体质量显著升高（P<0.05）,肝性脑病评分显著降低（P<0.05）;各剂量组死亡率均降低;中、高剂量组血清ALT、AST、ALP和TBIL水平均显著降低（P<0.05）;低、中、高剂量组血氨水平显著降低（P<0.05、0.01）;中、高剂量组结肠pH显著降低（P<0.05、0.01）;中、高剂量组大鼠肝脏组织病理学损伤明显改善;各剂量组脑组织中GABA水平显著降低（P<0.01）;中、高剂量组血浆中5-HT水平显著降低（P<0.01）;高剂量组血浆中NE水平显著降低（P<0.01）;高剂量组脑组织中Glu含量显著增加（P<0.01）;高剂量脑组织中GABA-α₁蛋白表达显著降低（P<0.05）。结论 6,7-二乙酰黄芩素对肝脏具有保护作用,对急性肝性脑病具有防治作用,其机制可能与降低血氨、降低结肠pH、调节神经递质水平、抑制相关神经递质受体的表达有关。     

替米沙坦对硫代乙酰胺诱导的大鼠急性肝损伤的保护作用

目的 观察替米沙坦对硫代乙酰胺(TAA)诱导的大鼠急性肝损伤的作用,并探讨其作用机制.方法 采用连续腹腔注射TAA复制大鼠急性肝损伤模型.SD大鼠120只,随机分为正常对照(N)组,急性肝损伤模型(M)组,异甘草酸镁阳性对照(C)组,和低、中、高3个剂量替米沙坦干预(T1、T2、T3)组,每组20只.生化法检测血清谷丙...     

解毒口服液对大鼠实验性肝损伤内毒素血症的防护作用

目的:探讨中医药对肝损伤大鼠内毒素血症的防治作用。方法:应用硫代乙酰胺灌胃建立暴发性肝衰竭大鼠模型,观察解毒口服液对实验性肝损伤大鼠血浆内毒素、肝功能及肝组织病理学指标的影响。结果:解毒口服液组在降低血浆内毒素、缩短凝血酶原时间、改善肝脏病理损伤程度方面,与损伤组比较均有非常显著的差异(P<0.01);解毒护肝口服液组次之(P<0.05)。在改善肝功酶系指标方面,解毒口服液与损伤组比较亦有显著差异(P<0.05),略差于解毒护肝口服液组。结论:解毒口服液有较好改善肝脏功能、防治内毒素血症的功效。     

丹参注射液对肝性脑病的的防治作用及机制研究

目的：探讨丹参注射液对肝性脑病（hepatic encephalopathy,HE）的防治作用及其作用的初步机制。方法：通过急性氨中毒动物模型和四氯化碳（CCl4）致肝损伤合并硫代乙酰胺（TAA）诱导髙血氨的大鼠肝性脑病模型,对氨中毒死亡时相、血氨、脑氨水平、肝脏功能以及肝脏病理组织学改变等指标进行了评价。结果：在急性氨中毒实验中,丹参注射液能使急性氨中毒小鼠存活时间明显延长;在CCL4和TAA诱导的肝性脑病大鼠模型中,丹参注射液能明显降低肝性脑病大鼠血氨和脑氨水平,并可在一定程度上降低肝性脑病大鼠血清ALT、AST、ALP、总胆红素（Tbil）含量,改善肝功能,从而防治肝性脑病。结论：丹参注射液对肝性脑病有较好的防治作用,可能与降低血氨和脑氨水平有关。     

硫代乙酰胺诱导的A型肝性脑病小鼠焦虑样反应观察

目的探讨硫代乙酰胺(TAA)诱导的A型肝性脑病小鼠的精神障碍。方法 30只雄性昆明种小鼠随机分为实验组15只,对照组15只。实验组采用TAA 200 mg·kg-1·d-1,连续腹腔注射3 d至累积计量到600 mg/kg,正常对照组腹腔注射生理盐水,造模24 h后进行脑功能评分、明暗箱、旷场及高架十字实验。行为学检测结束后24 h行血氨及肝脏生化指标检测。两组间比较采用独立样本t检验。结果实验组小鼠在明暗箱实验中的明箱滞留时间(t=-4.006,P0.01)与穿梭次数(t=-2.656,P0.05);旷场实验的中央活动路程(t=-3.639,P0.05)、中央活动时间(t=-2.294,P0.05)、垂直运动次数(t=-2.282,P0.05)、理毛时间(t=5.992,P0.01);高架十字实验的开臂进入次数(t=-3.584,P0.05)、开臂滞留时间(t=-3.992,P0.05)与对照组小鼠相比,差异均具有统计学意义。但旷场实验中两组小鼠活动总路程差异无统计学意义(t=-0.96,P0.05)。且实验组小鼠血氨(t=-3.168,P0.05)、ALT(t=4.316,P0.05)、AST(t=-2.581,P0.05)、TBil(t=-9.127,P0.01)水平明显大于对照组,差异均有统计学意义。结论用TAA腹腔注射建立的A型肝性脑病小鼠模型有焦虑样反应;小剂量TAA诱导A型肝性脑病小鼠的焦虑样反应不伴有自发活动能力下降。     

应用整合素α_vβ_3-靶向放射性示踪剂行小动物SPECT/CT研究大鼠模型肝纤维化的进展和恢复

正摘要目的为了评价整合素α_vβ_3-靶向放射性示踪剂的潜在实用性,利用~(99)Tc~m-PEG4-E[PEG4-环(精氨酸—甘氨酸—天冬氨酸-(右旋)苯丙氨酸-赖氨酸)]2(~(99)Tc~m-3PRGD2),单光子发射体层摄影(SPECT)/CT监测大鼠模型肝纤维化的进展和预后。材料与方法所有动物实验相关操作方法均得     

水飞蓟宾对硫代乙酰胺诱导的肝纤维化大鼠TGF-β1/Smad3信号通路的调节作用

目的 探讨水飞蓟宾对硫代乙酰胺(TAA)诱导的肝纤维化大鼠肝组织的保护作用及对TGF-β1/Smad3信号通路的调节作用。方法45只大鼠按照随机数字表法分为对照组、模型组及水飞蓟宾组,每组15只。除对照组外,其余大鼠使用硫代乙酰胺建立肝纤维化大鼠模型,水飞蓟宾组大鼠按照756 mg/kg的剂量给予水飞蓟宾灌胃,对照组及模型组大鼠给予等量生理盐水灌胃,1次/d,给药6周。全自动生化分析仪检测大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)水平,酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)及Ⅳ型胶原蛋白(ColⅣ)水平,苏木精 伊红（HE）染色法检测各组大鼠肝组织病理学变化,免疫印迹(Western blot)检测大鼠肝组织TGF-β1、Smad3水平。结果 与对照组比较,模型组肝纤维化大鼠血清ALT、AST、ALP、GGT、HA、LN、PCⅢ、ColⅣ水平及肝组织TGF-β1、Smad3水平显著升高(均P＜0.05),肝组织发生明显病理学变化;与模型组比较,水飞蓟宾组大鼠血清ALT、AST、ALP、GGT、HA、LN、PCⅢ、ColⅣ水平及肝组织TGF-β1、Smad3水平显著降低(P＜0.05),肝组织病理学明显改善。结论 水飞蓟宾能够明显改善硫代乙酰胺诱导的肝纤维化大鼠肝功能,抑制肝纤维化因子水平,改善大鼠肝组织病理学进展,其机制可能与调节TGF-β1/Smad3信号通路有关。     

肝纤维化动物实验超声造影评估

目的 评估灰阶超声造影在兔肝纤维化模型的诊断价值.方法 硫代乙酰胺诱导兔肝纤维化模型,自身前后对照,分成S0组(正常对照组)、S1～S3组到S4组(肝硬化组).评估参数包括肝动脉(HA),门静脉(PV),肝实质(LP)和肝静脉(HV)开始显影时间(AT),并观察肝实质的灌注均匀性.结果 HAAT、PVAT、LPAT、HVAT随纤维化程度增加,基本呈递减趋势;HAAT S4组和S1组间差异有显著性意义(P<0.05);PVAT S4组与其他组间差异均有显著性意义(P<0.05);LPAT S4组与其他组间具有非常显著性意义(P<0.01);HVAT各组间比较均具有非常显著性意义(P<0.01);并且,与其他各组相比,S4组肝实质灌注不均差异非常显著(P<0.01).结论 灰阶超声造影有望成为无创伤性诊断肝纤维化的新指标.