基于苗药五藤膏外敷对CIA大鼠炎性骨破坏的影响探讨苗医外治就近驱邪的作用＊

目的 通过研究明确苗药五藤膏外敷缓解胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠关节局部炎症和骨破坏的机制，证实苗医外治就近驱邪的作用。方法 将70只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、苗药五藤膏高、中、低剂量组、扶他林组及IL-17阻断组，每组10只。除空白组外，其余6组均构建CIA模型，并给予相应的外敷治疗。观察大鼠一般情况，HE染色进行病理学分析，TRAP染色检测OC生成，ELISA检测各炎症因子的含量，RT-PCR和WB分别检测RANKL的基因及蛋白表达。结果 苗药五藤膏能改善CIA大鼠破骨细胞浸润及关节病理性结构，并降低RANKL蛋白、基因表达以及TNF-α、IL-1、IL-6、IL-17含量。结论 苗药五藤膏外敷剂对CIA大鼠的治疗机制可能与降低致炎因子的分泌，抑制RANKL及OC的表达相关。     

金刚藤片联合头孢西丁钠注射液对盆腔炎性疾病后遗症子宫血流动力学指标、氧化应激水平的影响

目的探讨金刚藤片联合头孢西丁钠注射液治疗盆腔炎性疾病后遗症的临床效果,观察其对子宫血流动力学指标、氧化应激水平的影响。方法选取2017年3月至2018年9月无锡市惠山区第二人民医院诊治的140例盆腔炎性疾病后遗症患者作为研究对象。按照随机数字表法分为对照组和观察组,每组各70例。对照组患者给予头孢西丁钠注射液静脉滴注,观察组患者则加用金刚藤片治疗,连续治疗4周。通过盆腔积液量、妇科检查评分变化评价其临床效果,观察症状的恢复时间,测定子宫血流动力学指标、氧化应激指标变化,评价用药安全性。结果观察组患者、对照组患者的有效率分别为91.43%(64/70)、78.57%(55/70),观察组疗效更好,差异具有统计学意义(P0.05);治疗后,两组患者的盆腔积液量较治疗前明显减少,妇科检查评分明显下降,差异具有统计学意义(P0.05);组间比较,以观察组患者的盆腔积液量更少,妇科检查评分更低,差异具有统计学意义(P0.05);观察组患者治疗后的白带、下腹痛、体温恢复正常的时间较对照组明显缩短,差异具有统计学意义(P0.05);子宫血流动力学指标改善明显,其RI、PI均较对照组明显降低,PSV水平明显升高,差异具有统计学意义(P0.05);氧化应激指标改善明显,其血清中SOD、T-Aoc水平较对照组明显升高,MAD水平明显降低,差异具有统计学意义(P0.05);对照组服药后不良反应率18.57%高于观察组的4.29%,差异具有统计学意义(P0.05)。结论金刚藤片联合头孢西丁钠注射液利于促进盆腔炎性疾病后遗症患者临床症状的消退,改善子宫血流动力,减轻氧化应激反应程度,用药安全性高,值得临床推广运用。     

壮药盒果藤化学成分及药理作用研究进展

归纳和整理盒果藤的相关化学成分及药理作用,以期对盒果藤临床应用与质量标准研究提供参考;盒果藤主要化学成分包括甾醇类、糖苷类、萜类、黄酮类、酚酸类、挥发油类等;盒果藤具有抗炎、镇痛、抗溃疡、抗癌、抗肾毒性、抗肝毒性、抗腹泻、抗菌活性、抗糖尿病、抗氧化等药理作用。     

不同产地当归藤HPLC指纹图谱

目的建立不同产地当归藤HPLC指纹图谱。方法当归藤85%甲醇提取物的分析采用Phenomenex C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈⁃0.1%磷酸水,梯度洗脱;体积流量0.8 mL/min;柱温30℃;检测波长225 nm。对结果进行聚类分析和主成分分析。结果12批样品指纹图谱中有12个共有峰,相似度均大于0.940,并指认了没食子酸,儿茶素;聚类分析将12批样品分为2类。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于当归藤药材的质量控制。     

断藤益母汤对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞MEKK2及CIA小鼠关节炎的影响

目的:为了研究断藤益母汤(DTYMD)在类风湿关节炎中对丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)上游激酶的调控作用,阐明DTYMD抗炎的分子机制。方法:培养成纤维样滑膜细胞,将细胞分为空白组,模型组,DTYMD高、中、低质量浓度组(1 000,800,600 mg·l~(-1)),甲氨蝶呤(MTX)组(20μmol·l~(-1))组,采用蛋白免疫印迹法(Western blot),实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)对丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶2(MEKK2)的蛋白和mRNA表达进行分析。将42只雄性DBA/1J小鼠随机分为6组,每组7只,分别为正常组,模型组,MTX组(2 mg·kg~(-1)),DTYMD低、中、高剂量组(6. 25,12. 5,25 mg·kg~(-1))。除正常组外,其他5组均采用二次免疫法构建胶原诱导型关节炎(CIA)模型。给药结束后,取小鼠后肢踝关节行苏木素-伊红(HE)染色并进行关节病理评分。结果:与模型组比较,DTYMD以浓度依赖方式抑制成纤维样滑膜细胞活性(P 0. 01);与空白组比较,模型组细胞增殖率升高(P 0. 01)。与模型组比较,DTYMD高、中质量浓度组降低MEKK2蛋白及mRNA的表达(P 0. 05,P 0. 01)。与模型组比较,DTYMD不同剂量组均降低细胞基质金属蛋白酶-1(MMP-1),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6)的表达(P 0. 01);与空白组比较,模型组MMP-1,IL-6,TNF-α表达明显上升(P 0. 05,P 0. 01)。在动物实验中,与模型组比较,DTYMD高、中剂量组可以降低CIA小鼠关节肿胀度(P 0. 05,P 0. 01);与正常组比较,模型组小鼠二次免疫后关节明显肿胀(P 0. 05)。在CIA小鼠踝关节HE染色中,与空白组比较,模型组小鼠病理学评分升高(P 0. 01);与模型组比较,DTYMD高、中剂量小鼠关节病理评分明显下降(P 0. 05,P 0. 01)。结论:DTYMD可能通过下调MEKK2对细胞因子IL-6,TNF-α,MMP-1负性调控,从而缓解类风湿关节炎的炎症反应。     

藤药通络汤联合盐酸坦洛新缓释片治疗气滞血瘀型慢性前列腺炎的效果

目的:探讨藤药通络汤联合盐酸坦洛新缓释片治疗气滞血瘀型慢性前列腺炎的效果。方法:选择2017年2月-2019年1月收治的90例气滞血瘀型慢性前列腺炎患者,随机分为对照组及观察组,各45例。对照组接受盐酸坦洛新缓释片治疗,观察组在对照组基础上加用藤药通络汤治疗,对两组治疗结果进行比较。结果:观察组治疗总有效率为95.56%(43/45),明显较对照组的82.22%(37/45)高(P<0.05)。两组治疗前的中医证候积分无明显差异(P>0.05);治疗后,观察组中医证候积分明显低于对照组(P<0.05)。两组治疗前的VAS评分无明显差异(P>0.05);观察组治疗后VAS评分明显低于对照组(P<0.05)。结论:藤药通络汤联合盐酸坦洛新缓释片治疗气滞血瘀型慢性前列腺炎效果满意,可有效改善症状,减轻疼痛程度,值得推广。     

大鼠骨髓间充质干细胞培养鉴定及复方扶芳藤合剂含药血清对细胞增殖的影响

目的:建立SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的分离培养方法,观察不同浓度的复方扶芳藤合剂大鼠含药血清对大鼠BMSCs增殖的影响。方法:通过全骨髓贴壁法体外分离、培养、纯化BMSCs,对其进行细胞形态学观察,将BMSCs进行成骨、成脂定向诱导分化,采用流式细胞仪检测其表面标志物,分析其细胞周期,进行BMSCs鉴定;采用不同浓度(20%、10%和5%)的复方扶芳藤合剂含药血清和空白血清连续7 d对大鼠BM SCs进行干预,以CCK-8法检测其吸光度值,对比各组细胞生长情况。结果:BMSCs具有典型的成纤维样细胞形态,集落生长呈漩涡状。BMSCs成脂、成骨诱导后,油红O染色和茜素红染色均呈阳性。第3代BMSCs表型CD29、CD44、CD34、CD44表达分别为99.645%、99.677%、0.016%、0.133%;不同浓度的复方扶芳藤合剂含药血清和空白血清连续干预7 d后,CCK-8法检测显示:20%浓度的复方扶芳藤合剂含药血清组,其1~7 d的吸光度均值均高于20%浓度的空白血清组(P<0.05);10%的含药血清组的吸光度均值在3~7 d,高于10%的空白血清组(P<0.05);5%的含药血清组与5%的空白血清组比较无明显差异(P>0.05)。结论:全骨髓贴壁法分离、培养BM SCs,操作简单,方法稳定,可大量扩增BMSCs。扩增后的BMSCs具有间充质干细胞的生物学特性,具有多向分化潜能。复方扶芳藤合剂含药血清干预后的BMSCs增殖能力增强,其中20%浓度的复方扶芳藤合剂含药血清在本实验中为最佳干预浓度。     

赵刚运用玉肾露联合藤类药治疗肾性蛋白尿经验

介绍赵刚教授运用玉肾露联合藤类药治疗肾性蛋白尿的经验。赵教授认为,肾性蛋白尿是由脾失运化与肾失封藏,人体的水谷精微外泄所致,乃本虚标实之证。临证通过辨病辨证论治,采用补肾健脾治其本,祛风除湿、通络化瘀治其标,标本兼治,以玉肾露联合藤类药治疗,获效颇佳。     

扁塑藤素调控Notch信号通路诱导人肺癌条件重编程细胞死亡的作用机制研究

目的：应用条件性重编程细胞（conditionally reprogrammed cells，CRCs）技术建立人肺癌细胞体外长期培养体系，研究扁塑藤素对人肺癌CRCs增殖和迁移能力的影响，并探讨相关作用机制。方法：免疫组化法检测Notch 1、HES1和Cyclin D3在肿瘤组织和癌旁组织中的表达水平；使用CRCs技术分离培养非小细胞肺癌原代细胞；使用2，4，8，16 μmol·L^-1的扁塑藤素处理人肺癌CRCs，MTS法检测细胞活力，Annexin V/PI流式细胞术检测细胞凋亡，Transwell法检测细胞迁移能力，Western Blot检测细胞中Notch信号通路相关蛋白Notch 1、HES1和Cyclin D3的表达水平。结果：在非小细胞肺癌患者肿瘤组织中Notch 1、HES1和Cyclin D3的表达水平高于癌旁组织；扁塑藤素能够诱导人肺癌CRCs死亡，并在一定范围内呈现时间和浓度依赖性（P<0.05）；随着扁塑藤素作用浓度的增高，人肺癌CRCs凋亡率明显增高（P<0.05），细胞迁移能力下降（P<0.05）；扁塑藤素能够下调人肺癌CRCs中Notch 1、HES1和Cyclin D3的蛋白表达水平。结论：扁塑藤素可能通过调控Notch信号通路相关蛋白的表达水平，抑制人肺癌CRCs的增殖和迁移，并诱导其凋亡，为肺癌的治疗提供新的实验数据和理论依据。     

基于网络药理学的消瘤藤总香豆素抗肿瘤潜在机制探讨

目的:基于网络药理学预测和体外细胞模型验证的方法,探讨消瘤藤总香豆素的潜在抗肿瘤作用机制。方法:基于网络药理学预测得到消瘤藤总香豆素抗肿瘤作用的可能靶点和通路,以人结肠癌细胞HT-29为研究对象,吖啶橙染色观察细胞的形态变化,流式细胞术检测消瘤藤总香豆素对细胞凋亡的影响,Western blot检测相关凋亡蛋白P53和Caspase9的表达。结果:预测消瘤藤总香豆素抗肿瘤相关通路36条,主要通过诱导细胞凋亡、抑制细胞增殖和转移、调控细胞周期、影响细胞代谢及免疫调节等多途径、多表型干预的网络模式发挥抗肿瘤作用。细胞模型验证结果:与空白对照组比较,消瘤藤总香豆素100μg/ml组细胞出现典型的凋亡形态特征、细胞凋亡率显著升高、细胞中P53和Caspase9蛋白表达量显著上调。结论:消瘤藤总香豆素具有抗肿瘤作用,可经P53途径上调Caspase9促进人结肠癌HT-29细胞凋亡。