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1.
2.
目的:建立检测人血浆中尼美舒利浓度的方法,组织室间质量评价,评价药代动力学实验室的检测能力,探讨该领域室间质量评价的流程及结果评价的方法。方法:采用HPLC-MS/MS法,使用Xbridge C18色谱柱(2.1 mm×50 mm, 3.5μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液,梯度洗脱,流速0.45 mL·min-1,柱温40℃,在电喷雾离子源(ESI),负离子模式下,多反应监测扫描(MRM),尼美舒利和内标氢氯噻嗪监测离子对分别为m/z 307.1→229.0和m/z 296.0→204.7。制备质量评价样品,根据中国合格评定国家认可委员评价指南及相关指导原则进行质量评价样品均匀性和稳定性评价,并对参加实验室回报结果进行统计分析。结果:建立的人血浆尼美舒利测定方法满足药物浓度测定要求,均匀性和稳定性评价结果满足质量评价样品发放和检测要求,本研究共有18家实验室参加,结果回报率为100%,满意率为83.3%。结论:本次室间质量评价工作对18家实验室回报结果进行评价及系统的影响因素分析,为生物样本检测实验室发现自身检测存在问题,实验室能力的监...  相似文献   
3.
目的:评估基于分离胶的两种前处理方法联合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix?assisted laser desorption ionization?time of flight mass spectrometry,MALDI?TOF MS)直接鉴定血培养阳性病原菌的临床应用价值。方法:收集2020年5—11月南京医科大学第一附属医院血培养阳性标本302例,分离胶?皂甙法和分离胶沉淀法分别处理后对阳性血培养标本进行快速鉴定,结果分别与培养鉴定结果比较。结果:分离胶?皂甙法可在45 min内完成鉴定,分离胶沉淀法需20 min;单数菌感染标本288例,使用两方法直接鉴定的准确率均为86.81%(250/288),其中两方法分别鉴定革兰阴性杆菌、革兰阳性球菌、革兰阳性杆菌、真菌的准确率差异无统计学意义(P > 0.05);复数菌感染标本14例,仅分离胶?皂甙法1例与培养鉴定结果一致,其余标本两种方法均仅可准确鉴定其中的一种细菌。结论:两种基于分离胶的前处理方法联合质谱均可直接、快速、准确地鉴定血培养病原菌,分离胶沉淀法可作为本实验室血培养快速鉴定常规的前处理方法。  相似文献   
4.
目的 研究壳三糖在大鼠体内的组织分布及排泄。方法 建立并验证了大鼠组织、尿液和粪便中壳三糖的高效液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)检测方法。大鼠灌胃给药壳三糖35 mg/kg后,分别在0.5、1.5、3 h 摘取组织,0 h - 4 h、4 h - 8 h、8 h - 12 h、12 h - 24 h 、24 h - 36 h、36 – 48 h时间段收集尿液和粪便。用建立的LC-MS/MS方法测定组织、尿液和粪便中的壳三糖含量。结果 组织、尿液和粪便中壳三糖在10 - 10000 ng/mL的浓度范围内线性良好,日内、日间精密度的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD )≤14.20%,准确度的相对误差(relative error,RE)为?11.30%~8.33%,提取回收率为85.2% - 97.9%,没有明显的基质效应,在室温放置24 h、反复冻融以及-40℃放置30天的条件下稳定性良好,满足生物样品的检测需求。灌胃给药后,0.5 h就可以在主要组织检测到壳三糖,1.5 h肾脏中壳三糖含量明显升高,3 h未在大脑中检测到壳三糖。48 h后壳三糖在尿液、粪便中的排泄率分别为7.15%、72.80%。结论 壳三糖主要以原型的形式在大鼠体内分布和排泄,壳三糖在大鼠各组织中的分布较为广泛,以肝和肾为主,粪便是壳三糖的主要排泄途径。  相似文献   
5.
6.
目的:建立青霉胺片的有关物质检测方法,并分析国产青霉胺片的有关物质质量及存在的问题。方法:建立HPLC-ELSD法检测31批次青霉胺片和6批次青霉胺原料的有关物质,色谱柱为GRACE Apollo C18(250 mm×4.6 mm, 5μm),流速0.6 mL·min-1,柱温25℃,进样量20μL。采用二维色谱柱切换HPLC-MS~n法推测6个杂质的化学结构并分析其来源,并采用ADMET Predictor软件对这6个杂质进行毒性预测。结果:青霉胺片的有关物质个数和含量均远高于原料。推测的6个杂质中,青霉胺二硫化物为已知杂质,其余5个为未知杂质,所有杂质均为降解杂质。ADMET Predictor软件毒性预测结果显示4个杂质的毒性均较青霉胺大,2个杂质的毒性与青霉胺相当。结论:建立的HPLC-ELSD法可有效检测青霉胺片的有关物质。制剂中的杂质主要来源于制剂的生产过程。青霉胺片有关物质的风险比较大,根据各杂质的毒性预测结果,建议制剂生产企业应高度重视制剂生产的各个环节。  相似文献   
7.
铁死亡是一种在形态学、生物化学、基因学等方面均不同于细胞凋亡、坏死、焦亡和自噬等传统细胞死亡途径的新型细胞死亡类型,其主要特征为铁累积和脂质过氧化,铁死亡的调控机制涉及铁代谢、谷胱甘肽代谢和脂质过氧化反应等方面,并与肿瘤、衰老、神经退行性疾病、缺血再灌注损伤、心脑血管疾病、肾脏损伤、肝纤维化等疾病的病理过程密切相关。如何有效研究铁死亡调控机制治疗疾病已成为铁死亡研究领域的热点。近年来,随着对铁死亡研究的深入,铁死亡的识别、确认及机制等方面的研究进展显著,用于检测铁死亡的方法不断发展且日趋成熟,形态学、生物化学、分子生物学、基因学等方面的技术已广泛应用于铁死亡的检测与研究。为进一步加深读者对铁死亡及其检测方法的认识,本文主要综述了目前常规使用的铁死亡检测方法及其应用,并对其在铁死亡检测中的优缺点进行总结和讨论。这些方法将有助于更好地理解和研究铁死亡的诱导和调控过程及其在治疗疾病中的作用。  相似文献   
8.
目的:建立采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定人胰岛素及其类似物全序列的方法。方法:该方法以人胰岛素为主要研究对象,首先对其进行还原烷基化前处理,后进行UPLC-MS/MS分析。采用ACQUITY UPLC peptide BEH C18(100 mm×2.1 mm, 1.7μm, 300?)色谱柱,流动相A为0.1%甲酸/水溶液,流动相B为0.1%甲酸/乙腈溶液,梯度洗脱(0~10 min, 3%B→60%B;10~10.5 min, 60%B→95%B;10.5~14 min, 95%B;14~14.5 min, 95%B→3%B;14.5~20 min, 3%B),流速0.3 mL·min-1,柱温50℃;采用电喷雾离子源正离子(ESI~+)扫描,通过优化质谱参数,对人胰岛素及其类似物进行“top-town”全序列的测定分析,并对人胰岛素的序列测定方法进行了深入的研究,同时考察该方法对门冬胰岛素和赖脯胰岛素的适用性。结果:该方法能够较好地覆盖人胰岛素A和B链的全序列,通过b/y离子分析,5个高强度b/y离子的离子强...  相似文献   
9.
摘要:目的 通过对新硫肽类抗生素166A产生菌小单孢菌TMD166进行诱变选育研究,以期获得产166A的高产菌株。方 法 使用多功能等离子体诱变系统(multifunctional plasma mutagenesis system, MPMS)对出发菌株TMD166的孢子进行等离子体-紫 外(MPMS-UV)复合诱变,单孢子悬液经照射处理、涂布培养后获得单菌落,并以牛津杯固体发酵高通量筛选方法对菌株进行初 筛,之后对高产菌株进行摇瓶复筛,利用突变株摇瓶发酵的化学效价筛选出正突变菌株。结果 对比MPMS-UV不同诱变剂量发 现,MPMS105s-UV60s复合诱变剂量获得的正突变率最高,达到41.43%,相应致死率为99.88%。最终筛选出一株166A高产突 变株TMD166-MU1,在培养温度为28℃、210 r/min的条件下,经过96~120 h培养后,166A产量相比出发菌株提高了7.47倍。结 论 采用MPMS-UV复合诱变方式,再结合牛津杯固体发酵高通量筛选方法和摇瓶复筛,可高效筛选获得166A高产菌株。  相似文献   
10.
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