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1.
2.
目的 研究lncRNA CASC2过表达对结直肠癌细胞增殖、迁移、血管生成及Wnt/FZD/β-catenin信号通路的影响。方法 qRT-PCR检测lncRNA CASC2在正常结肠上皮细胞(NCM460)及结直肠癌细胞株(DLD-1、HT29、SW620、HCT116、RKO、LOVO、SW480)中的表达情况;HCT116和SW480细胞建立稳定转染的细胞株,分为对照组和lncRNA CASC2过表达组;qRT-PCR验证稳转株中lncRNA CASC2水平;CCK-8实验、Transwell实验、划痕实验分别检测细胞增殖水平、迁移能力;收集对照组和lncRNA CASC2过表达组细胞上清并提取外泌体,将对照组和lncRNA CASC2过表达组细胞的外泌体分别与HUVEC细胞共孵育,3D Matrigel法检测其对血管生成的影响;Western blot测定细胞中Wnt16、FZD7、β-catenin蛋白水平。结果 lncRNA CASC2在7株结直肠癌细胞株中的表达明显低于正常结肠上皮细胞NCM460细胞。与对照组相比,lncRNA CASC2过表达后明显抑制了HCT116和SW480细胞的增殖、迁移能力(P<0.01)。3D Matrigel法检测显示,来自SW480-CASC2组、HCT116-CASC2组细胞的外泌体显著抑制了HUVEC中管状细胞的形成(P<0.01)。Western blot结果显示,lncRNA CASC2过表达后Wnt16、FZD7、β-catenin蛋白水平降低(P<0.01)。结论 lncRNA CASC2在结直肠癌细胞中表达下调,lncRNA CASC2过表达可以抑制Wnt/FZD/β-catenin信号通路进而抑制结直肠癌细胞的增殖、迁移,并减少血管生成。 相似文献
3.
4.
目的观察加味补中益气汤联合戊酸雌二醇 /雌二醇环丙孕酮片治疗女性肾阴虚肝郁型更年期综合征的临床疗效及对病人血清促卵泡激素( FSH)、黄体生成激素( LH)表达的影响。方法按随机数字表法将 2019年 4月至 2021年 1月唐山市人民医院收治的 198例女性肾阴虚肝郁型更年期综合征病人分入观察组与对照组(各 99例)。对照组给予戊酸雌二醇 /雌二醇环丙孕酮片治疗,观察组在对照组治疗基础上联合加味补中益气汤治疗。比较两组病人临床疗效、中医证候评分,应用女性绝经期自测表( Kupperman改良评分)评估病人治疗前后临床症状改善情况,检测血清 FSH、LH水平及不良反应情况。结果治疗后,与对照组( 70.70%)相比,观察组总有效率( 90.90%)更高( P<0.05)。治疗后两组月经紊乱、潮热汗出、急躁易怒、阴道干涩、腰膝酸软、舌质暗红苔薄等各项中医证候评分均降低,且观察组低于对照组( P<0.05)。治疗后两组 Kupperman积分均降低,且观察组低于对照组( P<0.05);治疗后两组血清 FSH、LH水平降低,雌二醇(E2)水平升高,且观察组血清 FSH、LH水平低于对照组, E2水平高于对照组( P<0.05);与对照组( 13.13%)相比,观察组不良反应发生率( 4.04%)更低( P<0.05)。结论加味补中益气汤联合戊酸雌二醇 /雌二醇环丙孕酮片治疗女性肾阴虚肝郁型更年期综合征疗效显著,可降低中医证候评分,缓解病人病情严重程度,降低血清 FSH、LH水平,升高 E2水平,改善生殖内分泌系统功能,且不良反应少,安全可靠。 相似文献
5.
目的 探讨低强度脉冲超声(LIPUS)联合脂肪间充质干细胞(ADSCs)源性外泌体(ADSCs-Exos)对内皮细胞血管生成能力的影响。方法 取SD大鼠腹股沟处脂肪,采用酶消化法分离培养得ADSCs,并对ADSCs表面分子进行鉴定。收集第3代ADSCs上清液提取外泌体,通过透射电子显微镜(TEM)、纳米粒子跟踪分析(NTA)、蛋白免疫印迹技术(Western blot)鉴定。将人脐静脉内皮细胞(HUVECs)按照不同处理方式分为:对照组、外泌体组、LIPUS组及LIPUS+外泌体组,采用CCK-8实验、划痕实验及小管形成实验检测不同处理对HUVECs增殖、迁移及成管能力的影响。。结果 ADSCs-Exos为形态一致的茶托样囊泡,表达标志性蛋白CD9和Tsg101,所测样品直径97.8%集中在118.8±80.8nm,证明提取的样品直径符合外泌体大小。(此特征表现为什么?)。CCK-8实验显示LIPUS+外泌体组OD值为1.882±0.138,均明显高于外泌体组、LIPUS组及对照组(0.646±0.034、0.631±0.027、0.462±0.036),差异均有统计学意义(均P<0.05)。划痕实验显示LIPUS+外泌体组细胞迁移率为(87.7±4.5)%,均明显高于外泌体组(43.0±5.1)%、LIPUS组(34.7±2.3)%及对照组(25.1±2.0)%,差异均有统计学意义(均P<0.05)。小管形成实验 显示LIPUS+外泌体组HUVECs成管能力均高于其他组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 LIPUS联合ADSCs-Exos可有效促进血管内皮细胞的增殖、迁移及成管,增强血管生成能力。 相似文献
6.
早发性癫痫性脑病(EOEE)是新生儿期或婴儿早期出现的一种癫痫综合征,具有遗传异质性,表现为早发性、难治性和多种发作类型及全面发育迟滞或倒退等特征。文章回顾分析1例确诊GRIN2B基因变异致EOEE 27型患儿的临床资料。患儿为12月龄女童,生后第2天起病,表现为难治性癫痫、精神运动发育迟缓、肌张力低下。头颅磁共振示双侧额部蛛网膜下腔增宽;长程视频脑电图示醒-睡各期均有多灶性尖波、棘波发放,有与临床发作同期的脑部异常放电,提示睡眠期右侧额叶、中央区尖波、棘慢波发放。全外显子基因测序发现患儿GRIN2B基因存在新生杂合错义变异c.2635G>A(p.Glu879Lys)(NM_000834),父母及哥哥基因型为野生型,关联EOEE 27型,未见本位点变异相关文献报道。根据2015年美国医学遗传学与基因组学学会指南,判定为可能致病。患儿应用托吡酯、奥卡西平及康复功能训练治疗。随访患儿发育较正常同龄儿落后,无癫痫发作,脑电图未见异常放电。GRIN2B基因错义变异(NM_000834):c.2635G>A(p.Glu879Lys)是患儿的可能病因。 相似文献
7.
目的 观察结肠癌HCT116细胞健脾消癌方的条件培养液对HUVEC细胞管腔形成的影响,从PI3K/Akt生物轴调控角度探讨其作用机制。方法 培养HCT116细胞,细胞设3组:对照组,健脾消癌方组(加入15%健脾消癌方含药血清)及人参皂苷Rg3组;制备HCT116细胞健脾消癌方条件培养液(分组及制备方法见实验方法),用条件培养液干预HUVEC(脐静脉内皮细胞,Human Umbilical Vein Endothelial Cells),Matrigel基质胶法检测HCT116细胞健脾消癌方条件培养液对HUVEC小管形成的影响。随后采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组HCT116细胞磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、p-Akt、VEGF(血管内皮生长因子,Vascular endothelial growth factor)蛋白表达。最后在结肠癌HCT116荷瘤小鼠中验证健脾消癌方对肿瘤生长速度的影响,并经瘤组织VEGF蛋白表达、CD31免疫组化染色检测肿瘤内血管生成情况。结果 模型组HUVEC细胞管腔形成较空白血清组显著增加(P<0.05);健脾消癌方组及人参皂苷Rg3组较模型组HUVEC细胞管腔形成显著减少(P<0.01)。p-Akt和VEGF蛋白表达水平模型组高于空白血清组(P<0.05),健脾消癌方组及人参皂苷Rg3组显著低于模型组(P<0.01);PI3K、Akt蛋白表达量组间差异无统计学意义。与对照组比较,模型组荷瘤小鼠肿瘤体积显著性增大,瘤组织内VEGF表达、CD31阳性面积显著性增加,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,健脾消癌方组及人参皂苷Rg3组荷瘤小鼠肿瘤体积显著减小,瘤组织内VEGF表达、CD31阳性面积降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 健脾消癌方可抑制肿瘤的血管生成和生长,其作用机制可能与PI3K/Akt生物轴调控VEGF表达有关。 相似文献
8.
9.
目的 探讨超活化血小板裂解液(sPL)对类风湿关节炎患者成纤维细胞样滑膜细胞(RA-FLS)的影响。方法 选取哈尔滨医科大学附属第一医院2018年1月—2019年3月6例类风湿关节炎患者作为研究对象,其中男3例、女3例,年龄26~49岁、中位年龄33岁,受累关节功能分级均为Ⅱ级。收集患者静脉血标本,先进行两次离心分离获得富血小板血浆(PRP);再加入0.08 mmol/L CaCl2, 37 ℃孵育激活血小板;然后经过冷冻、融化、离心、过滤除菌、去除纤维蛋白原,获得sPL。培养RA-FLS,分为对照组和2.5%、5%、10% sPL组,分别与含有0、2.5%、5%、10% sPL的培养液培养48 h。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组细胞中炎症因子白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-1β的浓度;细胞计数试剂盒(CCK)-8法测定各组细胞增殖活性;流式细胞术测定各组细胞的凋亡率;体外小管生成实验检测各组细胞血管生成能力;Transwell实验检测各组细胞迁移能力和侵袭能力;Western blot法测定各组细胞增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP-9、血管内皮生长因子(VEGF)和VEGF受体-2 (VEGFR2)的表达情况。结果 (1)对照组、2.5%sPL组、5%sPL组、10%sPL组细胞培养基中IL-6浓度分别为(80.18±11.67)、(59.94±9.50)、(46.60±8.04)、(60.67±9.24)pg/mL,TNF-α浓度分别为(70.75±9.14)、(54.56±7.81)、(43.27±6.30)、(53.99±8.60)pg/mL,IL-1β浓度分别为(64.18±9.90)、(46.97±8.79)、(36.28±7.44)、(47.66±8.15)pg/mL,组间比较差异均有统计学意义(F=12.186、11.934、10.709,P值均<0.01);2.5%sPL组、5%sPL组、10% sPL组细胞中IL-6、TNF-α、IL-1β的表达水平均明显低于对照组,差异均有统计学意义(P值均<0.05);5% sPL组炎症因子表达水平低于2.5% sPL组和10% sPL组,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。(2)对照组、2.5%sPL组、5%sPL组、10%sPL组RA-FLS增殖率分别为87.33%±10.98%、76.17%±8.18%、60.83%±7.99%、75.83%±8.45%,细胞凋亡率分别为6.51%±1.16%、16.23%±2.75%、29.69%±3.80%、16.37%±2.29%,小管形成数分别为(41.00±7.55)、(26.67±4.16)、(11.67±3.51)、(26.00±6.56)个,迁移细胞数目分别为(443.00±54.06)、(282.33±31.66)、(154.64±23.18)、(292.00±35.03)个,侵袭细胞数目分别为(243.30±27.39)、(67.00±12.53)、(22.33±8.74)、(79.33±14.98)个,组间比较差异均有统计学意义(F=8.795、38.095、34.278、29.352、94.772, P值均<0.05);2.5%sPL组、5%sPL组、10% sPL组RA-FLS细胞增殖率、血管管腔形成数量、迁移细胞数目和侵袭细胞数目均低于对照组,细胞凋亡率均高于对照组,差异均有统计学意义(P值均<0.05);5% sPL组中细胞增殖率、小管形成数、迁移细胞数目和侵袭细胞数目均明显低于2.5% sPL组和10% sPL组,细胞凋亡率则高于2.5% sPL组和10% sPL组,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。(3)对照组、2.5%sPL组、5%sPL组、10%sPL组RA-FLS PCNA、CyclinD1、Bax、Bcl-2、MMP-2、MMP-9、VEGF和VEGFR2蛋白相对表达量比较,差异均有统计学意义(P值均<0.01);2.5%sPL组、5%sPL组、10% sPL组细胞中PCNA、CyclinD1、Bcl-2、MMP-2、MMP-9、VEGF和VEGFR2蛋白相对表达量均低于对照组,Bax蛋白相对表达量均高于对照组,差异均有统计学意义(P值均<0.05);5% sPL组PCNA、CyclinD1、Bcl-2、MMP-2、MMP-9、VEGF和VEGFR2蛋白相对表达量均低于2.5% sPL组和10% sPL组,而Bax蛋白相对表达量则高于2.5% sPL组和10% sPL组,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论 sPL对RA-FLS的增殖、迁移、侵袭、血管生成以及炎症因子的产生具有抑制作用,对RA-FLS凋亡具有促进作用,且SPL对RA-FLS的生长抑制效果与SPL浓度有关。 相似文献
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