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目的建立一种基于规律成簇的间隔短回文重复序列及其相关蛋白(CRISPR/Cas13a)的乙型肝炎病毒(HBV)共价闭合环状DNA(HBV cccDNA)检测方法。方法提取2017年6月至2020年10月于首都医科大学附属北京佑安医院就诊的4例乙型肝炎患者肝脏总DNA后,使用HindⅢ内切酶和质粒安全性ATP依赖DNA酶(PSAD)分别进行酶切;根据松弛环状DNA(rcDNA)和cccDNA的结构差异,设计特异性扩增HBV cccDNA的引物,对酶切后的产物进行滚环扩增(RCA)和PCR扩增;并筛选crRNA,建立基于CRISPR/Cas13a技术的HBV cccDNA检测新方法。结果利用α-1-抗胰蛋白酶(A1AT)和HBV表面抗原(HBsAg)引物对双重酶切后的产物进行扩增,验证产物中HBV基因组的存在;利用HBV cccDNA和HBV rcDNA引物对PSDA酶切后的产物扩增,验证了产物中只存在HBV cccDNA;利用RCA后的阳性样本作为模板梯度稀释,然后进行PCR扩增转录后使用CRISPR/Cas13a检测,计算出检测下限为10拷贝/μl。结论本研究建立了RCA-PCR-CRISPR-Cas13a的新型检测方法,可对HBV cccDNA进行高灵敏度和高特异性检测,为乙型肝炎患者抗病毒治疗评估、治疗终点的确定以及调整治疗方案提供了有效的监测手段。  相似文献   
5.
背景 致密性骨炎(OCI)和其他疾病有时难以鉴别,探讨血清骨转换生化标志物可为OCI的鉴别诊断提供依据。 目的 探索女性OCI患者的血清骨转换生化标志物的水平变化及临床意义。 方法 回顾性选取2013年6月至2022年2月在北京积水潭医院门诊及住院诊断为OCI的61例女性患者作为观察组,年龄15~50岁,平均(33.8±6.6)岁,病程2周~15年。选择同期61例女性体检健康者作为对照组,年龄15~48岁,平均(35.6±7.6)岁。比较两组一般临床资料和血清骨转换生化标志物水平,并对血清骨转换生化标志物与病情相关指标进行相关性分析。 结果 观察组血清白蛋白(45.4±2.9)g/L低于对照组(46.5±2.8)g/L(t=2.190,P<0.05)。血清骨转换生化标志物比较结果显示,观察组血清1型胶原羧基末端肽β特殊序列(β-CTX)〔0.28(0.23,0.37)μg/L〕、N-端骨钙素(OC)〔13.1(11.2,16.2)μg/L〕、25-羟维生素D3〔25-(OH)VD3〕〔(14.1±5.1)μg/L〕低于对照组〔0.36(0.29,0.48)μg/L,15.6(13.7,17.3)μg/L,(17.5±6.6)μg/L〕(Z=-2.983、-3.255,t=3.081,P<0.05)。长病程亚组OC水平〔14.6(12.4,18.5)μg/L〕高于短病程亚组〔11.7(10.2,14.0)μg/L〕(Z=-2.407,P<0.05)。多孕亚组β-CTX〔0.25(0.22,0.32)μg/L〕、OC水平〔12.2(10.3,15.0)μg/L〕低于非多孕亚组〔0.33(0.26,0.44)μg/L、13.4(12.0,18.8)μg/L〕(Z=-2.486、-1.897,P<0.05)。相关性分析显示,观察组血清1型前胶原氨基端延长肽(tP1NP)与妊娠次数、生产次数均呈负相关(rs=-0.276、-0.298,P<0.05),OC与体质指数(BMI)、视觉模拟评分法(VAS)评分、妊娠次数均呈负相关(rs=-0.284、-0.374、-0.360,P<0.05),25-(OH)VD3水平与BMI呈正相关(rs=0.275,P<0.05)。 结论 女性OCI患者血清OC、β-CTX水平明显降低,可为鉴别其他疾病提供依据;血清OC水平可以反映OCI患者的严重程度,同时OC水平与患者妊娠次数相关;tP1NP与妊娠次数、生产次数相关。  相似文献   
6.
目的探讨术前眼位注视训练对老年白内障超声乳化摘除术患者术中眼位及术后视力恢复的影响。方法选取2018年9月-2019年9月我院收治的105例老年白内障超声乳化摘除术患者为研究对象,按随机数字表法将其分为对照组52例和试验组53例。对照组给予常规围术期管理。观察组在对照组的基础上予以术前眼位注视训练。观察两组术中眼位情况,术后视力恢复情况及术后并发症发生率。结果试验组术中调整眼位次数>3次和眼球旋转偏移率均低于对照组(P<0.05);试验组术后视力恢复至0.5以上比例为60.38%,高于对照组的40.38%(P<0.05);试验组术后并发症发生率为15.09%,低于对照组的32.69%(P<0.05)。结论老年白内障超声乳化摘除术患者术前进行眼位注视训练,通过降低术中调整眼位次数和眼球旋转偏移率,降低术后并发症发生率,促进患者术后视力恢复。  相似文献   
7.
目的 探讨拉力螺钉结合抗滑钢板治疗单髁Hoffa骨折的临床疗效。方法 将采用拉力螺钉结合抗滑动钢板及单纯拉力螺钉固定治疗的Hoffa骨折患者34例,分为A、B两组,其中A组18例患者采用拉力螺钉结合抗滑动钢板固定治疗,B组16例采用单纯拉力螺钉固定治疗,比较2组患者术前一般资料、围手术期资料、术后膝关节KSS评分及膝关节活动度。结果 34例患者术后均获得12~30个月的随访,平均随访19.5个月,骨折均一期愈合,2组均无内固定物断裂及松动。术后第6、第12个月评估,其中A组优良16例,可2例,优良率89%; B组优良12例,可4例,优良率75%,A组术后膝关节活动度及KSS评分均优于B组(P <0.05)。结论 采用拉力螺钉和抗滑动钢板联合固定坚强可靠,术后膝关节活动度及膝关节KSS评分均优于单纯拉力螺钉内固定治疗。  相似文献   
8.
为方便读者阅读以及适应结构化排版的需求,参考GB/T 9938-2013《牙科学牙位和口腔区域的标示法》,本刊从2018年第1期开始对牙位使用如下标示法:用编码两位数字表示牙齿的具体牙位,编码的第1位数字表示牙位所在象限,并区分乳牙与恒牙;编码的第2位数字表示牙位本身。  相似文献   
9.
目的 探讨责任助产联合自由体位干预对初产妇产程时间及疼痛指数的影响,以便采取有效措施促进分娩顺利进行。方法 分娩的80例初产妇为研究对象,按照随机数字表法分为两组,每组40例。对照组采用产科常规护理及传统分娩体位,观察组采用责任助产联合自由体位干预模式。比较两组产程时间和疼痛指数。结果 观察组第一、第二、第三产程时间均短于对照组,第一、第二、第三产程的视觉模拟评分(VAS)均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 责任助产联合自由体位干预能有效缩短初产妇产程时间,减轻产程疼痛指数,临床应用效果显著。  相似文献   
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