核基质与染色质相关性研究进展

核基质(NM)与染色质关系密切，参与染色体构建和基因表达，染色质的重要结构端粒携带有大批NM结合位点，通过NM结合位点，NM与端粒相互作用影响细胞周期中端粒的行为。     

染色质免疫沉淀技术在人巨细胞病毒即刻早期蛋白研究中的应用

染色质免疫沉淀(ChIP)技术是目前研究体内DNA与蛋白质相互作用的最好方法,该技术不仅可以检测体内反式因子与DNA的动态作用,还可以用来研究组蛋白的各种共价修饰与基因表达的关系。在研究人巨细胞病毒及其他病毒的基因调控和病毒蛋白与宿主细胞DNA相互作用方面,该技术亦有很好的应用前景。利用该技术研究表明,人巨细胞病毒IE1-72和IE2-86蛋白对组蛋白乙酰化的影响可能是调控病毒转录的重要机制之一。     

衰老对DNA甲基化的影响

衰老的生化影响非常复杂,伴随着发生蛋白质、脂类和核酸的生物学明显改变,这些改变的一个重要方面就是DNA的甲基化,DNA甲基化是基因表达修饰的一种机制,基因调节元件内或附近序列的甲基化能通过DNA结合蛋白和染色质结构抑制基因的表达,依赖组织和基因伴随衰老发生甲基化的升高和降低,这些改变能产生病理效果包括恶性肿瘤发生,与衰老有关的自身免疫性疾病,以及其它可能的疾病.因此,虽然衰老会影响DNA甲基化,但DNA甲基化改变也会影响衰老.本篇综述概述伴随衰老一些特异基因甲基化状态改变的事实以及DNA甲基化型式改变的机制.因为这个领域仍然在发展中,可以预计这一领域的新知识会快速增长.     

针刺对小白鼠脑染色质非组蛋白质影响的实验研究

本研究以快速老化痴呆模型小白鼠（ＳＡＭ－Ｐ／１０）为材料,分离纯化了其脑染色质非组蛋白质（ＮＨＣＰ）,采用ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）,观察了釜刺地ＳＡＭ－Ｐ／１０脑染南非组蛋白质增龄性变化的影响,结果表明,针刺人中、内关穴可以拮抗ＳＡＭ－Ｐ／１０脑染色质非线蛋白中部分功能蛋白脑迁移率非组蛋白质随增龄再现的快速减少,而６月龄蛋白电泳谱带受调节能力,明显优于１２月龄。     

ChREBP及其靶基因在高脂大鼠非酒精性脂肪肝中的表达

目的探讨碳水化合物反应元件结合蛋白(ChREBP)及其靶基因A羟化酶(ACC)、脂肪酸合成酶(FAS)在高脂大鼠非酒精性脂肪肝(NAFLD)模型中的动态表达及作用。方法选取SD大鼠24只,随机分为高脂组和对照组。两组均于喂养第12周末处死。HE染色观察肝脏脂肪变性,逆转录酶链免疫反应(RT-PCR)和Western blot方法测定两组大鼠肝脏组织中ChREBP、ACC、FAS的mRNA表达和蛋白水平,染色质免疫共沉淀分析ChREBP与ACC、FAS基因启动子碳水化合物应答元件(ChRE)结合情况。结果成功构建高脂饮食大鼠NAFLD模型,血生化指标(ALT、AST、TC、TG)明显升高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);高脂组大鼠肝组织ChREBP mRNA、蛋白及ChRE DNA的表达水平降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);而ACC、FAS mRNA、蛋白的表达水平增高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论高脂饮食可抑制ChREBP的表达,在高脂饮食导致的NAFLD形成过程对ACC、FAS的表达起负性调控作用;ACC、FAS的表达通过其他调控途径升高而参与NAFLD的形成过程。     

过表达D5 Stat5a促进前列腺癌细胞增殖及IGFBP-7基因启动子组蛋白甲基化

目的 探讨D5 Stat5a对人类前列腺癌细胞增殖的影响及其对胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP-7)表达的影响。方法 常规培养人前列腺癌细胞(DU145及PC3),并随机分为四组:对照组及三个实验组。对照组以不含外源基因的腺病毒感染,三个实验组细胞则以携带D5 Stat5a c DNA的腺病毒感染,其病毒感染增殖活性(MOI)依次为10、20及30。四组细胞均在培养液中加入催乳素(50 ng/m L)以启动细胞信号转导。运用MTS方法检测细胞增殖;实时定量PCR检测抑癌基因IGFBP-7及EZH2 m RNA水平;染色质免疫共沉淀技术(Ch IP)检测IGFBP-7基因启动子区域组蛋白甲基化程度;蛋白质印迹法检测IGFBP-7蛋白表达。结果 携带D5 Stat5a c DNA的腺病毒感染能够呈剂量依赖式地促进前列腺癌细胞(DU145及PC3)增殖。如PC3细胞,对照组细胞的相对活细胞数为(1.362±0.018),三个实验组相对活细胞数分别为(1.453±0.022)(P>0.05)、(1.649±0.020)(P<0.05)及(1.829±0.027)(P<0.05)。实时定量PCR及蛋白印迹证明D5 Stat5a过表达明显下调IGFBP-7的表达。DU145及PC3对照组细胞IGFBP-7 m RNA相对值分别为(0.796±0.023)及(0.871±0.046),而感染携带D5 Stat5a c DNA的腺病毒(MOI 30)后,其IGFBP-7 m RNA相对值则分别下降到(0.148±0.019)(P<0.01)及(0.078±0.021)(P<0.01)。染色质免疫共沉淀分析(Ch IP-Assay)证实,D5 Stat5a导致IGFBP-7基因启动子区域组蛋白甲基化(H3K27Me3)水平显著上升。DU145细胞对照组与实验组,其沉淀DNA比例分别为(0.0176±0.0030)%及(0.0650±0.0099)%,两者差异有高度统计学意义(P<0.01)。此外,实时定量PCR检测表明,D5 Stat5a引起组蛋白甲基转移酶EZH2 m RNA大幅上升。DU145细胞对照组及D5 Stat5a感染组相对m RNA水平分别为(0.0033±0.0004)及(0.0160±0.0035),两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 转录因子D5 Stat5a能够显著促进人类前列腺癌细胞的增殖,其主要的表观遗传学机制在于D5 Stat5a增加EZH2基因表达,导致抑癌基因IGFBP-7启动子区域组蛋白甲基化,使启动子活性降低,IGFBP-7表达下降,是导致前列腺癌细胞的异常增殖分子机制之一。     

EB病毒引起的表观遗传学改变在鼻咽癌中的作用

鼻咽癌是东南亚地区常见的头颈部恶性肿瘤之一,EB病毒导致的表观遗传学改变与其发生、发展有着密切关系。我们通过查阅相关文献,从DNA甲基化、组蛋白修饰、染色质重构和非编码RNA 4个方面,综述EB病毒引起的表观遗传学改变在鼻咽癌中的作用,为临床易感人群筛查、早期诊断、治疗及预后判断提供新的思路。