联合干预离子通道提高PVDF膜富集胎儿有核红细胞的效率

目的通过干预细胞膜阴离子通道(AE)和Na+/K+/2Cl-离子共转运体(NKCC),提高聚偏二氟乙烯(PVDF)膜富集脐血有核红细胞(NRBC)的效率。方法以密度为1.067的分离液分离NRBC,用AE抑制剂维拉帕米(verapamil)和NKCC抑制剂呋噻米(furosemide)联合干预,用流式细胞技术和巢式PCR观察干预前后离心法和过5μm孔径PVDF膜法富集NRBC的效率。结果最佳离心分离密度梯度为1.067。流式细胞仪检测离心分离的NRBC平均纯度为2.54%,干预后离心分离NRBC纯度为9.36%,NRBC富集率提升近3.7倍;过PVDF膜前NRBC为0.83%,过膜后NRBC为6.15%,干预后过膜将NRBC富集率提升了7.4倍。用巢式PCR检测,每ml血样中NRBC为120个时,干预后过膜的扩增条带的密度值由4.48升高至17.78,提升近4倍。结论维拉帕米和呋噻米能够通过改变脐血细胞性状,提高NRBC通过PVDF膜的效率。     

XN-1000希森美康对孕妇外周静脉血分析提示与细胞涂片染色分析的相关性

目的探讨XN-1000希森美康细胞分析仪对孕妇外周静脉血白细胞分类计数、有核红细胞计数分析提示与相关细胞涂片染色人工分析结果相关性及意义。方法采用XN-1000型希森美康细胞分析仪对妇产科采集的280份外周静脉血进行白细胞分类计数、有核红细胞计数分析,同时对应外周静脉血标本进行细胞涂片染色分析,比较仪器分析和细胞染色人工分析结果。结果仪器分析重复性良好,仪器分析和细胞染色人工分析具有较高的相关性,报警提示结果和细胞染色人工分析阳性结果特异性大于95%,灵敏度100%,阳性预测值大于90%,阴性预测值100.00%。结论 XN-1000希森美康细胞分析仪分析报警提示可以有效筛选阳性标本,同时对阳性标本需要细胞染色人工分析,避免假阳性结果。     

母血中胎儿有核红细胞用于无创产前诊断的研究

目的 用分离到的胎儿有核红细胞,评价应用荧光原位杂交技术筛查染色体非整倍性的临床应用价值.方法 43例(孕周17～21+4周)拟行产前诊断的孕妇外周血20ml,用双密度梯度离心和双抗体磁性活化细胞分选(magnetic activated cell sorting,MACS)方法富集孕妇外周血中胎儿有核红细胞,其中10例患者富集的细胞进行吉姆萨-瑞氏染色,10例进行抗人CD235a和CD71免疫荧光抗体染色,行细胞鉴定和计数.23例富集后的细胞用荧光染色体原位杂交(fluorescence chromosomal in situ hybridization,FISH)探针进行非整倍体分析,并与羊水培养后核型分析结果进行比较.结果 所有标本均分离出有核红细胞,并经组织学染色、免疫荧光特异抗体和FISH鉴定.23例FISH诊断中,未发现非整倍体异常;14例男性胎儿有13例发现Y荧光信号,1例未发现,女性胎儿中均发现2个X荧光信号.结论 荧光原位杂交技术可对经富集的孕妇外周血中胎儿细胞进行非整倍体诊断.     

AIDS合并播散性马尔尼菲篮状菌感染患者的白细胞散点图及血细胞形态特点

目的　回顾分析27例AIDS合并播散性马尔尼菲篮状菌感染患者的白细胞散点图、外周血涂片特点及其他实验室指标，寻找早期识别AIDS合并马尔尼菲篮状菌病（talaromycosis marneffei, TSM）的指标。方法　收集通过外周血涂片诊断的27例AIDS合并TSM患者作为AIDS合并TSM组；同时选取单纯HIV感染者、AIDS合并其他并发症患者分别作为对照组，对3组的白细胞散点图特点、白细胞手工分类计数、外周血细胞形态学特点进行分析，并对3组的血常规、CD4+ T淋巴细胞计数、转氨酶及1，3-β-D真菌葡聚糖（BDG）结果进行比较。结果　AIDS合并TSM组的白细胞散点图均在有核红细胞区域出现散点，外周血涂片均可见有核红细胞，同时可见幼稚、畸形的中性粒细胞。单纯HIV感染组的白细胞散点图和血涂片形态未见异常。AIDS合并其他并发症组的散点图有部分出现中性粒细胞散点上移，血涂片可见幼稚、畸形的中性粒细胞。3组的白细胞分类总体差异均有统计学意义（P均＜0.05）。3组的白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板、AST、ALT、BDG、CD4+ T淋巴细胞水平比较，差异均有统计学意义（P均＜0.05）。结论　AIDS合并TSM组的白细胞散点图和外周血形态有异常表现，有核红细胞的出现为特异性提示，且中性粒细胞比例、AST和BDG水平增高，CD4+ T淋巴细胞、血小板水平降低更明显。     

新生儿外周血有核红细胞检测的临床运用研究

目的评价检测新生儿外周血中有核红细胞的临床意义。方法从2016年10月至2018年2月在本院住院的新生儿中选出230例作为试验组,另选择95例足月健康新生儿作为参照组,选用全自动血液分析仪对两组新生儿的外周血实施检测,以测定外周血中有核红细胞的计数绝对值、比例,当超出正常参考值的0%～1%时鉴定为阳性。结果试验组230例新生患儿中,早产患儿外周血中有核红细胞检出率是98.98%;新生窒息患儿的是90.91%;产前宫内窘迫婴儿的是91.43%;酸血症患儿的是92.86%;高胆红素血症患儿的是3.28%。参照组足月健康新生儿的外周血中未检出有核红细胞,检出率为0.00%。除了高胆红素血症患儿的外周血中有核红细胞检出率和参照组没有差异外,其他各类型新生患儿的外周血中有核红细胞检出率和参照组对照,均具统计学意义(P <0.05)。在新生儿出生后第1天内外周血中有核红细胞检出率达93.91%;伴随出生天数的持续增加,新生儿外周血中有核红细胞的检出率显著降低。结论早产儿、窒息患儿、产前宫内窘迫患儿及酸血症新生患儿的外周血中有核红细胞计数水平都会显著上升,临床中可将外周血有核红细胞检测当作评估新生儿健康状况的常规项目之一。     

外周血有核红细胞计数与新生儿缺氧缺血性脑病相关性分析

目的利用Meta分析方法探讨有核红细胞(NRBC)计数在新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)中的价值。方法利用计算机检索PubMed、中国知网、万方数据库及维普数据库中公开发表的NRBC诊断新生儿HIE的文献,检索时间为数据库建库至2017年11月30日。利用Revman5.3软件进行异质性检验和效应值的合并分析,同时进行敏感性分析和偏倚评估。结果符合纳入条件的文献共有7篇。根据文献的异质性检验结果,采用随机效应模型进行分析。结果提示合并OR值(95%CI)为2.88(1.42～4.33),Z值为3.87,P=0.0001。亚组分析:轻度与重度、中度与重度HIE NRBC均有显著差异,但轻度与中度HIE NRBC无显著差异。本研究的敏感性分析较稳定且无发表偏倚。结论外周血NRBC与新生儿HIE的发病密切相关,且随病情加重而增高。     

外周血有核红细胞自动检测应用研究

目的评价血细胞分析仪自动计数外周血有核红细胞(NRBC)的方法学特点,并探讨其临床应用价值。方法选择45例来我院就医患者,用SIEMENS ADVIA-2120全自动血细胞分析仪及显微镜计数法计数其外周血中NRBC数量。结果用SIEMENS ADVIA-2120与显微镜计数法计数外周血中NRBC数量,NRBC计数范围在0～15%时,r=0.989;NRBC计数范围在0～220%时,r=0.998。显示有极好的相关性。结论 SIEMENS ADVIA-2120血细胞分析仪可灵敏、准确、精密地自动计数外周血中NRBC,并且可在NRBC增高的标本中准确计数白细胞数量。血细胞分析仪自动计数外周血中NRBC,有助于一些血液病及非血液病患者的筛查与诊断。     

干预离子通道联合密度梯度离心富集胎儿有核红细胞

目的探讨干预膜表面K-Cl同向转运体(KCC)离子通道联合密度梯度离心对富集脐血中胎儿有核红细胞(NRBC)的效果。方法用KCC特异激活剂尿素(Urea)干预细胞膜,建立最大限度缩小细胞体积的干预条件;用最佳干预条件干预脐血后进行不同密度介质下离心富集NRBC,用流式细胞仪计数NRBC的富集效果。结果比较传统1.077淋巴细胞分离液离心后的单个核细胞层流式细胞仪计数NRBC为8.6%,干预脐血后用1.065密度介质离心后下层NRBC达69.9%,未干预组中用1.099密度介质离心的单个核细胞层NRBC达55.9%,提高了富集量。结论尿素干预联合密度梯度离心能有效提高NRBC的富集率。     

孕中期唐氏综合征血清筛查联合无创性产前基因诊断价值

目的:探讨孕中期血清筛查联合无创性产前基因诊断对降低唐氏综合征患儿出生率的意义.方法:采用时间分辨免疫荧光法检测孕14～20+6周1 242名孕妇血清甲胎蛋白和游离β-人绒毛膜促性腺激素水平,应用Multicalc软件计算唐氏综合征风险值.唐氏综合征高风险切割值为1∶270,≥1∶270为高风险孕妇;18-三体综合征高风险切割值为1∶350,≥1∶350为 18-三体综合征高风险孕妇.孕妇均抽取静脉血4～20 mL行胎儿细胞富集分离与鉴定,对胎儿有核红细胞进行单细胞基因分析,并应用基因扫描技术对短串联重复序列位点基因片段进行检测.结果:血清甲胎蛋白+游离β-人绒毛膜促性腺激素筛查出高风险孕妇35名,其中唐氏综合征高风险20名,18-三体综合征高风险9名,神经管缺陷高风险6名,阳性率2.8%.20名唐氏综合征高风险孕妇中,21号染色体短串联重复序列位点为三体图谱型6名,其中1∶1∶1基因型4名,2∶1基因型2名;1名2∶1基因型孕妇自然流产,对流产胎体进行细胞核分型,确诊为唐氏综合征,余5名活产新生儿经细胞核型分析确诊为唐氏综合征.1 207名低风险孕妇基因扫描均为正常二倍体1∶1基因型.结论:唐氏综合征血清筛查联合无创性产前基因诊断,可提高唐氏综合征产前诊断率,降低唐氏综合征患儿出生率.