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1.
目的:利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建血管紧张素转换酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2)基因编辑的长白猪胎儿成纤维细胞(porcine fetal fibroblast,PFF)细胞系,为构建新型冠状病毒即严重急性呼吸综合征冠状病毒 2 型(se- vere acute respiratory syndrome coronavirus type 2,SARS-CoV-2)不易感猪模型提供实验材料。方法:①利用生物信息学方法对大鼠和鸡的ACE2氨基酸序列进行比对,将大鼠ACE2与SARS-CoV-2 S蛋白相互作用的关键氨基酸残基替换为鸡ACE2的氨基酸残基,设计嵌合的ACE2基因并构建ACE2基因敲入供体。②设计并合成靶向猪ACE2基因的sgRNA,克隆到pX330载体上构建ACE2基因打靶载体。③将ACE2打靶载体和ACE2基因敲入供体以及Neomycin抗性质粒共转染至长白猪PFF细胞,筛选G418抗性单细胞克隆并进行测序鉴定。结果:根据氨基酸序列比对结果,将大鼠ACE2蛋白的第19、31、34、35、42、353、354位氨基酸残基替换为鸡ACE2的氨基酸残基,设计合成了嵌合的ACE2基因。G418抗性单细胞克隆基因型分析结果显示获得了阳性单细胞克隆。结论:利用CRISPR/Cas9技术成功获得了内源ACE2基因敲除、嵌合ACE2敲入的长白公猪PFF细胞系,为构建SARS-CoV-2不易感猪模型奠定了基础。 相似文献
2.
《中华儿科杂志》2022,(4):297-301
目的探索益生菌干预在早产巴马猪生后肺脏发育中的作用。方法动物实验研究, 2020年4月至2021年10月利用已成功建立的30只早产巴马猪模型, 将仔猪分为早产组(妊娠104 d出生)、足月组(妊娠113 d出生)、早产益生菌干预组(妊娠104 d出生后第3天开始给予口服益生菌)和足月益生菌干预组(妊娠113 d出生后第3天开始给予口服益生菌), 分别记录早产组和足月组仔猪出生后即刻、生后4、9、21 d以及早产益生菌干预组和足月益生菌干预组仔猪生后9 d后的体重并收集肺组织、回肠组织和肠道内容物。通过比较体重、辐射状肺泡计数来评估仔猪发育情况, 通过测量回肠绒毛高度评估回肠发育情况, 通过菌群16 S核糖体RNA分析评估回肠内容物的菌类构成, 组间比较采用t检验。结果 30只仔猪中雌性16只、雄性14只。早产组和足月组各12只, 早产益生菌干预组和足月益生菌干预组各3只。早产组仔猪生后4、9、21 d的体重均分别低于足月组生后4、9、21 d[(507±27)比(694±56)g、(620±35)比(1 092±154)g、(1 660±210)比(2 960±418)g, t=2.9... 相似文献
3.
目的 探讨小型扩展双额入路手术治疗颅前窝底中线脑膜瘤的效果。方法 回顾性分析2017年3月~2018年12月小型扩展双额入路手术治疗的41例颅前窝底中线脑膜瘤的临床资料。结果 Simpson分级Ⅰ级切除24例,Ⅱ级切除17例。术后病理均为脑膜瘤,WHO分级Ⅰ级38例,Ⅱ级3例。术后随访21~31个月,无肿瘤复发。术后发生嗅觉缺失或减退5例,暂时性尿崩症2例,脑膜炎2例,癫痫发作1例。结论 小型扩展双额入路手术是切除颅前窝底中线脑膜瘤的有效方法。 相似文献
4.
目的利用3.0 T心脏磁共振(cardiovascular magnetic resonance,CMR)钆延迟强化(late gadolinium enhancement,LGE)技术评估巴马小型猪慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)模型左心室(left ventricle,LV)心肌纤维化,为评估COPD心肌组织学损伤提供影像学依据.材料与方法选用20头健康巴马小型猪,随机分成COPD模型组(16头,蛋白酶制备COPD模型)及正常对照组(4头).分别于造模前及造模不同阶段(4周、8周及20周)行多模态CMR扫描.对比各组小型猪之间常规心脏参数的差异;分析各组LV心肌LGE发生率、分布及类型.结果模型组共有14头小型猪COPD模型构建成功.造模早期及中期(4周、8周)模型组与对照组的基线资料差异均无统计学意义(P>0.05);而造模后期(20周)呼吸频率及心率均明显加快(P分别为0.003、0.002);体质量降低(P=0.007).造模早、中期各组小型猪心功能参数之间差异无统计学意义(P>0.05).与造模前及对照组比较,造模后期右心室前壁(right ventricular anterior wall,RVAW)(P均<0.001)均有所增厚,右心室舒张末横径(right ventricular end diastolic diameter,RVDd)(P<0.001)及左心室后壁(left ventricular posterior wall,LVPW)(P=0.018)较造模前有所增厚,左心室舒张末横径(left ventricular end diastolic diameter,LVDd)(P=0.05)及左心室舒张末容积(left ventricular end diastolic volume,LVEDV)(P=0.005)较造模前有所减低.右心室射血分数(right ventricular ejection fraction,RVEF)较造模前及对照组均降低(P<0.001及为0.001);左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)差异无统计学意义(P均>0.05).造模后模型组有5头小型猪共23个心肌节段(23/85)发生LGE,与对照组及造模前比较均出现显著差异(P均<0.01).LGE主要位于左室基底部及中间部,其分布差异有统计学意义(P<0.05),且LGE以肌壁间型最为多见.结论COPD早期即可出现RVEF降低,但仍在正常范围内;少部分LV心肌可出现心肌纤维化,但LVEF未见明确改变.基于CMR的LGE技术可为COPD患者早期干预、诊疗计划的制定以及预后的评估提供影像学依据. 相似文献
5.
目的探讨颅内小型动脉瘤破裂的危险因素。方法回顾分析235例颅内小型动脉瘤患者的病例资料,根据动脉瘤是否破裂分为破裂组(n=177)与未破裂组(n=58)。对2组患者的临床资料及瘤体特征进行单因素分析,运用Logistic回归模型分析颅内小型动脉瘤破裂的独立危险因素。结果 2组高血压病史、吸烟史、饮酒史、动脉瘤部位以及动脉瘤形态等指标比较,差异有统计学意义(P 0.05)。高血压病史、饮酒史、吸烟史、动脉瘤部位以及动脉瘤形态均是颅内小动脉瘤破裂的影响因素。结论颅内小型动脉瘤的破裂与患者高血压病史、饮酒史、吸烟史、动脉瘤部位、动脉瘤形态密切相关。 相似文献
6.
目的评估猪尾巴导管在单孔胸腔镜肺肿瘤手术中应用的有效性。方法回顾性分析2020年1月至12月上海交通大学医学院附属仁济医院东院接受单孔胸腔镜肺肿瘤手术的患者共441例,根据是否放置猪尾巴导管分为胸管组和猪尾巴管组,通过倾向性评分匹配法进行1∶1匹配,对比两组患者围手术期的各项指标。结果匹配后每组143例配对成功,匹配后两组间基线特征无统计学差异。对比两组围手术期指标发现,猪尾巴管组患者术后3天胸腔引流总量显著多于胸管组(375.49 ml对285.03 ml,P<0.001),术后两周复查CT示胸腔积液量显著少于胸管组(131.77 ml对178.84 ml,P=0.032),两组术后疼痛评分、引流天数及住院天数无明显统计学差异。结论加放猪尾巴导管可有效改善单孔胸腔镜肺肿瘤术后胸腔引流情况,且不增加患者术后疼痛,不延长胸腔引流及住院天数。 相似文献
7.
目的探讨不同组织来源的生物补片体内组织重塑的差异,并提供信息供临床选择生物补片时参考。
方法选取健康SD大鼠,随机分组,每组10处缺损,建腹壁肌部分层次缺损模型并以基底膜(basement membrane,BM)/小肠黏膜下层(small intestine submucosa,SIS)复合细胞外基质补片、SIS补片、真皮补片和心包补片修补,设立未修补组为空白对照。术后2、4、8、16周评价修复区血清肿发生、皱缩率、植入降解比例,取修复区组织做组织学切片分析补片内组织长入、新生血管化、周围组织包裹情况。
结果实验期内,BM/SIS复合细胞外基质补片未发生血清肿,基本维持植入面积,术后4周再生高度有序的新生胶原替代缺损区域,术后8周补片降解。术后2周,SIS补片的血清肿发生率为65%,修复区早期大量炎性细胞浸润,再生胶原组织有序性较差,术后8周补片降解,术后16周皱缩率为-52.0%±9.8%。50%的真皮补片细胞浸润补片中央,完全降解。其余真皮补片出现纤维囊包裹,细胞仅浸润交界区,修复区显著扩张,实验期内无降解。心包补片仅少量细胞浸润交界区,无组织长入,术后16周皱缩率为-29.5%±14.0%,出现致密纤维囊包裹,实验期内无降解。
结论与SIS补片、心包补片和真皮补片相比,BM/SIS复合细胞外基质补片具备优异的组织修补和再生疗效。 相似文献
8.
9.
目的:探讨四磨汤口服液对幼年巴马小型猪功能性消化不良腹泻的影响。方法:采用利血平注射液造成幼年巴马小型猪功能性消化不良腹泻模型。阳性对照组,四磨汤口服液低、中、高剂量组分别灌胃给予小儿复方鸡内金散药剂(0.14 g/kg)及低、中、高剂量四磨汤口服液(0.21、0.42、0.84 g生药/kg)。观察小型猪体质量、肛温、腹泻症状,ELISA法检测血清胃肠激素及尿D-木糖排泄率等功能性消化不良相关指标。结果:给药5 d后,四磨汤口服液中、高剂量组腹泻症状全部恢复,肛温均恢复正常;阳性对照组,四磨汤口服液中、高剂量组体质量增量明显高于模型对照组(P0.01或P0.05);四磨汤口服液中、高剂量组胆囊收缩素含量明显低于模型对照组(P0.05),四磨汤口服液高剂量组淀粉酶、胃动素含量显著高于模型对照组(P0.01或P0.05)。结论:四磨汤口服液能剂量依赖性地改善功能性消化不良腹泻幼年巴马小型猪的腹泻症状,促进体质量增长,提高尿D-木糖排泄率,升高血清胃泌素、胃动素及淀粉酶含量,降低血清胆囊收缩素和乳酸含量。 相似文献
10.
目的 探索家猪离体胃模型在对国际学员进行内镜黏膜下剥离术(endoscopic submucosal dissection,ESD)培训中的应用价值。方法 对15名国际学员进行为期20 d的ESD培训,第一阶段为理论知识学习,完成消化内镜基础及动物模拟培训调查问卷。第二阶段将其随机分为离体动物模型组(A组,8人)和临床观察学习组(B组,7人)。A组在临床观察学习期间,同时按照规范操作步骤进行离体动物模型培训课程。培训结束时考核两组学员ESD操作情况,并再次完成问卷。应用SPSS 20.0进行t检验和卡方检验。结果 A组与B组ESD总操作时间差异有统计学意义(P<0.05),注射时间、标记时间差异没有统计学意义(P>0.05),切开时间及黏膜剥离时间差异有统计学意义。A 组与B组的ESD操作速度差异无统计学意义。两组切除标本大小差异无统计学意义。两组均有1例为分块切除病灶,其余为整块切除。在操作过程中各发生1例穿孔。同时,对比离体动物模型组学员培训前后操作情况,发现培训后ESD总操作时间、切开时间明显提高。结论 以理论知识为基础结合家猪离体胃动物模型培训的内镜培训具有较高的教学参考价值,能够使各国学员熟悉并初步掌握ESD的基础理论知识及操作方法,帮助各国学员日后在临床开展ESD操作。 相似文献