激光人工皱缩对单囊胚解冻后移植结局的影响

〔摘 要〕 目的：分析激光人工皱缩对单囊胚解冻后移植结局的影响。 方法：选取佛山市妇幼保健院 2018 年 1 月至 2020 年 6 月期间 200 例经阴道超声引导下穿刺取卵手术及助孕患者，均实施单囊胚移植治疗，其中 100 例囊胚直接玻璃化冷冻患者 纳入对照组，100 例囊胚实施激光打孔皱缩处理后再予以玻璃化冷冻的患者纳入观察组，对两组解冻后单囊胚移植结局进行 对照分析。 结果：观察组患者优质囊胚率为 69.0 % 高于对照组的 50.0 %，差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。两组患者的 生化妊娠率、临床妊娠率、种植成功率、异位妊娠率及流产率比较，差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。 结论：激光人工皱 缩可以提高玻璃化解冻后的优质囊胚率，但总体上对单囊胚解冻后移植结局无明显影响，单囊胚冻融移植中无需特别进行 激光人工皱缩处理。     

姐妹胚胎囊胚形成率与卵裂期胚胎移植临床结局的相关性

目的探讨卵裂胚移植后剩余的姐妹(sibling)胚胎囊胚形成率对IVF-ET临床结局的预测价值及胚胎移植策略的选择。方法回顾性分析2013年1月至2014年7月在我院生殖中心实施IVF/ICSI-ET的454个移植周期的临床资料,其中,有188个周期为受精后第3天(D3)行卵裂胚移植,设为A组,有266个周期行全囊胚培养并移植优质囊胚,设为B组。A组再分为优质囊胚形成组(A1组,127个周期),无优质囊胚形成组(A2组,61个周期)。比较各组的基本资料和临床结局,直线回归分析囊胚形成率与临床妊娠率的相关性。结果 3组间年龄、不孕年限、HCG日子宫内膜厚度、平均获卵数、成熟卵数、正常受精率、卵裂率、D3优质胚胎数,优质胚胎率,移植胚胎数、异位妊娠率,流产率和周期取消率均无统计学差异(P0.05),B组临床妊娠率(69.7%,)和种植率(40.1%)均显著高于A2组(52.5%、28.2%)(P0.05),A1组与B组间无显著性差异(P0.05);回归分析显示总囊胚形成率及优质囊胚形成率与临床妊娠率呈显著正相关(分别为r=0.844和r=0.867,P0.05)。结论卵裂胚移植后姐妹胚胎囊胚形成率对IVF-ET的临床结局有预测价值,优质卵裂期胚胎移植后剩余姐妹胚胎培养形成优质囊胚可获得与移植优质囊胚相似的临床结局。     

脑源性神经营养因子在着床前小鼠胚胎中的表达及其对胚胎发育的影响

目的检测脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体TrkB在植入前胚胎中的表达情况,探讨BDNF对小鼠早期胚胎发育和着床过程中的作用。方法收集小鼠受精后1~4d的胚胎,利用免疫组化和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测BDNF及其受体TrkB在各阶段胚胎中的表达情况。将2细胞阶段的胚胎放入添加不同浓度的BDNF的培养基中,添加或不添加TrkB受体阻断剂k252a/k252b,观察胚胎发育情况,并对形成的囊胚进行细胞计数。在注射人绒毛膜促性腺激素(HCG)后72h、76h、84h和88h分别腹腔注射10μg K252a/k252b,收集胚胎,计算扩张期囊胚数和囊胚细胞数。结果 BDNF及TrkB均表达于小鼠植入前各阶段的胚胎中,在培养基中添加BDNF后能够促进小鼠胚胎的体外发育,能够提高囊胚形成率和囊胚孵化率,并能够提高滋养层细胞数,此作用能够通过TrkB受体阻断剂k252a而阻断。体内研究进一步证实,k252a处理后能够抑制囊胚细胞数而明显抑制早期胚胎发育。结论 BDNF/TrkB信号系统可能通过某种自分泌或旁分泌的作用方式促进植入前胚胎的发育,同时也可能参与胚胎的着床过程。     

低等级胚胎囊胚培养及冻融周期移植后临床结局分析

目的评价低等级胚胎囊胚培养的价值,并观察其囊胚移植后的临床结局。方法共纳入684个周期,将新鲜周期剩余无冷冻价值的低等级胚胎继续行囊胚培养,当有囊胚形成时给予冷冻保存,若新鲜周期移植后未妊娠,则行冻融周期囊胚移植。统计分析鲜胚周期低等级胚胎囊胚形成率、妊娠率及冻融周期囊胚移植的妊娠结局。结果在684个鲜胚周期中,有3 536个胚胎继续行囊胚培养,其中475个周期有1 187个囊胚形成,囊胚形成率为33.6%,209个周期无囊胚形成。有囊胚形成新鲜胚胎移植周期临床妊娠率(48.8%)及种植率(32.3%)较无囊胚形成新鲜胚胎移植周期临床妊娠率(29.8%)及种植率(17.4%)增高,差异有统计学意义(P0.05)。新鲜胚胎周期未妊娠者有111个周期行冻融周期囊胚移植,囊胚移植后临床妊娠率(40.5%)、种植率(27.4%)、流产率(8.9%),与同时期卵裂期胚胎冻融周期(n=2 156)的临床妊娠率(43.0%)、种植率(24.0%)、流产率(7.8%)比较,两组间差异无统计学意义(P0.05);冻融囊胚移植组异位妊娠率高于同期卵裂期冻胚移植组(8.9%vs.3.7%)(P0.05)。结论卵裂期形态学评分为低等级的胚胎依然有囊胚培养的价值,有助于增加累积妊娠率。     

囊胚发育速度及质量对冻融周期单囊胚选择的影响

目的联合囊胚发育速度和囊胚质量分析其对妊娠结局和新生儿出生结局的影响,为冻融周期中的囊胚选择提供证据。方法回顾性分析2011年7月至2018年6月在北京协和医院生殖中心进行单囊胚复苏移植治疗的患者资料,周期数为736个。按照囊胚形成时间分为两组:D5组(在受精第5天形成囊胚)和D6组(在受精后第6天形成囊胚)。再根据各组内囊胚是否为优质胚胎分为4组,分别为D5优胚组、D5非优胚组,D6优胚组、D6非优胚组。分别比较各组的临床妊娠结局和新生儿的出生结局。结果 (1)共纳入736个复苏周期,复苏存活率100%。患者平均胚胎复苏年龄为(35.1±4.4)岁。临床妊娠率为40.9%,流产率为19.6%,活产率为26.0%。(2)D5组中移植的优质胚胎比例显著高于D6组(60.4%vs. 36.6%,P<0.05);D5组的临床妊娠率和活产率均显著高于D6组(分别为51.5%vs. 33.6%和33.9%vs. 20.6%)(P均<0.05);两组的流产率无显著差异(P>0.05)。D5组的男女性别比略高于D6组(P>0.05)。两组新生儿的身长和出生体重无显著差别(P>0.05)。D5组巨大儿的发生率略高于D6组,但无显著差异(P>0.05)。两组新生儿均未发生出生死亡和先天异常。(3)D5优胚组、D5非优胚组、D6优胚组和D6非优质胚胎组的临床妊娠率和活产率均有显著性差异(P均<0.05),D5优胚组的临床妊娠率和活产率最高,D6非优胚组的临床妊娠率和活产率最低。各组间的新生儿出生体重、身长和男女性别比无统计学差异(P>0.05)。D5非优胚组的临床妊娠率和活产率均略低于D6优胚组,但两者均无显著差异(P>0.05)。D6非优胚组的临床妊娠率显著低于D5非优胚组(P<0.05),但两组的活产率无显著差异(P>0.05)。结论单囊胚的冻融周期移植时,优先选择D5的优质胚胎;而面临D5非优质胚胎和D6优质胚胎时,两者均可考虑,可以根据实验室的实际情况进行选择。     

囊胚玻璃化冷冻保存时长对复苏移植临床结局的影响

目的研究使用开放式载体玻璃化冷冻保存囊胚的时长对复苏移植妊娠结局和新生儿结局的影响,探讨胚胎经过玻璃化冷冻并进行6年以上的长期保存是否对临床结局产生负面影响。方法回顾性分析2006年3月至2018年12月期间在我院生殖中心进行囊胚玻璃化冷冻复苏移植的2 643例患者的临床资料。按照胚胎玻璃化冷冻保存时长将其分为7组:≤1年,1~2年,2~3年,3~4年,4~5年,5~6年和≥6年,比较各组患者一般情况、临床结局、活产情况和单胎新生儿出生结局之间的差异,再使用二分类Logistic回归分析女性取卵年龄、移植年龄、胚胎冷冻保存时间、囊胚冷冻日期和囊胚级别对妊娠率和活产率的影响。结果各组患者取卵年龄、移植年龄、优胚率、复苏胚胎存活率、妊娠率和活产率组间差异有统计学意义(P<0.05)。各组平均移植胚胎数、D5胚胎比例、种植率、流产率、异位妊娠率、单胎率、出生男孩率、出生缺陷率、单胎出生体重、身长和孕天数均无统计学差异(P>0.05)。Logistic回归分析显示取卵年龄、移植年龄和冷冻保存时间对妊娠率无显著影响(P>0.05),取卵年龄和冷冻保存时长对活产率无显著影响(P>0.05),而增加移植D5胚胎和优质胚胎数量可以提高妊娠率和活产率(P<0.05),移植年龄的增加会降低活产率(P<0.05)。结论使用开放性载体玻璃化冷冻保存囊胚的时长对复苏后移植的妊娠结局和新生儿结局没有明显影响。囊胚经过玻璃化冷冻并进行6年以上长期冷冻保存,临床结局未产生明显负面影响。     

脑源性神经营养因子调控热应激条件下小鼠着床前胚胎发育和凋亡

目的 探讨脑源性神经营养因子（BDNF）对正常和热应激条件下小鼠着床前胚胎发育和凋亡的影响。 方法 150只雌性昆明小鼠用于实验,2细胞期胚胎添加或不添加10μg/L BDNF进行体外培养,早期囊胚37 ℃条件下或41 ℃热处理2 h,观察胚胎发育情况,TUNEL法和Hoechst 33342分析囊胚细胞数量和凋亡情况,荧光技术分析Caspase-9的活力。 结果 在37 ℃条件下BDNF能够促进早期囊胚发育,增加囊胚细胞数量,降低凋亡率及Caspase-9的活力,热应激能够降低早期囊胚的发育能力,减少囊胚细胞数量而增加凋亡率,且中等和高Caspase-9活力囊胚的比例热处理后明显增加,当培养基中添加10μg/L BDNF时,能够明显缓解热应激对早期囊胚发育和质量的不利影响。 结论 BDNF对37 ℃或41 ℃热应激条件下小鼠着床前胚胎发育、细胞数量、凋亡和Caspase-9活力起到一定的调控作用。     

解冻移植不同时期胚胎与单卵双胎发生率的相关性分析

目的比较分析解冻移植周期中处于不同阶段胚胎的单卵双胎(MZT)发生率,可通过避免移植内细胞团松散的囊胚来减少单卵双胎的发生。方法回顾性分析2013-2015年在广州医科大学附属第三医院生殖中心解冻移植的5 069周期、临床妊娠2 724周期情况。根据移植的胚胎情况分为卵裂胚组、桑椹胚组、囊胚组,比较分析卵裂胚组、桑椹胚组、囊胚组的MZT发生情况与临床结局。结果本研究共观察到96例MZT,总的MZT发生率为3. 5%(96/2 724)。卵裂胚组MZT发生率1. 2%(9/737),桑椹胚组MZT发生率2. 5%(3/122),囊胚组MZT发生率4. 5%(84/1 865),3组之间的MZT发生率比较差异有统计学意义(P<0. 05)。结论胚胎的继续培养至囊胚容易增加单卵双胎的发生比例。避免移植内细胞团松散的囊胚可帮助减少单卵双胎妊娠的发生。     

选择性单囊胚移植在辅助生殖技术中的应用研究

目的探讨选择性单囊胚移植是否能够在维持临床妊娠率不降低的同时,有效降低多胎妊娠率,为临床提供参考依据。方法将愿意行囊胚培养及选择性单囊胚移植的417例不孕患者作为观察组,本研究仅分析新鲜周期将单囊胚冷冻,解冻周期复苏移植的病例;将不愿意行选择性单囊胚移植,坚持行卵裂期胚胎移植的280例患者设为对照组,也仅分析解冻周期复苏移植的病例;另将冷冻胚胎解冻移植的患者设为自然对照组;分析各组的临床妊娠率、胚胎着床率及多胎妊娠率等。结果观察组临床妊娠率为50. 34%,胚胎种植率为50. 34%,多胎妊娠率为1. 35%。对照组临床妊娠率为45. 85%,胚胎种植率为30. 10%,多胎妊娠率为32. 76%。自然对照组临床妊娠率为43. 67%,胚胎种植率为27. 66%,多胎妊娠率为25. 90%。结论选择性单囊胚移植能够在维持临床妊娠率不降低的同时,有效降低多胎妊娠率。