干扰素-γ受体1部分缺陷病临床及分子特征分析

目的本研究纳入1例8月龄时发生播散性卡介苗病的女性患儿,旨在探讨IFNGR1缺陷病的临床及分子特征。方法总结1例常染色体显性遗传IFNGR1部分缺陷病患儿临床资料,Q-RT-PCR检测IL-12-IFN-γ轴功能,流式细胞术检测PHA刺激的T细胞表面IFNGR1蛋白表达,Sanger测序法分析IFNGR1基因。结果患儿常规免疫功能无异常。患儿抗凝血经BCG+rhIFN-γ同时刺激后IL-12B的表达水平比单独使用BCG刺激略有增加(P0.05),但较健康对照显著降低(P0.05);IFNGR1蛋白表达高于健康对照。基因测序发现患儿IFNGR1第6外显子存在c.819_822del4(p.N274Hfs*2)杂合突变,父母均无此突变。结论常染色体显性遗传IFNGR1基因部分缺陷病极为罕见,易发生播散性分枝杆菌感染,应尽早检测IL-12-IFN-γ轴功能、相关蛋白表达并行基因分析确诊。     

专人专职管理在卡介苗接种中的应用

【目的】探讨专人专职管理卡介苗( Bacille Calmette-Guerin vaccine,BCG)预防接种的实施效果。【方法】选取2014～2017年在上海市国际和平妇幼保健院出生的新生儿为研究组,2010～2013年出生的新生儿为对照组。通过疑似预防接种异常反应信息管理系统,收集2010～2017年报告的卡介苗预防接种异常反应( adverse events following immunization,AEFI)个案数据,比较专人专职管理前后两组新生儿在卡介苗使用情况及发生BCG AEFI之间的差异。【结果】研究组BCG的AEFI报告发生率、拒种率均低于对照组,差异有统计学意义(p<0.05)。BCG的AEFI分类中直径>1.0cm淋巴结炎最常见,研究组报告发生率为31.31/100万剂,低于对照组205.35/100万剂,差异有统计学意义(p<0.05)。【结论】通过专人专职管理可规范卡介苗的接种,降低AEFI的发生率和拒种率,利于临床推广。     

中、高危非肌层浸润性膀胱癌卡介苗灌注的疗效与不良反应分析

目的 探究非肌层浸润型膀胱癌(non-muscle-invasive bladder cancer, NMIBC)患者卡介苗（Bacillus Calmette-Guerin,BCG）膀胱灌注治疗的疗效,预后因素以及不良反应。方法 回顾性的分析2014年4月至2021年4月长海医院收治的149名接受BCG灌注的中、高危NMIBC患者的临床数据。随访时间中位数为25个月（4~85个月）,其中男性130例（87.2%）,女性19例（12.8%）。平均年龄（66.6±10.6）岁。所有患者均行经尿道膀胱肿瘤切除术（transurethral resection of bladder tumor,TURBT）,术后进行规律BCG膀胱灌注。采用累计复发率、累计进展率、1年无复发生存率、平均无复发及平均无进展生存时间评估BCG灌注治疗的疗效,单因素和多因素Cox生存分析探究危险因素,不良反应事件评价标准5.0版（Common Terminology Criteria for Adverse Events Vesion5.0, CTCAE Vesion5.0）评估不良反应情况。结果 1年无复发生存率80.8%（105/130）、累计复发率22.1%（33/149）,平均无复发生存时间49.64（45.18-54.11）个月;累计进展率9.40%（14/149）、平均无进展生存时间48.95（44.23-53.67）个月。单因素分析结果表明膀胱癌复发病史（P=0.003）和临床分期（P=0.058）与灌注预后相关。多因素Cox回归分析结果显示膀胱癌复发病史（P=0.003,HR=3.50）是BCG灌注后肿瘤复发的独立预测因素。86.8%（112/129）的患者出现不良反应,其中1级不良反应38例（29.5%）,2级不良反应71例（55.0%）,3级不良反应3例（2.3%）,无4及5级不良反应。17例无任何不良反应,8.05%（12/149）的患者因不耐受不良反应而中断治疗。结论 中、高危NMIBC患者TURBT术后BCG膀胱灌注治疗效果显著,膀胱癌复发病史是中、高危NMIBC患者BCG灌注后肿瘤复发的独立危险因素。BCG膀胱灌注存在一定不良反应,但大部分不良反应等级较低,患者可耐受。     

恶性黑色素瘤治疗的研究进展

本文着重讨论了影响恶性黑色素瘤预后的因素,化疗,免疫治疗。强调了米尔法兰在化疗中的重要作用;卡介苗,巨噬细胞激活因子,单克隆抗体,肿瘤浸润淋巴细胞在治疗恶性黑色素瘤的研究方面所取得的进展。     

PstS1-卡介苗重组疫苗的构建

目的：构建结核分支杆菌分泌蛋白磷酸盐特异转运系统1（PstS1）的重组卡介苗。方法:以结核分支杆菌H37Rv基因组为模板,通过PCR扩增获得PstS1基因序列;将PstS1基因与大肠杆菌-卡介苗穿梭表达质粒PMD31重组,得到S-PMD31重组质粒,对S-PMD31重组质粒进行HindⅢ、BanHⅠ双酶切及测序鉴定,转化大肠杆菌,用IPTG对工程菌株进行诱导表达,并通过电穿孔技术将S-PMD31重组质粒导入卡介苗中构建重组卡介苗。结果：用引物P1、P2对结核分枝杆菌H37R_V基因组进行PCR扩增获得长为1 100 bp的PstS1基因序列,S-PMD31重组质粒的HindⅢ、BanHⅠ双酶切及测序鉴定证实：PstS1基因正确插入载体PMD31中,并能在大肠杆菌中诱导表达。通过质粒提取及PCR扩增表明重组质粒正确导入卡介苗中。结论：成功地构建了PstS1重组卡介苗,预期能提高卡介苗的免疫原性和保护力。     

新生期卡介苗和乙肝疫苗联合接种对哮喘小鼠IFN-γ、IL-4和IL-17A表达的影响

目的:观察新生期卡介苗(BCG)和乙肝疫苗(HepB)联合接种对哮喘小鼠干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)和白细胞介素17A(IL-17A)表达的影响,探讨BCG和HepB联合接种对气道炎症的影响及可能机制。方法:BALB/c小鼠随机分为BCG和HepB联合接种造模[卵清蛋白(OVA)所致哮喘模型]组(B/H/O组)、BCG接种造模组(B/O组)、HepB接种造模组(H/O组)、BCG和HepB联合接种组(B/H组)、造模组(OVA组)、BCG组、HepB组和生理盐水对照(NS)组,每组6只。B/H/O组和B/H组于第0、7和14天分3次皮下注射1×105CFU的BCG,同时第0和28天分2次下肢腿部肌肉注射HepB 1.5μg,其它组单独接种BCG或HepB。OVA致敏和雾化吸入激发建立哮喘模型;末次激发24 h后取肺组织HE染色;收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞总数计数和嗜酸性粒细胞(EOS)计数;ELISA法检测血清IFN-γ和IL-4及肺组织匀浆IL-17A的水平。结果:肺组织病理观察发现,OVA组、B/O组、B/H/O组和H/O组支气管周围大量炎症细胞浸润,气道上皮细胞增生肥大,B/H/O组和H/O组的炎症程度较OVA组重,B/O组则较OVA组轻。B/H/O组、B/O组和H/O组BALF细胞总数与OVA组比较均下降(P0.05);EOS计数在B/H/O组比B/H组上升(P0.05),B/O组比BCG组上升(P0.05),H/O组比HepB组上升(P0.05)。分别与H/O组、OVA组和NS组比较,HepB组的血清IFN-γ/IL-4比值均升高(P0.05);分别与B/H/O组、B/O组、OVA组和NS组比较,B/H组的血清IFN-γ/IL-4比值均升高(P0.05)。与OVA组比较,B/H/O组和B/O组的肺组织匀浆IL-17A水平均下降(P0.05);与B/O组比较,B/H/O组的肺组织匀浆IL-17A水平进一步下降(P0.05)。结论:卡介苗和乙肝疫苗联合接种有助于减轻哮喘模型小鼠肺部的炎症反应,其机制可能与降低IL-4分泌、提高IFN-γ/IL-4水平和抑制IL-17A的表达有关。     

利用卡介苗配制TB-DNA定量参照品

为了解卡介苗中TB -DNA定性或定量PCR实验的敏感区域 ,配制适合基层医疗单位实验室开展PCR实验的参照品 ,我们以国内结核病人常见病原菌 -结核分枝杆菌、牛分枝杆菌特异性抗原Pab编码基因上的 4 19bp段作为扩增靶序列 ,扩增引物为 5′—ACC、ACC、GAG、CGG、TTC、GCC、TGA—3′、5′—GAT、CTG、CGG、GTC、GTC、CCA、GGT— 3′[1] 。结果 :将卡介苗 1∶1;1∶10 ;1∶10 0 ;1∶10 0 0倍稀释后经LightCycler荧光定量PCR扩增 4 5个循环 ;4个浓度的卡介苗的拷贝数分别为10 6、10 5、10 4、10 3 ,CT值分别为 2 1.10～ 2 …     

疑似全身播散性卡介苗病并多器官功能衰竭死亡1例及文献复习

正卡介苗是一种用人工定向变异或从自然界中筛选所获得的毒力高度减弱的病原微生物(即减毒活疫苗),用于预防结核病。世界卫生组织(WHO)曾指出,接种卡介苗可以有效预防儿童结核性脑膜炎和粟粒性结核~([1])。其接种不良反应常见有脓肿、溃疡、瘢痕、局部淋巴结大~([2]),严重者可出现全身播散性卡介苗病、骨髓炎、过敏性休克等。接种后出现全身播散性卡介苗病的病例较为罕见,据有关报道,其发生率占接种儿童的0.06/百万～1.56/百万,致死