研制人血清中TSH的化学发光免疫检测试剂盒研究

目的 研究研制人血清中TSH的化学发光免疫检测试剂盒.方法 选取有辣根过氧化物酶标记的抗TSHβ亚单位特异性单克隆抗体(mAb),与抗TSHβ亚单位的另一个mAb相配对,使用鲁米诺做底物,采取两步法建立起双位点夹心法来进行研制人血清中TSH的化学发光免疫检测试剂盒.结果 这种检测方法具有较好的灵敏度,其中批内的CV平均是4.7％,批间的平均CV是8.4％.本次检测实验与LH、FSH及HCG都没有交叉反应.经过测试部分实验样品,得出该试剂与国外同类试剂测定结果有明显的相关性(r=0.984).结论 实验研究中的检测方法具有较好的灵敏度及准确性,与同类产品相比也相对简便、快捷,花费成本低,在临床检测与科研上值得使用与推广.     

依据CLSI EP9-A3评价两种方法学检测糖类抗原242的可比性

目的评价两种方法学检测糖类抗原242(CA242)结果的可比性,以评估磁微粒化学发光法检测CA242是否能够满足临床的需求。方法根据美国临床和实验室标准协会(CLSI)新指南EP9-A3文件要求,收集2018年1-7月首都医科大学附属北京康复医院和北京大学首钢医院肿瘤患者检测剩余的新鲜血清标本100例,以Fujirebio Diagnostics AB的酶联免疫法为参比方法,安图生物的磁微粒化学发光法为评估方法,对2种方法检测CA242的结果进行方法学比对和偏移评估。选择Passing-Baklok回归方法进行线性拟合,采用Wilcoxon符号秩检验及Spearman相关分析。结果在4.31~295.63 U/ml范围内,2种方法学的CA242检测结果具有较好的相关性(r=0.991,截距0.652)。参比方法和评估方法比较,差异无统计学意义[(53.75±6.69)U/ml比(56.11±6.86)U/ml,t=0.246,P=0.806]。将CA242的医学决定水平25.00 U/ml代入选取的最佳回归模型拟合方程,计算得到的相对偏移3.52%,<1/2TEa±12.5%(TEa为国家卫生健康委临床检验中心室间质量评审允许总误差),满足要求。结论安图生物的磁微粒化学发光法和Fujirebio Diagnostics AB酶联免疫法检测CA242结果具有可比性,满足临床需要。     

化学发光免疫法诊断女性血清性腺激素的作用

目的研究化学发光免疫法诊断女性血清性腺激素的作用。方法选取时间为2020年9月至2020年12月,将830例临床确诊为不孕症的女性设为研究组,并选830例健康体检女性设为对照组,均进行化学发光免疫法诊断,分析两组血清性腺激素水平以及化学发光免疫法的诊断准确率。结果分析两组LH、FSH、P、PRL、T、E2水平发现,对比对照组,研究组LH、FSH、PRL、T水平较高(P<0.05),P和E2的含量较低(P<0.05),组间数据对比有统计学价值;化学发光免疫法的诊断准确率与确诊结果没有差异(P>0.05)。结论化学发光免疫法诊断女性血清性腺激素准确率较高,对临床不孕症诊断具有应用价值。     

化学发光法在梅毒特异性抗体检测中低值结果的分析

目的：探讨化学发光微粒法（CMIA）在梅毒特异性抗体低值结果中的临床应用。方法选取该院2013年12月—2014年6月该院和门诊病人常规免疫检测标本5673例，使用化学发光微粒法（CMIA）对5673人份标本进行初筛，阳性标本进一步使用梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）和甲苯胺红不加热血清凝集实验（TRUST）进行了对比检测。结果使用CMIA法检测5673份标本中，阳性标本为347例，占总标本数6.11%。其中S/CO值大于10的标本为204例、S/CO值5~10的标本81例、S/CO值1~5的标本62例。在347例CMIA法阳性标本中，TPPA检测为阳性的305例（87.8%）TRUST检测为阳性的130例（37.5%）。2种方法比较差异有统计学意义（P＜0.005）。结论 CMIA在梅毒特异性抗体的检测中，灵敏度较好，适合大批量筛查。对于S/CO值＜5的标本，应结合TPPA和TRUST进行复检，有条件的实验室可使用免疫印迹法进行确证。     

全段甲状旁腺激素测定在肾脏疾病中的应用

为评价在肾脏疾病中检测全段甲状旁腺激素的临床应用价值,测定44例尿毒症组,29例透析治疗组和26例肾炎组患者血浆全段甲状旁腺激素(iTPH)。结果表明尿毒症组、透析治疗组血浆iTPH浓度与31名对照组有显著性差异(P<0.01),肾炎组iTPH浓度与对照组无显著性差异(P>0.05)。提示:肾功能衰竭期iTPH浓度增高,甲状旁腺功能亢进。     

人心肌肌钙蛋白玉鲁米诺化学发光酶免疫分析法的建立

目的:制备两株抗人心肌肌钙蛋白玉(human cardiac troponin Ⅰ,cTnⅠ)单克隆抗体,建立鲁米诺化学发光酶免疫分析法。方法:制备腹水型单抗、饱和硫酸铵沉淀法和亲和层析柱Protein G 纯化抗体,并通过SDS-PAGE 和ELISA 对抗体特异性进行鉴定,建立鲁米诺化学发光酶免疫分析法,并对30 份临床血清样本进行检测。结果:本实验制备的两株单抗(分别命名为Ab1、Ab3;亚型都是IgG1)能够识别以cTnⅠ单体、cTnⅠ-C 复合物和cTnⅠ-T-C 复合物不同形式存在的cTnⅠ。Ab1、Ab3 的效价分别为1 :80 万和1 :40 万,亲和力常数分别为1.62×10⁹L/ mol、2.60×10⁸ L/ mol。利用2 株单抗建立的鲁米诺化学发光酶免疫分析法检测范围为:6.25 ~ 400 ng/ ml。对30 份临床样本进行检测,阳性检出率为77.3%,阴性检出率为100%。结论:建立了可以检测以cTn玉单体、cTnⅠ-C 和cTnⅠ-T-C 复合物形式存在的cTnⅠ的鲁米诺化学发光酶免疫分析法,具有更高的实用性。     

制备醛固酮多克隆抗体建立检测血浆醛固酮的化学发光免疫分析法

目的：制备可用于免疫分析的醛固酮(ALD)多克隆抗体,并建立基于生物素-链霉亲和素放大系统的ALD化学发光免疫分析方法,用于测定人血液中的ALD含量。 方法：对ALD进行化学改造,制备醛固酮肟,再与BSA偶联制备免疫原,免疫兔,制备抗ALD多克隆抗体。以生物素-链霉亲和素放大系统采用竞争法建立ALD化学发光免疫分析方法。结果：经检测免疫的3号兔获得的抗ALD抗体灵敏度最高,50%抑制率（IC₅₀）ALD浓度是268 pg/ml。用该抗体建立的化学发光免疫分析法的检测范围为62.5~2 000 pg/ml,灵敏度为 23.7 pg/ml,批内变异系数为6.9%~9.5%,批间变异系数为8.5%~12.7%,回收率范围为93.1%~104.1%,稀释实验测定值与理论值呈线性相关,相关系数为r=0.996,与放射免疫分析试剂盒的相关性方程分别为y=0.932x+4.596,相关系数r=0.948（n=95）。结论：建立的检测ALD的化学发光免疫分析法符合临床应用的基本要求。     

辣根过氧化物酶化学发光测定体系的增敏研究及应用

辣根过氧化物酶(HRP)在酶联免疫分析中得到十分广泛地应用.以往HRP 多用比色法来测定,近来有人用高灵敏度的化学发光法测定HRP.然而在这方面比较祥细的研究还未见报道.本文为了提高HRP 的化学发光检测灵敏度,对发光剂鲁米诺进行了活化,并详细地研究了增敏剂对碘苯酚增敏的最佳