妊娠对肺高压大鼠肺动脉环张力及肺小动脉影响的实验研究

目的:通过观察大鼠肺动脉环张力及肺小动脉形态学变化,探讨肺动脉高压发病机理及妊娠对肺动脉高压疾病进展影响的潜在机制。方法:雌性,6周龄,SD大鼠55只,随机分为四组:空白对照组(n=10);野百合碱组(MCT,n=13);妊娠组(n=12);妊娠MCT组(n=20)。动物模型[1]完成后经颈静脉置管及股动脉置管采集血流动力学数据,并取大鼠三级肺动脉环,观察ACh对各组大鼠肺动脉环舒张作用;同时采集肺组织进行HE染色,观察肺小动脉损伤情况。结果:与MCT相比,妊娠MCT组MPAP显著降低(P<0. 05); MCT组ACh诱导的内皮依赖性动脉舒张率比空白对照组显著降低(P<0. 05);妊娠MCT组ACh诱导的内皮依赖性动脉舒张率比妊娠组及MCT组均显著降低(P<0. 05);妊娠组与空白对照组大鼠肺血管内皮依赖性舒张功能无显著性差异(P>0. 05); MCT组、妊娠MCT组大鼠肺动脉壁及肺小动脉弹性中膜厚度增加,内径逐渐变窄,肺小动脉有微血管瘤形成,部分小血管明显闭塞;妊娠MCT组较MCT组增厚肺小动脉密度明显增加(P<0. 05)。结论:妊娠会降低肺高压大鼠肺动脉内皮依赖性舒张功能,促进肺小动脉损伤,加重肺动脉高压。     

HDAC1和CDK1在结肠癌组织中的表达及其临床意义

目的:研究组蛋白去乙酰化酶1（histone deacetylase 1,HDAC1）和细胞周期蛋白依赖性激酶1（cyclin-dependent kinase 1,CDK1）在结肠癌组织中的表达水平及其与患者临床病理特征及预后的关系。方法:收集2012年2月至2013年6月在本院普外科进行手术切除的51例结肠癌患者的肿瘤组织和癌旁非肿瘤组织，采用qRT-PCR法检测组织中HDAC1和CDK1 mRNA相对表达量，采用免疫组织化学染色法检测HDAC1和CDK1蛋白阳性表达率，分析肿瘤组织中HDAC1和CDK1表达的相关性及其与患者肿瘤直径、淋巴结转移等临床病理特征的关系，采用Kaplan-Meier生存函数分析HDAC1和CDK1不同表达情况与患者5年总生存率的关系。结果:肿瘤组织中HDAC1和CDK1 mRNA表达水平和蛋白阳性表达率均高于癌旁非肿瘤组织（P＜0.05）；肿瘤组织中HDAC1表达水平与CDK1表达水平呈显著正相关（P=0.012）；肿瘤组织中HDAC1表达与患者肿瘤直径和组织分化程度有关（P＜0.05），CDK1与肿瘤直径、TNM分期、分化程度、淋巴结转移有关（P＜0.05）；HDAC1、CDK1阳性表达患者5年总生存率均低于其相应阴性表达患者（P＜0.05），HDAC1和CDK1共阳性表达患者5年总生存率低于HDAC1和（或）CDK1阴性患者（P＜0.05）。结论:HDAC1和CDK1在结肠癌组织中高表达，与患者不良预后有关且两者呈正相关，推测两者在促进结肠癌进展中可能存在协同作用。     

miR-142-5p通过影响上皮间质转化抑制肺腺癌H1650细胞的侵袭与迁移

目的：探讨肺腺癌组织中miR-142-5p的表达及其对H1650细胞增殖、侵袭、迁移及上皮间质转化（epithelieal-mesenchymal transition，EMT）的影响及其作用机制。方法：收集2014年1月至2015年1月在河北医科大学第四医院胸外科行肿瘤切 除并经病理证实的107例肺腺癌患者的癌组织及其癌旁组织标本，以及人肺腺癌细胞系H1650、HCC827、 A549、 H1975、PC9和人 支气管上皮细胞BEAS-2B， 用qPCR实验检测肺腺癌组织及细胞中miR-142-5p的表达水平及其与患者临床特征的关系。分别用 miR-142-5p模拟物（mimics）、miR-阴性对照质粒（miR-NC）转染H1650细胞后， 用CCK8、细胞划痕愈合和Transwell侵袭实验分 别检测H1650细胞的增殖、侵袭和迁移能力。使用生物信息学工具预测miR-142-5p的靶基因，通过双荧光素酶报告基因实验验 证miR-142-5p对靶基因的调控作用，Western blotting检测细胞周期蛋白依赖性激酶5（cyclin-dependent kinase 5，CDK5）及EMT 相关蛋白的表达水平。结果：肺腺癌组织及细胞系中miR-142-5p表达水平显著低于癌旁组织及BEAS-2B细胞（均P<0.01）；107 例肺腺癌组织中， 61例（57.01%）低表达miR-142-5p，其表达水平与患者的TNM分期、淋巴结转移密切相关（均P<0.01）。转染 miR-142-5p模拟物后， H1650细胞中miR-142-5p高表达，细胞的增殖、侵袭和迁移能力显著降低（均P<0.05或P<0.01）。生物信息 学工具预测CDK5是miR-142-5p的靶基因，经双荧光素酶报告基因验证，miR-142-5p可显著降低H1650细胞中CDK5的表达水 平，显著提高E-cadherin表达，降低N-cadherin和Snail的表达水平（均P<0.01）。结论：miR-142-5p在肺腺癌组织和细胞中呈低表 达状态，其通过下调CDK5表达影响EMT抑制H1650细胞的侵袭与迁移能力。     

microRNA-613调控CDK14来抑制老年胶质瘤患者瘤细胞的增殖和侵袭作用

目的 探讨microRNA-613调控细胞周期蛋白依赖性激酶14(CDK14)通路来抑制老年胶质瘤患者瘤细胞增殖和侵袭的机制。方法 购自上海北诺生物科技有限公司的人脑胶质瘤细胞株U251共24株,分为shNC组、shmicroRNA-613组、Vector组、microRNA-613组,每组各6株; Western Blotting法和qRT-PCR法检测敲减microRNA-613和过表达microRNA-613后的人脑胶质瘤细胞株U251中CDK14蛋白表达水平,CCK-8细胞增殖实验、Transwell小室实验验证敲除microRNA-613和过表达microRNA-613后U251细胞的增殖、侵袭能力。结果 人胶质瘤细胞株U251敲减microRNA-613后CDK14蛋白表达增加(P<0.05); 人胶质瘤细胞株U251过表达microRNA-613后CDK14蛋白表达减少(P<0.05); 转染第24、36、48 h microRNA-613组U251细胞增殖率P<0.05); microRNA-613组U251细胞侵袭能力>Vector组,shNC组>shmicroRNA-613组(P<0.05)。结论 microRNA-613可通过调控CDK14信号转导通路来抑制人脑胶质瘤细胞U251增殖、转移。     

肾母细胞瘤MIB-1（Ki-67增殖指数）和p27kip1表达及与预后的关系

目的:探讨肾母细胞瘤MIB-1（Ki-67增殖指数）和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p27kip1的表达及与预后的关系。方法:经医院伦理委员会批准，连续纳入2008年1月至2013年8月在我院就诊的肾母细胞瘤患者样本作为研究对象，观察p27kip1和MIB-1阳性表达与患者临床特征的关系。结果:肿瘤组织中MIB-1阳性表达率高于正常肾组织，p27kip1阳性表达率低于正常肾组织，差异均有统计学意义（P＜0.05）。MIB-1和p27kip1表达与性别、年龄、病理分型、发病部位等均无相关性（P＞0.05），与临床分期存在相关性（P＜0.05）。MIB-1表达阳性患者中位生存时间低于阴性患者，而p27kip1表达阴性患者中位生存时间低于阳性患者（χ2=6.979、15.247，P=0.008、0.000）。结论:MIB-1表达增加和p27kip1表达降低与肾母细胞瘤的发生、发展、预后密切相关，临床应根据其表达情况进行针对性干预，以改善患者的预后。     

血清胆红素对内皮依赖性血管舒张功能的影响分析

目的：探讨血清胆红素对内皮依赖性血管舒张功能的影响。方法将50例心血管疾病患者作为观察组，同时选取50例健康体检者作为参考组，采用超声对2组患者内皮依赖性血管舒张功能进行观察分析，同时经自动生化分析仪对血清胆红素水平进行测定，观察二者之间关系。结果观察组患者血清总胆红素、直接胆红素、间接胆红素水平分别为（12.02±2.35）、（3.46±1.08）、（6.78±3.02）μmol/L，参考组患者血清总胆红素、直接胆红素、间接胆红素水平分别为（14.51±3.43）、（3.76±1.31）、（10.85±3.19）μmol/L，2组以上指标比较差异均有统计学意义（P<0.05）。观察组患者血管舒张功能（FMD）显著低于参考组（P<0.05），观察组患者反应性充血血流量变化率亦显著低于参考组（P<0.05）；经分析，患者血清总胆红素与FMD、反应性充血血流量变化之间存在显著正相关关系，而间接胆红素与FMD、反应性充血血流量变化亦呈显著正相关关系。结论血清胆红素对内皮依赖性血管舒张功能产生直接影响，通过对其水平的观察能够监测患者心血管疾病发生情况。     

细胞周期蛋白依赖性激酶9及其抑制剂研究进展

细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)在细胞中不仅负责细胞周期调控,也在细胞转录过程中作为调控因子发挥着重要作用。CDK9作为CDK家族的一员,在细胞转录调控中起重要作用。CDK9和细胞周期蛋白T1结合形成正性转录延长因子b,后者通过磷酸化RNA聚合酶Ⅱ的碳端结构域CTD来调节转录延伸。CDK9抑制剂以竞争性结合的方式,抑制CDK9介导的转录延伸阶段。简要介绍CDK9的功能及其在肿瘤中的作用机制,并总结CDK9抑制剂的研究进展。     

非阻塞性冠状动脉粥样硬化患者血管内皮功能与左室舒张功能的关系

目的 探讨非阻塞性冠状动脉粥样硬化患者血管内皮功能与左室舒张功能的关系。方法 选取2013.6～2015.6宣武医院心脏内科收治的因胸痛疑诊冠心病、经冠脉造影检查证实为非阻塞性冠状动脉粥样硬化症（冠状动脉狭窄＜50%）患者119例，其中男性55例，女性64例，年龄31～85岁，平均年龄60岁。专业培训人员采用标准化问卷调查记录患者临床资料，行超声心动图和肱动脉血流介导内皮依赖性血管舒张功能（FMD）检测，分为FMD正常组（FMD＞10%）和减低组（FMD≤10%）。结果 两组人群基本临床资料无显著性差异（P值均＞0.05）。左室结构指标室间隔厚度、左室后壁厚度、左室舒张末内径、左室质量指数两组间比较无显著性差异（P值均＞0.05）。左室收缩功能指标每搏输出量、心输出量、左室短轴缩短率及射血分数组间比较也无显著性差异（P值均＞0.05）。FMD降低组较FMD正常组E/A比值显著减低（P＜0.001）、E/e’比值显著升高（P=0.006），控制年龄等影响因素，偏相关分析显示FMD与E/A比值存在显著正相关（r=0.261，P=0.005），FMD与E/e’呈显著负相关（r=-0.203，P=0.033）。结论 在非阻塞性冠状动脉粥样硬化人群中，内皮功能与左室舒张功能密切相关，内皮功能不全患者左室舒张功能明显减退。     

Roscovitine对TNF-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖及细胞周期的影响

目的观察Roscovitine对TNF-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及细胞周期的影响。方法组织贴块法培养大鼠VSMC细胞,采用TNF-α诱导其增殖,加入不同浓度的Roscovitine预处理15 h,将细胞分为:对照组、TNF-α组、Roscovitine 5、10、15、30μmol·L~(-1)组。MTT比色法检测细胞增殖活性;Western blot检测增殖细胞核抗原(PCNA);流式细胞仪检测细胞周期;荧光定量RT-PCR及Western blot检测细胞周期蛋白(Cyclin A、Cyclin B、Cyclin D、Cyclin E)、细胞周期蛋白依赖激酶(CDK4、CDK5)、细胞周期抑制蛋白(p53、p21、p27)的表达。结果 Roscovitine能抑制VSMC增殖;抑制细胞周期从G_0/G_1期向S期转化。与TNF-α组比较,Roscovitine 5、10、15、30μmol·L~(-1)组能降低细胞周期蛋白Cyclin A、Cyclin B、Cyclin D、Cyclin E蛋白表达,降低细胞周期蛋白依赖激酶CDK4、CDK5蛋白表达,升高细胞周期抑制蛋白p53、p21、p27蛋白表达(P<0.05)。结论 Roscovitine可抑制大鼠VSMC细胞周期进程及增殖活性。     

治疗流感新药baloxavir marboxil的药理作用及临床评价

流行性感冒发病率高,传染性强,且流感并发症的发病率和死亡率最高。2018年10月,美国食品药品管理局(Food and Drug Administration,FDA)加速批准新型的帽依赖性核酸内切酶抑制剂baloxavir marboxil上市,用于治疗12岁及以上有流感症状且不超过48 h的急性单纯型流感患者。临床研究显示,baloxavir marboxil对流感有较好的客观缓解率。本文对其药理作用、临床评价、安全性及用法用量等进行简要概述。