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1.
Background Osteosarcoma is characterized by high neovascularization and a high propensity for metastasis through bloodstream. This study was to examine whether there is evidence for vasculogenic mimicry in osteosarooma and to illustrate mechanism of tumor blood vessels formation in osteosarcoma. Methods Osteosarcoma cell lines (U-2OS) were tested for their ability to form tubular networks in three-dimensional culture containing type I collagen. The structures of the tubular networks were observed with phase contrast microscope and transmission electron microscope (TEM). Morphometric studies using hematoxylin and eosin (HE) stain and CD31 immunohistochemical stain to show tumor-lined channels in human osteosarooma were also performed. Results Observation with light microscope and TEM showed that highly aggressive osteosarcoma cell lines (U-2OS) formed networks containing channels when grown in three-dimensional culture containing type I collagen, in the absence of endothelial cells or fibroblasts. Morphometric observation using HE stain and CD31 immunohistochemical stain showed that tumor cell-lined channels were also detected in vivo in osteosarcoma; by comparison, all vascular areas in the pedicel of osteochondroma or outside osteochondroma were endothelial-lined. Conclusion These observations strongly suggest that aggressive osteosarcoma cells may generate vascular channels that facilitate tumor perfusion independent of tumor angiogenesis and have the ability of vasculogenic mimicry. 相似文献
2.
Effect of human osteopontin on proliferation, transmigration and expression of MMP-2 and MMP-9 in osteosarcoma cells 总被引:14,自引:2,他引:12
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Background To explore the effect of human osteopontin (hOPN) on the proliferation, transmigration and expression of matrix metallproteinase-2 (MMP-2) and matrix metallproteinase-9 (MMP-9) in osteosarcoma (OS) cells in vitro.Methods The prokaryotic-expression vector of hOPN was produced, hOPN was then subcloned into E. coli BL21 (DE3) cells and purified with ProBond^TM Columns. The proliferation, cell cycle and the expression of cycUn A in OS cells were investigated by using MTT assay, flow cytometry and Western blot respectively. The transmigration of OS cells was checked by using transwell cell culture chamber.The micro-pore-filter-membrane system was used to study the chemiotaxis of hOPN to OS cells. The levels of total protein were examined according to Coomassie Brilliant Blue manuals. The expression of MMP-2 and MMP-9 were evaluated by detecting the volume of degradation of gelatin on SDS-PAGE gel.Results The prokaryotic-expression vector of hOPN and purified hOPN protein were achieved hOPN promoted OS cells proliferation in a dose-dependent manner, and stimulated cyclin A expression in OS cells to accelerate cell division cycle, hOPN facilitated the trans-membrane migration of OS cells.hOPN also enhanced the secretion of MMP-2 and MMP-9 in OS cells.Conclusion hOPN could stimulate cyclin A expression in OS cells, hOPN has chemiotaxis to OS cells and increases their transmigration, hOPN enhances the secretion of MMP-2 and MMP-9 in OS cells. 相似文献
3.
利用基因芯片技术筛选不同转移能力骨肉瘤细胞差异表达基因 总被引:14,自引:0,他引:14
目的:运用基因芯片技术研究骨肉瘤转移相关基因表达.方法:提取具有不同转移特性的骨肉瘤细胞总RNA,反转录制备杂交探针,应用基因芯片筛选与骨肉瘤转移相关的基因.杂交信号用ScanArray3000扫描,结果用ImaCene3.0软件分析.结果:对原位及转移骨肉瘤细胞基因表达诺分析,发现两种肿瘤细胞中存在差异表达基因,其中有抑癌基因、转移相关蛋白基因、细胞周期蛋白基因等,与肿瘤发生发展密切相关.结论:基因芯片技术对肿瘤转移机制研究有重要意义。 相似文献
4.
环氧合酶-2在骨肉瘤中的表达及其意义 总被引:12,自引:0,他引:12
目的 探讨环氧合酶 2 (COX 2 )在骨肉瘤中的表达及其意义。方法 应用免疫组织化学染色研究人骨肉瘤组织、骨类肿瘤样病变 (骨纤维结构不良 )及正常骨组织中COX 2的表达 ,分析其表达差异性。结果 COX 2在正常骨组织中不表达 ,在骨肉瘤中表达阳性率为 6 7.7% ,骨纤维结构不良表达阳性率为 2 3.5 % ,后两者间的差异具有极显著性意义 (P <0 .0 1) ;在发生转移的骨肉瘤中COX 2表达阳性率为 82 .4 % ,明显高于未发生转移组 (5 0 .0 % ) ,两者差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。结论 骨肉瘤组织中存在COX 2的高表达 ,COX 2与骨肉瘤的发生发展有密切关系。 相似文献
5.
6.
RNA干扰沉默缺氧诱导因子-1α治疗骨肉瘤的实验研究 总被引:11,自引:1,他引:10
目的 观察靶向缺氧诱导因子 (HIF)- 1α的短发夹状小干扰RNA基因转染对骨肉瘤生长的影响。方法 针对HIF- 1α构建短发夹状siRNA真核表达载体 (pSilencer) HIF并转染骨肉瘤细胞系(SaOS) 2。骨肉瘤细胞置于缺氧诱导培养基中培养。逆转录 聚合酶链反应 (RT -PCR)和免疫印迹沉淀观察HIF -1α的基因沉默效果。四甲基偶氮唑盐 (MTT)比色分析检测细胞体外增殖活力,透射电镜,原位末端标记TUNEL法,AnnexinV/PI双标记法检测细胞的凋亡。同时,通过裸鼠移植瘤模型观察HIF- 1α基因沉默后对骨肉瘤体内治疗效果。结果 测序证实成功构建HIF- 1α的短发夹状siRNA真核表达载体pSilencer HIF,转染骨肉瘤细胞后,HIF -1α基因表达显著抑制 ( 90% )。与对照组比较,pSilencer HIF转染组骨肉瘤细胞缺氧状态下的增殖活性显著降低。缺氧培养 72h后,透射电镜、TUNEL法显示细胞典型凋亡特征,AnnexinV/PI双标检测转染组细胞凋亡率为 18. 71% ±0. 98%,明显高于pSilencer neo空载体转染组和未转染组 (P< 0 .01 )。裸鼠移植瘤实验显示pSilencer HIF转染组肿瘤生长减慢,成瘤率下降,肿瘤组织中可见大量坏死组织。结论 靶向HIF- 1α基因的短发夹状siRNA可以有效阻断骨肉瘤缺氧耐受转导通路,抑制骨肉瘤细胞的生长。 相似文献
7.
蜂毒素诱导骨肉瘤细胞U2OS凋亡与坏死的实验研究 总被引:11,自引:1,他引:10
目的:研究蜂毒素是否能够诱导骨肉瘤细胞U2OS凋亡与坏死.方法:U2OS经不同浓度蜂毒素处理后,采用台盼蓝排染法测定细胞增殖抑制率,利用单克隆抗体,通过流式细胞仪检测AnnexinV、Apo2.7及Fas蛋白的表达.结果:64 mg/L蜂毒素作用U2OS 12 h、24 h,其坏死率在80%以上.16 mg/L、32 mg/L蜂毒素对细胞增殖有明显抑制作用,并且可诱导细胞凋亡和坏死的产生,增加细胞Aap2.7及 Fas 蛋白的表达.结论:蜂毒素高剂量有明显杀伤U2OS的作用,低剂量具有促细胞凋亡作用,并能上调Fas蛋白的表达. 相似文献
8.
9.
10.
蜂毒素对骨肉瘤细胞系细胞增殖的影响 总被引:7,自引:0,他引:7
为了解蜂毒素对骨肉瘤细胞生长、增殖的作用。以骨肉瘤U2OS细胞体外培养,采用台盘蓝排染法观察蜂毒素对细胞生长的影响,MTT法测定细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果:蜂毒素可明显抑制U2OS细胞生长、增殖,下调PCNA的表达,对细胞周期的影响表现为S期细胞的阻滞。提示蜂毒素具有抑制骨肉瘤U2OS细胞株生长、增殖的作用。 相似文献