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1.
Ribozyme基因对人肿瘤细胞株MCF—7/Adr多药抗药性的靶向逆转   总被引:17,自引:0,他引:17  
设计合成能切割人mdr-1mRNA的Ribozyme基因并构建成真核细胞表达克隆(pHβApr-1new/5mR3),以靶向切割耐药癌细胞株(MCF-7/Adr)的mdr-1mRNA,抑制P-糖蛋白的表达,逆转多药抗药性。方法将含Ribozyme基因的真核细胞表达克隆转染MCF-7/Adr细胞,采用斑点杂交和Northern杂交技术测得Ribozyme能在细胞中稳定表达,并使细胞中mdr-1mRNA降解83.5%,P-糖蛋白表达明显下降(ABC法)。结果Ribozyme基因转染的MCF-7/Adr细胞耐药性下降至敏感细胞的6倍,而无Ribozyme基因转染的MCF-7/Adr耐药性是敏感细胞的1000倍。结论这种基因调控技术介入可能将为肿瘤耐药的治疗开辟一个新领域。  相似文献
2.
Huang S  Kong B  Ma Y  Jiang S 《中华医学杂志》2002,82(13):911-914
目的:探讨三氧化二砷(As2O3)对人卵巢癌耐药细胞系3AO/cDDP细胞生长的影响及其机制。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法,检测不同浓度As2O3作用后,3AO/cDDP细胞的生长抑制率;采用流式细胞技术检测细胞凋亡率,细胞周期变化,以及Fas、FasL基因表达的变化。所有结果均与人卵巢癌细胞系3AO细胞相比较;采用细胞骨架染色法观察3AO/cDDP细胞凋亡细胞形态变化,通过吖啶橙染色,荧光显微镜观察As2O3作用后3AO细胞的形态变化。结果:As2O3能明显抑制3AO/cDDP细胞的增殖,抑制作用呈时间和剂量依赖性(P<0.05);在定一浓度范围内,3AO/cDDP细胞凋亡率与As2O3的浓度和作用时间呈依赖关系,诱导凋亡的最适浓度是3μmol/L;As2O3低浓度时,3AO/cDDP细胞周期S期通过受阻,高浓度时诱导S期细胞凋亡;As2O3作用后,两种细胞系Fas基因的表达均呈升调节,FasL基因的表达无变化;与3AO细胞相比,差异无显著意义(P>0.05);As2O3作用后3AO及3AO/cDDP形成典型的凋亡小体。结论:As2O3通过Fas/FasL系统,诱导S期细胞凋亡,有效地抑制人卵巢癌耐药细胞系细胞的生长。  相似文献
3.
野生型survivin表达的上调促进胃癌对多西他赛的耐药性   总被引:4,自引:2,他引:2  
目的研究胃癌组织survivin基因各转录变异体表达情况及其与胃癌化疗药物抗药性的关系。方法采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR)技术,对39例胃恶性肿瘤患者肿瘤标本中的survivin转录变异体进行定量检测。采用组织培养肿瘤药敏实验(HDRA)技术,检测胃癌组织对多种化疗药物的敏感性,并且分析该敏感性与survivin转录变异体表达的关系。结果在39例胃癌组织标本中,survivin的表达率100%(39/39),survivin2B的表达率795%(31/39),survivin△Ex3的表达率667%(26/39)。胃癌标本对顺铂、丝裂霉素、5氟尿嘧啶、多西他赛(TXT,商品名泰索帝)和双氟脱氧胞苷在体外实验中的敏感率分别是368%(14/38)、312%(10/32)、231%(9/39)、205%(8/39)和125%(4/32)。泰索帝耐药组中患者野生型survivin的表达水平显著高于泰索帝敏感组(P=0021)。结论研究结果提示野生型survivin的表达促进了胃癌患者对泰索帝的抗药性。  相似文献
4.
野生型p53基因提高肝癌细胞化疗药物敏感性的实验研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
目的:研究野生型p53(wtp53)提高肝癌细胞化疗药物敏感性的作用.方法:采用p53基因型不同的三种人肝癌细胞株HepG2 (部分wtp53)、Hep3B(p53-/-)和 PLC/PRF/5(mtp53),观察携wtp53基因的重组腺病毒联合化疗药物争光霉素(bleomycin,bleo)、丝裂霉素(mitomycin, mito)或甲氨蝶呤(methotrexate, meth)对肝癌细胞的杀伤效应.结果:HepG2、Hep3B和 PLC/PRF/5分别耐受600 μg/ml bleo、100 μg/ml mito或1 000 μg/ml meth,但转入wtp53基因后再使用上述质量浓度范围的化疗药物,则肝癌细胞出现了明显的被杀伤效应.结论:wtp53基因能提高肝癌细胞对化疗药物的敏感性,wtp53基因联合化疗药物治疗可望开辟克服肝癌耐药的新途径.  相似文献
5.
NF-κB抗凋亡介导肺腺癌群集耐药   总被引:3,自引:1,他引:2  
目的:探讨NF-κB在肺腺癌群集耐药中的作用及可能机制. 方法:利用多细胞球(multicellular spheroids, MCS)模型模拟具有细胞间黏附特性的实体瘤;比较MCS与单层细胞(monolayer cells, MC)的药物敏感性的差异及阻断NF-κB信号转导通路后药物敏感性的变化. 采用凝胶电泳迁移率改变法(electrophoretic mobility shift assay , EMSA)检测NF-κB的活性. PI (propidiumiodium)染色法流式细胞术检测细胞凋亡. 间接免疫荧光法流式细胞术检测Bcl-xL,Bcl-2. 结果:MCS由多层细胞组成,细胞间黏附广泛而紧密;可见镶嵌连接. 与MC相比,MCS的药物敏感性显著减弱;NF-κB活性高;Bcl-xL,Bcl-2表达量高. 阻断NF-κB信号转导通路后,MCS与MC的半数抑制浓度下降,以MCS显著. 阻断NF-κB信号转导通路并加用药物处理后,细胞凋亡率明显升高,Bcl-xL,Bcl-2表达明显下降. 结论:NF-κB通过上调Bcl-xL,Bcl-2抗凋亡诱导肺腺癌群集耐药.  相似文献
6.
原发性肾癌组织中MDR1和MRP基因的表达   总被引:3,自引:0,他引:3  
①目的 研究肾癌组织中多药耐药 (MDR1)基因和多药耐药相关蛋白 (MRP)基因的mRNA表达及其临床意义。②方法 应用定量逆转录聚合酶链反应 (RT PCR) ,检测 2 0例原发性肾癌组织、10例正常人肾脏组织新鲜标本MDR1和MRP基因的mRNA表达水平。③结果 正常肾脏组织和肾癌组织均有MDR1和MRP基因表达 ,肾癌组织MDR1基因表达水平低于正常肾脏组织 ,MRP基因表达水平高于正常肾脏组织 ,差异有显著性 (t=2 .2 93,2 .96 8,P <0 .0 5 ,0 .0 1)。MDR1和MRP基因的表达与肾癌的病理类型、病理分期和组织学分级无关 ,与肾癌病人的无进展生存期无关 ,正常肾脏组织的MDR1基因和MRP基因的表达呈高度正相关关系 (r =0 .932 ,P<0 .0 1) ;肾癌组织MDR1基因和MRP基因的表达无明显相关关系。④结论 MDR1基因和MRP基因复合表达与肾癌固有的多药耐药现象有关  相似文献
7.
应用mRNA差异显示技术筛选卵巢癌耐药相关基因   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的 筛选卵巢癌泰素耐药相关基因。方法 采用间歇诱导法建立了卵巢癌泰素耐药细胞株Skov3/Taxl-25;采用mRNA DD比较Skov3/Taxol-25对泰素耐药增加44倍,同时对顺铂也产生了耐药。比较Skov3和Skov3/Taxol-25的mRNA,获得22个差异条带。对其中5个差异条带进行了DNA序列测定,有3个与已知的基因高度同源,分别为tPA、Kiaa0372和LDLC。2个为未知  相似文献
8.
应用p75NTR分选食管肿瘤干细胞并鉴定其生物学特性   总被引:2,自引:0,他引:2       下载免费PDF全文
目的:应用p75NTR进行人食管肿瘤干细胞的分选,并对其生物学特性进行鉴定。方法:对人食管癌标本癌细胞及食管癌细胞株TE-1、Eca109进行培养,应用流式细胞仪检测p75NTR在人食管癌细胞(esophageal cancer cells,ECCs)中的表达,应用磁珠分选(MACS)法进行p75NTR阳性细胞与阴性细胞的分选,观察p75NTR阳性细胞的增殖、分化及软琼脂克隆形成能力,并进行裸鼠接种以观察其致瘤能力;应用化疗药物作用于ECCs后检测其中p75NTR阳性细胞与阴性细胞存活率,以评价p75NTR阳性细胞对化疗药物的耐受性。结果:8个食管肿瘤细胞系(株)中,除SHEC-1、SHEC-5未检测到p75NTR阳性细胞外,其余6个细胞系(株)SHEC-4、SHEC-6、SHEC-7、SHEC-8、Eca109、TE-1中均检测到p75NTR阳性细胞,阳性细胞比例分别为 2.71%、0.32%、3.35%、1.13%、2.15%、0.45%。与阴性及未分选细胞相比,MACS分选后的p75NTR阳性细胞具有较强的增殖能力,具有分化产生其他表型细胞的能力,在软琼脂中具有较强的克隆形成能力(P<0.01);行裸鼠接种时,p75NTR阳性细胞表现出较强的致瘤性,其中SHEC-7细胞只需2×103个即可致瘤,其致瘤能力是未分选细胞的50倍。化疗药物分别作用于p75NTR阳性细胞与阴性细胞48 h后,p75NTR阳性细胞的存活比例明显高于阴性细胞(P<0.05)。结论:人食管肿瘤细胞中p75NTR阳性细胞具有自我更新、分化、增殖能力,对化疗药物具有较强的耐受性,并具有较强的致瘤能力,具有肿瘤干细胞的特性。  相似文献
9.
RT—PCR技术检测原发上皮性卵巢癌MDR1基因表达   总被引:1,自引:1,他引:0  
目的建立适于临床检测原发上皮性卵巢癌MDR1mRNA表达方法。方法应用半定量RT-PCR技术对37例原发上皮性卵巢癌、10例正常卵巢和20例外周血新鲜标本MDR1基因进行了检测。结果原发上皮性卵巢癌标本中MDR1基因阳性表达率为30%,而正常卵巢和外周血标本则无MDR1基因表达。结论RT-PCR技术检测原发上皮性卵巢癌MDR1基因表达具有灵敏度高、相对定量和结果可靠的优点,适于临床应用。  相似文献
10.
大肠癌的抗药性和化疗对策   总被引:1,自引:0,他引:1  
大肠癌的抗药性和化疗对策第一医院普外科王严庆中图分类号R730.5大肠癌是最常见的恶性肿瘤之一,据卫生部统计,全国部分城市和县区恶性肿瘤死亡率中大肠癌占第五位[1]。目前大肠癌的主要治疗手段是早期进行根治性手术切除,但随着癌肿进入进展期,其对肠壁的浸...  相似文献
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