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1.
观察夺参碱作用于HepG2细胞后,光镜和电镜下细胞形态结构改变以及AFP、PCNA和分裂指数的变化。方法倒置显微镜下观察活细胞形态;光镜下观察Wright和苏丹Ⅲ染色的细胞形态和分裂指数;扫描和透射电镜观察细胞表面和内部超微结构改变;免疫组化和图像分析,检测AFP和PCNA。结果未用药细胞具有肿瘤细胞典型的形态特征,细胞的分裂指数为53.8%,胞浆内未见秀明颗粒和空泡,苏丹Ⅲ染色为阴性。;免疫组化  相似文献
2.
苦参碱对SMMC-7721细胞系的诱导分化作用   总被引:82,自引:2,他引:80  
张燕军  夏天  赵建斌 《医学争鸣》1998,19(3):340-343
目的:研究苦参碱对人肝癌细胞系SMMC-7721的诱导分化作用.方法:用细胞培养方法,观察细胞增殖、形态、功能和代谢等方面指标,研究苦参碱(Ma)对人肝癌细胞系SMMC-7721在体外的诱导分化作用.结果:各处理组细胞均出现细胞增殖抑制,亚细胞结构趋于正常,AFP分泌量明显低于培养天数相同的对照组细胞,γ-GT活力逐日下降,酪氨酸-α-酮戊二酸转移酶(TAT)活力始终高于对照组细胞.处理6d后,细胞DNA含量降低,S期细胞数增加.结论:Ma可使SMMC-7721细胞聚集于S期,诱导其向正常肝细胞分化  相似文献
3.
苦参碱诱导人肝癌细胞系HepG2凋亡的研究   总被引:54,自引:3,他引:51  
目的 观察苦参碱是否能诱导人肝癌细胞系HepG2凋亡及凋亡相关基因的变化。方法 0-3.0g/L苦参碱处理HepG2细胞,光镜和电镜下观察细胞形态;TUNEL法原位检测DNA断裂;流式细胞仪检测凋亡峰;AnnexinV-FITC/PI双标记检测早期凋亡;免疫组化和原位杂交法检测wp53,bcl-2,bax,c-myc,Fas等凋亡相关基因的表达,采用真彩色图像分析仪定量检测。结果 1.5-3.0g/L苦参碱可诱导HepG2凋亡,并且使凋亡相关基因wp53,bax,Fas表达上调,而抗调亡基因bcl-2,c-myc表达下调。结论 一定浓度的苦参碱可诱导人肝癌细胞HepG2凋亡,并且该凋亡与凋亡相关基因表达增强和抗凋亡相关基因表达减弱有关。  相似文献
4.
肝癌肝移植适应证的选择:上海复旦标准   总被引:53,自引:2,他引:51  
Fan J  Zhou J  Xu Y  Qiu SJ  Wu ZQ  Yu Y  Huang XW  Tang ZY  Wang YQ 《Zhonghua yi xue za zhi》2006,86(18):1227-1231
目的评估不同适应证标准对肝癌肝移植预后的影响,探讨建立适合中国国情的肝癌肝移植适应证新标准.方法回顾性分析我院2001年4月至2006年1月间251例肝细胞癌肝移植病例,Kaplan-Meier法统计分析不同病例入选标准对肝癌肝移植术后生存率及无瘤生存率的影响,LogRank检验组间差异.结果93例米兰标准术后1、2、3年的生存率为:86%、77%、77%,无瘤生存率为:91%、86%、86%;131例加利福尼亚标准术后1、2、3年的生存率为:90%、83%、83%,无瘤生存率为:92%、89%、89%;207例匹兹堡标准术后1、2、3年的生存率为:84%、74%、67%.无瘤生存率为:85%,83%,73%.而超出匹兹堡标准的44例患者,1、2、3年生存率及无瘤生存率则显著降低(65%,43%,43%及47%,43%,43%).当将适应证扩大为:单发肿瘤直径≤9 cm;或多发肿瘤≤3个,且最大肿瘤直径≤5 cm,全部肿瘤直径总和≤9 cm,无大血管侵犯、淋巴结转移及肝外转移(即"上海复旦标准"),其1、2、3年生存率及无瘤生存率(88%,80%,80%及90%,88%,88%)与最为严格的米兰标准相比差异无统计学意义,但入选病例显著增至为151例.结论"上海复旦标准"扩大了肝癌肝移植适应证的范围,且并未降低术后总体生存率及无瘤生存率,可能较米兰标准等更符合中国国情.  相似文献
5.
β-榄香烯诱导人肝癌细胞株SMMC-7721凋亡的研究   总被引:41,自引:0,他引:41  
目的:探索榄香烯对体外培养人肝细胞株的作用及其机制.方法:应用MTT方法分析榄香烯对肝癌细胞株SMMC-7721生长的影响.结果:榄香烯能明显抑制肝癌细胞生长,其半数生长抑制剂量为37.4 μg/ml;流式细胞术证实榄香烯能阻滞肝癌细胞从G0/G1期进入S期,并诱发细胞凋亡;透射电镜超微结构证实榄香烯能诱发肿瘤细胞凋亡的典型形态变化;免疫组化SP法及流式细胞术定量分析榄香烯能使肝癌细胞癌基因bcl-2、c-myc表达降低,抑癌基因p53表达增强.结论:榄香烯能诱导肝癌细胞凋亡,其作用机制可能与癌基因bcl-2、c-myc表达减少、p53表达增加有关.  相似文献
6.
体内连续筛选法建立自发性肺转移人肝癌细胞系   总被引:35,自引:3,他引:32  
Li Y  Tang Z  Ye S  Liu Y  Chen J  Xue Q  Huang X  Chen J  Bao W  Yang J  Gao D 《中华医学杂志》2002,82(9):601-605
目的 从人肝癌裸鼠肺转移灶中建立人肝癌细胞系 ,为探索肝癌转移的分子机制提供模型。方法 用高转移性人肝癌克隆细胞株MHCC97 H接种裸鼠 ,进行 3次肺转移筛选 ,取肺转移瘤建成皮下接种后自发性肺转移的细胞系。检测下列指标 :形态学、生长曲线、克隆形成率、运动速度、核型分析、流式细胞分析、免疫细胞化学检查、HBVDNA、成瘤性和转移性。结果 从裸鼠肺转移灶中培养出人肝癌细胞系HCCLM3,为多边形上皮性癌细胞 ,亚三倍体核型 ,染色体众数范围 5 5~ 5 8条 ;细胞倍增时间 34 9h ;克隆形成率 32 4 %± 3 2 % ;细胞运动速度 (2 0± 2 ) μm/h ;免疫细胞化学显示甲胎蛋白、白蛋白、细胞角质蛋白 8、P16阳性 ,P5 3、nm2 3、HBsAg阴性 ;细胞基因组中有HBVDNA整合。裸鼠皮下接种成瘤率 10 0 % ,5周后自发性肺转移率为 10 0 % ,肺转移灶中位数 12 1个 /裸鼠。瘤组织原位接种于裸鼠肝脏 ,5周后腹壁转移 10 0 %、腹腔内转移 80 %、肝内转移 10 0 %、膈肌转移 70 %、肺转移10 0 % ,肺转移灶中位数 2 6 8个 /裸鼠。结论 建成一个皮下和原位接种均出现自发性高转移的人肝癌细胞系 ,为研究肝癌转移提供了新的实验模型  相似文献
7.
超声引导经皮微波消融治疗早期原发性肝癌的远期疗效   总被引:30,自引:1,他引:29  
目的评价经皮微波消融治疗早期肝细胞肝癌患者的远期疗效。方法自1994年5月至2004年6月,216例直径≤5.0 cm的原发肝细胞肝癌患者共275个结节进行了经皮微波消融治疗(男性193例,女性23例;平均年龄54.68岁),所有病例均在我院诊治并签署知情同意书同意接受微波治疗。分析了肿瘤完全坏死率、远期生存率、复发率及并发症。结果本组平均随访期为40个月±24个月(6~127个月)。随访中159例(73.61%)存活,57例(26.39%)死亡。微波消融后95.64%(263/275)的肿瘤呈完全灭活,患者1、2、3、4和5年的累计生存率分别为94.87%、88.81%、80.44%、74.97%和68.63%。微波消融后1、2、3、4和5年的累计复发率分别为20.01%、32.04%、39.57%、44.97%和52.90%,3例发生较严重的并发症,包括针道种植1例,胆瘘2例,1例于治疗后一周死于肺部感染。结论超声引导经皮微波消融早期肝细胞肝癌在大部分病例可达到肿瘤完全坏死且并发症发生率较低,具有满意的远期临床疗效。  相似文献
8.
奥曲肽抑制肝癌生长的实验研究   总被引:29,自引:0,他引:29  
目的研究生长抑素类似物奥曲肽在体外、体内对肝癌生长及凋亡的影响.方法采用3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法、DNA末端原位标记染色(TUNEL)及流式细胞技术检测奥曲肽对体外培养的肝癌细胞生长影响及凋亡的诱导作用.利用SMMC-7721肝癌细胞株建立裸鼠肝癌原位种植瘤模型,实验组皮下注射奥曲肽100μg@kg-1@d-1;对照组予生理盐水20μg@d-1;共给药8周.结果培养细胞经不同浓度的奥曲肽作用48h后,对肝癌细胞的生长具有明显的抑制作用,且肝癌细胞3H-TdR掺入值与奥曲肽的浓度呈负相关(r=-0.97,P<0.01).TUNUL显示,1×10-6mol/L的奥曲肽作用24h后,肝癌细胞凋亡率为15.2%±2.4%;流式细胞检测可见明显的凋亡峰.奥曲肽治疗组裸鼠肝癌原位种植瘤重量明显低于对照组(0.27±0.05vs0.85±0.37,P<0.01).结论体内及体外实验表明,奥曲肽能有效抑制肝癌生长,其机制可能与抑制肝癌细胞DNA合成及诱导肝癌细胞凋亡有关.  相似文献
9.
Objectives To determine the pre-therapeutic serum level of vascular endothelial growth factor (VEGF) in patients with hepatocellular carcinoma (HCC) and to elucidate the relation between the serum level and clinical characteristics and metastasis of HCC. Methods One-hundred and fifteen HCC patients, 40 patients with benign liver lesions, and 30 healthy control subjects were included in this study. The serum VEGF level was measured with the quantitative sandwich enzyme linked immunosorbent assay (ELISA, R&amp;D systems). Results The serum VEGF levels in the HCC group (465.62±336.24 pg/ml) was significantly elevated as compared with those in patients with benign liver lesions (159.54±120.58 pg/ml) and those in normal controls (123.53±51.84 pg/ml). The VEGF levels were not significantly different between the patients with benign liver lesions and the normal controls. The serum VEGF concentration showed a positive rate of 77.4%, 25%, and 3.3% in the HCC patients, benign liver lesion patients and normal controls, respectively. In the 115 HCC patients, the serum VEGF levels in patients with portal vein (PV) emboli (n=26, 582.76±441.89 pg/ml), with metastasis (n=43, 548.29±438.57 pg/ml) or with large HCC lesions (≥5 cm in diameter) (n=69, 554.43±369.99 pg/ml) were significantly higher than those without PV-emboli (n=89, 431.39±292.84 pg/ml), without metastasis (n=72, 416.24±247.27 pg/ml) or with small HCC lesions (n=42, 328.67±227.47 pg/ml). The serum VEGF levels in stage Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ, Ⅳa and Ⅳb HCC patients were 340.6 pg/ml, 451.55±307.84 pg/ml, 397.44±257.18 pg/ml, 486.10±397.73 pg/ml and 647.93±344.56 pg/ml, respectively. Conclusion The pre-therapeutic serum VEGF levels in HCC patients appear to reflect the disease’s potential activity of vascular invasion and metastasis.  相似文献
10.
肝细胞癌门静脉癌栓形成相关的血清蛋白质分子标记物研究   总被引:26,自引:4,他引:22  
目的筛选肝细胞癌门静脉癌栓形成相关的血清蛋白质分子标记物并建立预测模型。方法收集135例肝细胞癌患者血清,95例(其中33例为肝细胞癌伴门静脉癌栓,62例为肝细胞癌不伴门静脉癌栓)为建模型组,40例(其中18例为肝细胞癌伴门静脉癌栓,22例为肝细胞癌不伴门静脉癌栓)为盲法验证组,采用弱阳离子交换蛋白质芯片(WCX2)为检测介质,经表面加强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDITOFMS)测定得到蛋白质谱,通过BioMarkerWizardSoftware比较两组患者血清蛋白质谱,利用BiomarkerPatternsSoftware建立决策树模型并进行盲法验证。结果在m/z1100~30000范围内,检测出的100个蛋白峰中16个蛋白峰有显著差异(P<0.01),m/z为3478、1314、1744、1725、2022和3380的蛋白峰在肝细胞癌伴门静脉癌栓组中上调,而m/z为8901、9353、9415、8773、2766、2745、8697、7773、8569和1373的蛋白峰在肝细胞癌伴门静脉癌栓组中下调;选择m/z为3478、2022、8901、9415、8773、2766、和2745的7个蛋白峰建立的决策树模型其敏感性为75.8%(25/33),特异性为82.3%(51/62);盲法验证该模型准确率87.5%(35/40),灵敏性100%(18/18),特异性77.3%(17/22),阳性预测值78.3%(18/23),阴性预测值100%(17/17)。结论筛选出的16个蛋白分子标记物可能与肝细胞癌门静脉癌栓形成有关;决策树模型可能对预测肝细胞癌门静脉癌栓的发生有重要的临床意义。  相似文献
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