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1.
丹参多酚酸盐对人血管内皮细胞迁移的影响   总被引:41,自引:3,他引:38  
目的 观察丹参多酚酸盐对单核细胞诱导的内皮细胞迁移的影响,探讨丹参多酚酸盐促血管生成的机制。方法 采用单核细胞-内皮细胞联合培养,观察丹参多酚酸盐对单核细胞诱导的内皮细胞迁移的影响。分别采用酶联免疫吸附测定法和逆转录聚合酶链反应法检测丹参多酚酸盐干预后单核细胞分泌血管内皮细胞生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)水平及其mRNA的变化。结果 迁移实验结果示经丹参多酚酸盐处理后内皮细胞的迁移数增加,与对照组比较,有显著性差异。经丹参多酚酸盐处理后,单核细胞VEGFmRNA和bFGF mRNA均有升高,VEGF和bFGF蛋白水平也有上升。结论 丹参多酚酸盐促进单核细胞诱导的内皮细胞迁移;其促进单核细胞合成和分泌VEGF及bFGF,可能是该药物促内皮细胞迁移的作用机制。  相似文献
2.
Background To explore the effect of human osteopontin (hOPN) on the proliferation, transmigration and expression of matrix metallproteinase-2 (MMP-2) and matrix metallproteinase-9 (MMP-9) in osteosarcoma (OS) cells in vitro.Methods The prokaryotic-expression vector of hOPN was produced, hOPN was then subcloned into E. coli BL21 (DE3) cells and purified with ProBond^TM Columns. The proliferation, cell cycle and the expression of cycUn A in OS cells were investigated by using MTT assay, flow cytometry and Western blot respectively. The transmigration of OS cells was checked by using transwell cell culture chamber.The micro-pore-filter-membrane system was used to study the chemiotaxis of hOPN to OS cells. The levels of total protein were examined according to Coomassie Brilliant Blue manuals. The expression of MMP-2 and MMP-9 were evaluated by detecting the volume of degradation of gelatin on SDS-PAGE gel.Results The prokaryotic-expression vector of hOPN and purified hOPN protein were achieved hOPN promoted OS cells proliferation in a dose-dependent manner, and stimulated cyclin A expression in OS cells to accelerate cell division cycle, hOPN facilitated the trans-membrane migration of OS cells.hOPN also enhanced the secretion of MMP-2 and MMP-9 in OS cells.Conclusion hOPN could stimulate cyclin A expression in OS cells, hOPN has chemiotaxis to OS cells and increases their transmigration, hOPN enhances the secretion of MMP-2 and MMP-9 in OS cells.  相似文献
3.
蛋白酶激活受体1和2在结肠癌细胞的表达及其作用初探   总被引:14,自引:0,他引:14  
目的:探讨蛋白酶激活受体1和2(PAR1和PAR2)在结肠癌细胞株SW620和SW480细胞的表达及其作用.方法:采用免疫细胞化学染色及RT-PCR法检测SW620和SW480细胞有无PAR1和PAR2蛋白及其mRNA的表达;利用各自不同的激动剂、拮抗剂及相关抗体,观察对细胞迁移和增殖能力的影响以及对细胞分泌白细胞介素8(IL-8)的影响.结果:结肠癌细胞株SW620和SW480均有PAR1和PAR2 mRNA的表达,但仅见SW620细胞表面具有PAR2蛋白的高表达,PAR1蛋白表达不明显;SW480细胞表面既无PAR1也无PAR2蛋白的表达.SW620细胞的迁移能力明显高于SW480细胞,PAR1和PAR2的激动剂以及因子Ⅶa均可促进SW620细胞的增殖、迁移和IL-8的分泌;PAR2拮抗剂对细胞迁移起抑制作用,抗PAR2抗体对细胞的增殖和迁移均有干预作用.结论:蛋白酶激活受体2在结肠癌细胞表面大量表达,可增强细胞的增殖和迁移能力及IL-8的分泌,表明与肿瘤的转移能力及恶性程度密切相关.  相似文献
4.
恶性疟原虫类巨噬细胞迁移抑制因子基因的克隆和表达   总被引:11,自引:0,他引:11  
目的克隆、表达恶性疟原虫的巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)同源基因PfMif.方法参照人MIF基因(Humif)氨基酸序列在P.falcip arum基因组中找到同源核苷酸序列,设计特异引物,采用RT-PCR方法从恶性疟原虫3D7株红内期RNA扩增获得Pfmif基因;利用生物信息学软件分析所扩增的基因;原核表达重组PfMIF蛋白,并亲和纯化.结果从恶性疟原虫RNA中扩增到Pfmif基因,长度为351 bp,编码116个氨基酸,具有MIF家族蛋白的典型特征.成功的表达及纯化了融合有GST标签的重组PfMIF蛋白.结论获得来自恶性疟原虫的MIF同源基因,初步确定PfMIF是MIF家族的一个新成员.  相似文献
5.
CXCR4在肺癌转移中的作用及其机制研究   总被引:10,自引:1,他引:9  
Su LP  Zhang JP  Xu HB  Chen J  Wang Y  Xiong SD 《中华医学杂志》2005,85(17):1190-1194
目的 探讨CXCR4在肺癌转移中的作用及其机制。方法 将CXCR4不同表达水平的肺癌细胞(95C、95C-pc、95C-X4、95D、95D-pC、95D-ASX4)接种于裸鼠皮下并分析其转移能力。分别通过趋化侵袭实验、明胶酶谱法、黏附实验、RT-PCR法检测CXCR4/SDF-1对肺癌细胞迁移、基质金属蛋白酶(MMP-2)活性、黏附能力、生长相关癌基因-α(GRO-α)表达的调控;通过流式细胞术和共聚焦显微镜观察肺癌细胞内纤维肌动蛋白的合成和聚合情况;Western印迹分析CXCR4/SDF-1对ERK1/2磷酸化的影响。结果 CXCR4不同表达水平的肺癌细胞在裸鼠体内具有不同的转移能力,95D-ASX4组有2/5的小鼠发生了转移,其肺转移结节的数目明显少于95D、95D-pC组(P=0.044)。CXCR4特异配体SDF-1α可以诱导肺癌细胞的迁移和细胞骨架蛋白纤维肌动蛋白的合成和聚合;SDF-1α促进肺癌细胞MMP-2活性、黏附能力和GRO-α表达的增加;CXCR4中和抗体可以在一定程度上抑制这些作用。SDF-1α可以诱导ERK1/2的磷酸化。结论 肺癌转移在一定程度上依赖于CXCR4/SDF-1的相互作用,他们通过调控肺癌细胞的运动性、MMP活性、黏附能力及GRO-α的表达参与肺癌的转移。  相似文献
6.
Yin H  Wang L  Huo Y  Peng X  Xia C  Tang C 《中华医学杂志》2002,82(9):622-625
目的 研究粘着斑激酶和丝裂原活化蛋白激酶在细胞外基质成分诱导血管平滑肌细胞迁移和增殖中的作用。方法 通过纤粘连蛋白 (FN)诱导培养的平滑肌细胞迁移和增殖 ,以免疫沉淀和Western印迹法检测粘着斑激酶 (FAK)和丝裂原活化蛋白激酶 (p4 2 / 4 4MAPK)及其磷酸化的表达量。将FAK反义寡核苷酸 (ODN)经脂质体转染细胞 ,观察其对FAK和p4 2 / 4 4MAPK磷酸化、细胞迁移以及增殖的影响。结果 不同浓度FN(5、10、2 0、4 0、6 0 μg/ml)在有效诱导平滑肌细胞迁移和增殖时FAK和p4 2 / 4 4MAPK也呈明显表达 ,2 0 μg/mlFN可使其磷酸化处于较高的表达量。脂质体可有效地介导ODN转染 ,转染效率为 86 7%± 4 5 %。转染后FAK以及p4 2 / 4 4MAPK磷酸化表达量明显减少 ,10、2 0、4 0和 6 0 μg/mlFN组迁移细胞数也分别显著减少 (2 3 2 6 %、2 1 6 3%、19 31%、17 88% ,P <0 0 5 ) ,5~ 6 0 μg/ml不同浓度的FN组 ,细胞增殖减少 2 7 6 7%~ 4 6 6 7% (P <0 0 5 )。 结论 活化的FAK和p4 2 / 4 4MAPK是细胞外基质诱导平滑肌细胞迁移和增殖的重要信号分子 ,二者之间存在着密切的联系 ,由其介导的信号转导促进了这一过程 ,反义FAKODN可有效地对此进行抑制  相似文献
7.
血管平滑肌细胞 (vascularsmoothmusclecell,VSMC)增殖、向内膜下迁移是动脉粥样硬化、血管再狭窄等病理过程的关键环节。有报道VSMC的增殖和迁移与病变局部细胞外基质 (extracellularmatrix)的合成降解的再平衡即细胞外基质的重构有关。纤维粘连蛋白 (fibronectin)和骨桥蛋白(osteoponitin)是细胞外基质中的重要功能蛋白 ,在血管受损伤时表达量均明显增加 ,但是纤维粘连蛋白和骨桥蛋白对VSMC增殖和迁移的影响及其分子机制尚不清楚。本研究探讨了纤维粘连蛋…  相似文献
8.
Rho信号转导通路与细胞迁移   总被引:3,自引:0,他引:3  
王玉珍  姜慧卿  扈彩霞 《医学综述》2006,12(11):651-653
细胞迁移是机体正常生长发育必不可缺的生理过程,组织损伤和感染的过程中离不开它;而在一些慢性疾病如癌症、动脉粥样硬化和慢性炎性纤维化等伴随着特定细胞迁移,阻止这些细胞迁移能抑制疾病进展。细胞迁移涉及到细胞骨架和细胞黏附相关的动态组装和空间位置的改变。小G蛋白Rho家族是肌动蛋白细胞骨架重新组装的主要调节因子之一。在协调细胞迁移中起重要作用。  相似文献
9.
大鼠脑梗死后室周带神经干细胞增殖和迁移   总被引:3,自引:3,他引:0  
目的:研究成年大鼠脑梗死后室周带神经干细胞的增殖及迁移。方法:制作大鼠脑梗死模型,将其分为脑梗死后3、5、7和14d组,对照组为假手术组:采用免疫组化法动态检测大鼠脑内5-溴脱氧尿苷嘧啶(BrdU)、双皮质素(DCX)的表达。结果:与对照组相比,室周带BrdU阳性细胞在脑梗死后逐渐增加,并于7d达高峰,14d后开始下降,但仍高于正常水平。梗死后不同时间组室周带BrdU阳性细胞数均高于对照组(P〈0.01)。DCX阳性细胞具有迁移细胞的形态学特征,并向损伤区迁移,于术后5d迁移细胞的数量达高峰。结论:脑梗死可激活室周带神经干细胞原位增殖,并向损伤区迁移。  相似文献
10.
目的本研究旨在探讨蛋白酪氨酸激酶活性变化在血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)介导的血管平滑肌细胞(VSMC)迁移中的作用.方法体外培养VSMC,采用[γ-32P]-ATP掺入法、改良Boyden′s chamber法和细胞化学的方法,观察AngⅡ干预前后VSMC胞浆内PTK活性的变化,粘着斑、肌动蛋白纤维丝的动态组装变化以及迁移能力的变化,探讨AT1R拮抗剂、AT2R拮抗剂以及酪氨酸激酶抑制剂对上述观测指标的影响.结果 (1)AngⅡ可以剂量依赖性诱导VSMC内胞浆PTK激活;(2)AngⅡ刺激后,VSMC粘着斑表达增强,肌动蛋白丝数量明显增加,纵向平行排列;(3)AngⅡ刺激后VSMC发生迁移;(4)AT1R拮抗剂CV-11974可显著抑制上述生物学效应,AT2R拮抗剂PD123319对此无明显的作用;酪氨酸激酶抑制剂Genistein可显著但不能完全抑制上述生物学效应.结论 AngⅡ通过AT1R介导调节VSMC内粘着斑和肌动蛋白丝动态组装,进而改变VSMC的迁移能力;酪氨酸激酶的激活参与AngⅡ介导的VSMC迁移的信号转导调控;由于完全抑制PTK活性尚不能完全抑制AngⅡ诱导的VSMCs跨膜迁移,因此VSMCs迁移的调控可能还有其他的信号转导通路的参与.  相似文献
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