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1.
哮喘患儿IL—12,IL—13与总IgE水平变化   总被引:21,自引:3,他引:18  
麦贤弟  赵莉 《中山医科大学学报》2000,21(5):400-401,W002
目的:探讨哮喘患儿白细胞介素12(IL-12)、白细胞介素13(IL-13)与总免疫球蛋白E(总IgE)的变化。方法:取静脉血,用ELISA方法检测IL-12、IL-13与总IgE水平,并对检测结果进行统计学处理。结果:发作期哮喘患儿血浆及外周血单个核细胞(PBMC)诱生的IL-12水平显著低于哮喘缓解组,P〈0.01;两组均显著低于正常对照组,P〈0.01;发作期IL-13水平显著高于缓解组,P  相似文献
2.
哮喘患儿发作与缓解期血清IL-12,IL-4及IgE水平变化及意义   总被引:15,自引:1,他引:14  
目的 :检测哮喘患儿发作与缓解期血清IL - 12、IL - 4及IgE值 ,并和正常小儿作比较 ,研究之间关系及其临床意义。方法 :选择符合哮喘诊断标准发作期患儿 2 5例 ,缓解期 11例 ,同龄健康小儿 2 0例作对照。取静脉血检测血清IL - 12、IL - 4及IgE。结果 :发作期IL - 12值明显下降 ,与缓解期比较有显著差异。缓解期值上升和对照组比较无显著差异性。发作期患儿IL - 4值明显升高 ,与缓解期比较差异性显著 ,缓解期其值虽有下降但和对照组比较仍有差异性。发作期患儿IgE值明显升高 ,缓解期值比较差异性显著 ,和IL - 12值呈负相关 ,与IL - 4呈正相关。结论 :哮喘发作存在TH1细胞功能不足 ,TH2 细胞功能亢进。TH1/TH2 暂时失调。发作期提高IL - 12值使TH1/TH2 比例平衡是治疗哮喘的新方向。  相似文献
3.
目的:探讨IL-12对炎症性肠病患者外周血和肠黏膜固有层淋巴细胞激活和炎症介质分泌的影响。方法:收集并分离15例克罗恩病、21例溃疡性结肠炎和13例结肠镜检正常者(对照)外周血单个核细胞(PBMC)及肠黏膜固有层单个核细胞(LPMC),体外培养并用IL-12刺激,培养12h、24h、48h后,用流式细胞仪测PBMC或LPMCCD69表达情况;培养48h后,收集细胞培养上清液并用ELISA检测干扰素(IFN)-γ、IL-2和肿瘤坏死因子(TNF)-α的水平。结果:IL-12刺激后炎症性肠病患者外周血T细胞表达高水平的CD69。克罗恩病患者的PBMC和LPMCCD69表达水平及IFN-γ、IL-2和TNF-α分泌水平较溃疡性结肠炎和对照者明显增高(P<0.05)。结论:IL-12能直接刺激炎症性肠病患者外周血和肠黏膜固有层淋巴细胞激活,并产生大量促炎症介质。  相似文献
4.
人白介素-12植物表达载体的构建   总被引:13,自引:1,他引:12  
邵敏  周鹤峰  葛正龙 《医学争鸣》2007,28(10):868-870
目的:构建人白介素-12(hIL-12)基因的植物表达载体.方法:采用PCR技术从质粒pCA13-hIL-12中扩增hIL-12基因,SmaI, SacI分别酶切hIL-12基因和植物表达载体pBI121,回收,T4DNA连接酶连接得到重组质粒pBI121-hIL-12,双酶切和DNA测序鉴定后,通过三亲杂交法将表达载体pBI121-hIL-12分别导入根癌农杆菌EHA105和GV3101,用PCR法进行鉴定.结果:双酶切及DNA序列测定证实hIL-12已插入到表达载体pBI121中,PCR 扩增表明构建的重组表达载体pBI121-hIL-12成功转入根癌农杆菌EHA105和GV3101中.结论:成功构建了植物表达载体pBI121-hIL-12,为进一步利用转基因植物生产hIL-12奠定了实验基础.  相似文献
5.
双亚基共表达人白细胞介素12重组腺病毒载体的构建与应用   总被引:10,自引:0,他引:10  
目的构建双亚基共表达人白细胞介素12(IL-12)重组腺病毒载体,为其临床研究提供实验基础。方法利用RT-PCR分别克隆出人IL-12两个亚基p40和p35的全长编码cDNA,经脑心肌炎病毒的内部核糖体结合位点(IRES)序列连接后置于CMV启动子下游,将其插入E1区替代的腺病毒载体pAx1cw,构建成人IL-12的双顺反子共表达重组腺病毒载体;与EcoT22I酶切的Ad5腺病毒DNA-末端肽复合物共转染293细胞,经同源重组制备人IL-12的重组腺病毒。结果扩增到的人白介素12重组腺病毒滴度为2.1×109pfu/ml,体外感染293细胞、HepG2细胞和人原代皮肤成纤维细胞后,经ELISA检测证实人IL-12的表达(30~50ng/106细胞/24小时),所表达的IL-12体外能刺激人淋巴母细胞的增殖和IFN-γ的产生。结论所制备的人IL-12双亚基共表达重组腺病毒载体能有效表达具有生物学活性的人IL-12,可望进一步用于临床研究。  相似文献
6.
目的 :构建携带鼠白细胞介素 - 1 2基因腺病毒载体 ( Ad CMVIL- 1 2 )并观察其影响 B1 6黑色素瘤致瘤性的效果。方法 :将鼠 IL- 1 2基因构建进含有 CMV启动子的双顺反子重组腺病毒载体内 ,分离纯化后 ,转染 2 93细胞 ,48h后提取细胞总 RNA,进行 RT- PCR、琼脂糖凝胶电泳 ,选取特异性片段 TA克隆、测序 ;将 B1 6黑色素瘤细胞与 Ad CMVIL- 1 2在 37℃、5 %CO2 培养箱中孵育2 h后注射到 C57/ BL6小鼠右侧腹股沟皮下 ( MOI=1 0 0 ) ,观察 Ad CMVIL- 1 2对 B1 6黑色素瘤致瘤性的抑制作用。结果 :测序结果证明 Ad CMVIL- 1 2构建成功 ,实验组未见肿瘤生长 ,抑瘤率达1 0 0 %。结论 :成功地构建 Ad CMVIL- 1 2 ,并具有明显的抑制肿瘤生长的作用。  相似文献
7.
肝癌患者血清IL—10,IL—12和TNFα水平的变化   总被引:7,自引:0,他引:7  
OBJECTIVE: To study the relationship and clinical significance between level change of serum Interleukin 10 (IL-10), interleukin 12 (IL-12), tumor necrosis factor-alpha (TNF alpha) and primary hepatic carcinoma (PHC). METHODS: Serum IL-10, IL-12, TNF alpha in 40 patients with PHC, 36 cases with hepatocirrhosis and 33 normal controls were measured with ELISA. RESULTS: The higher serum levels of IL-10, IL-12, TNF alpha were observed in patients with hepatocirrhosis than in controls (P < 0.01), although IL-12, TNF alpha in the serum of patients with PHC were in the proximity of that of controls (P > 0.05), the IL-10 level was significantly higher than that of control (P < 0.01), further more, IL-10 being opposed to IL-12, TNF alpha is higher in patients with tumor above 5.0 cm in diameter than below 5.0 cm, IL-12 and TNF alpha were declined and IL-10 increased with tumor enlargement. CONCLUSION: The immune dysfunction in patients with PHC may be related to level increase of IL-10. The level decrease of IL-12, TNF alpha and increase of IL-10 is helpful to clinical differential diagnoses between cirrhotic nodule and PHC, and this suggests cancerous tendency.  相似文献
8.
IL-12对哮喘患者Th1/Th2的调节   总被引:6,自引:6,他引:0  
目的 探讨白细胞介素12(IL-12)对哮喘患辅助性T细胞亚群的调节作用,方法 收集14例支气管哮喘患,10例正常对照的外周血单个核细胞(PBMC),加入不同浓度IL-12进行体外培养,收集细胞培养上清液,以酶联免疫吸附法测定IL-4及IFN-γ,并用酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测哮喘患体外培养的PBMC中的Th1和Th2阳性率。结果 哮喘患PBMC培养上清液中TNF-γ产生减少,  相似文献
9.
白细胞介素12基因转染抑制B16细胞成瘤性及转移性的研究   总被引:6,自引:0,他引:6  
目的探讨白细胞介素12(IL12)基因转移对弱免疫原性的小鼠B16黑色素瘤细胞生长与转移的影响。方法构建小鼠IL12两个亚单位p40、p35cDNA表达载体;经脂质体LipofectAMIN介导,将两真核表达载体同时导入B16细胞;应用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测p40、p35mRNA表达;用生物学活性检测法(致分裂激活的活化的小鼠脾细胞增殖)检测IL12分泌;经皮下或静脉接种肿瘤细胞,检测其体内成瘤性及转移性。结果IL12基因转染的B16细胞(B16TIL12)能够表达p40及p35mRNA,分泌有生物活性的IL12;B16TIL12细胞体内成瘤性降低,成瘤延迟,肿瘤生长慢,荷瘤小鼠存活期延长(P<001);肺转移率降低,肺内转移灶明显减少(P<001)。结论IL12基因转染可明显抑制肿瘤生长与转移  相似文献
10.
应用白细胞介素12阻断GATA-3表达治疗小鼠支气管哮喘   总被引:6,自引:2,他引:4  
目的:观察T细胞特异转录因子GATA-3在支气管哮喘(哮喘)小鼠肺部的表达,探讨应用白细胞介素12(IL-12)阻断GATA-3表达治疗支气管哮喘的可能性.方法:30只C57BL/6小鼠随机均分为正常对照组(A组)、哮喘组(B组)、IL-12治疗组(C组).B组和C组建立哮喘模型,于第1、3、7、9、25、26、27、28天,分别1次腹腔注射生理盐水(0.1 ml)和IL-1 2(1μg).第31天收取各组6只小鼠的支气管肺泡灌洗液(BALF)测细胞成分,各组剩余小鼠H-E染色切片观察小鼠气管、肺组织病理变化,免疫组化测定肺组织中GATA-3表达.结果:对照组无症状,哮喘组哮喘症状重,治疗组哮喘症状轻.在BALF中嗜酸粒细胞百分比对照组为0,哮喘组为(20.0±4.0)%,治疗组为(0.2±0.1)%.在同一视野对照组支气管黏膜下未见炎性细胞,哮喘组可见大量炎性细胞浸润,治疗组炎性细胞较哮喘组明显减少.免疫组化染色对照组无GATA-3表达,哮喘组GATA-3表达强,治疗组GATA-3无表达.结论:哮喘小鼠肺部存在GATA-3高表达,IL-12对小鼠支气管哮喘气道和肺部炎症浸润有抑制作用,其机制可能与IL-12阻断哮喘GATA-3的表达有关.  相似文献
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