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1.
目的 应用凝集素微量离心柱法(ACSC)检测甲胎蛋白异质体(AFP-L3),分析AFP-L3在鉴别肝细胞癌(HCC)与良性肝脏病变中的价值.方法 选择132例临床检测AFP为阳性的肝病患者血清.应用装有耦联了小扁豆凝集素(LCA)的微量离心柱分离、洗脱获得AFP-L3,采用配套试剂在美国雅培AXSYM酶免疫分析仪检测AFP以及AFP-L3含量,计算AFP-L3在AFP中的比例即AFP-L3%.结果 以ACSC法分离AFP-L3操作简便;HCC患者血清AFP-L3%异常升高,其均值明显高于良性肝病患者(P<0.01);根据AFP-L3%计算受试者工作曲线(ROC)曲线下面积为0.807.以AFP-L3%≥10%为临界值,分析79例HCC患者与53例良性肝脏疾病患者,AFP-L3%异常的灵敏度为84.8%(67/79);特异性为92.5%(49/53),与临床总体符合率为87.9%.结论 应用ACSC辅助检测的AFP-L3在HCC与良性肝脏病变鉴别诊断中有一定临床价值.  相似文献
2.
刘靳波  余晓林  夏乾峰  涂植光 《医学争鸣》2008,29(14):1298-1300
目的:探讨肿瘤标志物(TM)癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)、糖类抗原CA72-4(CA72-4)、糖类抗原CA19-9(CA19-9)在胃结肠肿瘤诊断中的应用价值.方法:应用电化学发光免疫法测定106例胃结肠肿瘤、111例胃结肠良性病、92例正常对照血清中CEA,AFP,CA72-4和CA19-9水平,通过ROC曲线分析和逐步logistic回归结果的ROC曲线下面积(AUC),对TM单独及不同组合方式的敏感性、特异性、Youden指数和阳性似然比/阴性似然比进行比较分析.结果:各TM在胃结肠肿瘤组的浓度显著高于胃结肠病良性病组和正常对照组.胃结肠良性病-胃结肠恶性肿瘤中,逐步Logistic回归法模拟变量的AUC高于单一TM的AUC.CA72-4,CEA,CA19-9联合应用的敏感性、Youden指数、阳性似然比/阴性似然比最高.结论:基于logistic回归的ROC分析可以改善诊断的准确性.在胃结肠肿瘤的鉴别诊断中,CA72-4,CEA及CA19-9联合分析是较好组合.  相似文献
3.
甲胎蛋白动态变化在原发性肝癌诊断中的价值(摘要)   总被引:1,自引:1,他引:1  
甲胎蛋白动态变化在原发性肝癌诊断中的价值(摘要)刘玉诚1张世杰2张建立2甲胎蛋白(AFP)是原发性肝癌(PHC)的肿瘤标记物,其增高对PHC的诊断有重要价值,其动态变化在PHC诊断中的作用尚不清楚。为此,我们对50例HBsAg阳性的慢性乙型肝炎和肝硬...  相似文献
4.
血清CA125、CEA、AFP联合检测在卵巢肿瘤诊断中的价值   总被引:1,自引:1,他引:7  
目的 :探讨血清 CA1 2 5、CEA和 AFP联合检测在卵巢肿瘤诊断中的价值。方法 :采用酶联免疫分析法 ( EL ISA)对卵巢恶性肿瘤、良性肿瘤及子宫内膜异位症患者血清CA1 2 5、CEA及 AFP含量进行检测。结果 :卵巢恶性肿瘤患者 CA1 2 5含量明显高于对照组、卵巢良性肿瘤及交界性瘤 ( P<0 .0 1 ) ;子宫内膜异位症及盆腔炎患者 CA1 2 5含量高于对照组及卵巢良性肿瘤 ( P<0 .0 5 ) ;卵巢恶性肿瘤患者 CA1 2 5含量高于子宫内膜异位症 ( P<0 .0 5 )。结论 :单项检测 CA1 2 5对卵巢上皮性癌诊断性能最佳 ,对子宫内膜异位症也有较理想的诊断价值 ,CA1 2 5、CEA及 AFP联合检测对卵巢恶性肿瘤的诊断无明显价值 ,AFP对卵巢恶性生殖细胞癌有重要诊断价值  相似文献
5.
Du WZ  Yu TX 《中华医学杂志》2011,91(29):2077-2080
目的 探讨携带甲胎蛋白基因的重组腺相关病毒(rAAV-AFP)转导人树突状细胞(DC)体外诱导抗肝癌免疫应答.方法 分离健康志愿者外周血单核细胞,贴壁细胞转导rAAV-AFP后,在粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)和白细胞介素4(IL-4)的联合作用下,诱导分化为DC.用四唑盐(MTS)比色法检测AAV-AFP转导的DC(AAV-AFP+DC)刺激自体T细胞增殖的能力;流式细胞仪检测DC表型、AAV-AFP转导DC的效率以及AAV-AFP+DC激活的T细胞干扰素γ(IFN-γ)和IL-4的分泌;乳酸脱氢酶(LDH)释放细胞毒试验检测AAV-AFP+DC刺激的T细胞对AFP阳性肝癌细胞系的杀伤活性.结果 AAV-AFP转导的DC高表达人类主要组织相容性复合体Ⅰ类分子(HLA Ⅰ,97.12%)、HLAⅡ(97.32%)、CD80(38.94%)、CD83(60.84%)、CD86(98.14%)等DC的典型表面标记;AAV-AFP转导后,81.2%的DC表达AFP;AAV-AFP+DC能够有效地刺激自体T细胞增殖、活化,激活后19.84%的CD4+T细胞和18.65%的CD8+T细胞能够分泌IFN-γ而不分泌IL-4,对AFP阳性的肝癌细胞系HepG2、BEL7402杀伤率分别为56.45%和78.94%.结论 AAV-AFP+DC体外能够诱导出有效地抗AFP阳性肝癌免疫应答,为AFP表达阳性的肝癌患者的主动性免疫治疗提供了实验依据.
Abstract:
Objective To investigate the generation of antitumor response against hepatocellular carcinoma by in vitro transduction of dendritic cells (DC)with recombinant adeno-associated virus expressing α-fetoprotein (rAAV-AFP). Methods Peripheral blood mononuclear cells were isolated from healthy volunteers. Adherent peripheral blood mononuclear cells were transduced with AAV-AFP and cultured in the presence of granulocyte macrophage colony stimulating factor and interleukin-4 to generate dendritic cells.MTS assay was used to measure the ability of DC transduced with AAV-AFP ( AAV-AFP + DC) to stimulate the proliferation of T cell. The phenotype and AFP protein expression of DC and the secretion of IFN (interferon)-γ and IL (interleukin)-4 by T cells were detected by flow cytometry. The killing efficacy of cytotoxic T lymphocytes (CTL) activated by AAV-AFP + DC against AFP positive hepatocellular carcinoma cell lines was detected by lactate dehydrogenase (LDH) release assay. Results AAV-AFP + DC expressed HLA Ⅰ (97. 12%), HLAⅡ (97.32%), CD80(38.94%), CD83(60.84%)and CD86(98. 14%). AFP was secreted by 81.2% of AAV-AFP + DC. And it could stimulate effectively the proliferation of T cell.19. 84% of CD4 + T cells and 18.65% of CD8 + T cells activated by AAV-AFP + DC produced IFN-γbut not IL-4 and showed distinct killing activities against AFP positive hepatocellular carcinoma cell lines HepG2 (56. 45% ) and BEL7402 (78. 84% ). Conclusion AAV-AFP + DC can elicit distinct antitumor responses against AFP positive hepatocellular carcinoma cell lines so as to provide a basis for further researches on the clinical application of AAV-AFP + DC in the treatment of hepatocellular carcinoma.  相似文献
6.
人源肝癌细胞系中甲胎蛋白基因表达及甲基化的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:了解不同人源肝癌细胞系甲胎蛋白(AFP)基因表达及不同区域甲基化状态,探讨肝癌发生的表达遗传学调控机制。方法:采用亚硫酸氢盐-基因组测序(bisulfite—assisted genomic sequencing,BAGS)技术,检测人源HepG2、SMMC一7721肝癌细胞系和人成纤维细胞中AFP基因启动子区及CpG岛区的甲基化水平,RT—PCR检测基因的表达,并分析相关性。结果:HepG2细胞高表达AFP,SMMC-7721细胞低表达AFP,成纤维细胞不表达AFP;在启动子区,HepG2细胞的非甲基化修饰位点发生率较高,尤其是第一个和第二个CG位点,SMMC-7721细胞的甲基化程度较之高,而成纤维细胞甲基化程度整体很高;在CpG岛区,成纤维细胞的非甲基化修饰位点发生率较高,主要是第6个和第7个CG位点,SMMC-7721、HepG2细胞的甲基化程度较之高。结论:AFP基因启动子甲基化程度与基因表达水平存在负相关,AFP基因CpG岛甲基化程度与基因是否表达有关,AFP基因启动子低甲基化可能是AFP高表达的分子机制;  相似文献
7.
HLA-A^*0201限制性AFP抗原决定簇肽特异性肝癌疫苗的制备   总被引:1,自引:1,他引:0  
目的探讨人HLA-A^*0201限制性AFP抗原决定簇肽(含MHC—I类分子HLA-A^*0201)作为原发性肝癌特异性抗原制备肝癌肿瘤疫苗的可行性。方法应用14佃AFP抗原决定簇肽片段分别体外脉冲刺激健康人血液树突状细胞(DC),将DC与自体T淋巴细胞共同培养并扩增其数量,使AFP抗原决定簇肽导入CD8’阳性T淋巴细胞(CD8^+-CTL)并对表达相应AFP抗原决定簇肽的K562/A2.1细胞(人慢性髓原性白血病细胞株K562转染人HLA-A^*0201基因)产生特异性杀伤并释放gamma-干扰素(ELISPOT测定)。结果有4个AFP抗原决定簇肽对表达相应AFP抗原决定簇肽的K562/A2.1细胞杀伤能力较强,称之为免疫决定簇肽(Immunodominant);另有10个AFP抗原决定簇肽对表达相应AFP抗原决定簇肽的K562/A2.1细胞杀伤能力较弱,称之为亚免疫决定簇肽(Subdominant)。结论AFP抗原决定簇肽可以作为肝癌特异性抗原制备肝癌肿瘤疫苗,K562/A2.1细胞可以作为有效的抗原提呈细胞(APC)用于实验研究。  相似文献
8.
甲胎蛋白化学发光免疫定量分析方法的建立   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:建立检测甲胎蛋白化学发光免疫定量分析方法.方法:采用双抗体异位点一步夹心法,以甲胎蛋白单克隆抗体作为固相包被,采用改良过碘酸钠法进行甲胎蛋白多克隆抗体与碱性磷酸酶偶联制备酶标抗体;以金刚烷胺衍生物CSPD作为底物,优化CSPD与SapphireII发光体系;用国家标准品校定定量标准品,建立了人血清AFP的化学发光免疫定量分析法.用该法检测800份正常人血清,确定正常值参考范围,将临床血清标本100份与bayer Acs:180全自动发光体系统进行比较.结果:本方法的最低检出量为2.0 ng /mL,线性范围2.0~600.0 ng/mL,批内和批间的变异率分别为6.7%和7.7%,回收率在98.2%~102.5%之间.与CEA(3 μg/mL)的交叉≤0.15%;与铁蛋白(10 μg /mL) ≤0.04%;与人血清白蛋白(200 g/L)≤2.5×10-8,与人血清丙球蛋白(100 g/L)≤2.0×10-8,与bayer Acs:180比较相关系数r=0.994(P<0.001).结论:建立的甲胎蛋白化学发光免疫分析法可常规用于临床检测.  相似文献
9.
大鼠胎肝干细胞的体外分离、培养与鉴定   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:体外分离、培养原代大鼠胎肝干细胞(HSCs),并对其生物学特性进行鉴定。方法:采用胶原酶灌注法及剪碎消化法分离大鼠胎肝干细胞,并用含10%优等胎牛血清的H-DMEM培养液培养。利用免疫细胞化学方法在激光共聚焦扫描显微镜下观察该细胞表面抗原的表达情况,进行鉴定。结果:分离的大鼠胎肝干细胞体外培养24 h贴壁,5 d左右可长成单层,光镜下为致密圆形细胞,边缘清楚。8 d后细胞铺展,呈上皮样,表达甲胎蛋白(AFP)抗原、细胞角蛋白(CK)18、细胞角蛋白(CK)19。结论:分离并鉴定为大鼠胎肝干细胞可在体外培养条件下迅速扩增。  相似文献
10.
CZHC/8571细胞株来源于1例血清甲胎蛋白(AFP)和乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阳性的肝细胞型肝癌伴慢性活动性肝炎患者。采用组织块培养法,9个月共传25代。从第10代开始进行生物学特性检测,其细胞形态和糖原染色经光学和电子显微镜观察均与原始癌细胞一致;细胞生长指数、分裂指数和倍增时间分别为7.9、70‰和64h;染色体主流数为84;C组染色体数目普遍增多,结构异常可见单、双体断裂、易位和环状染色体;浓缩20倍的24h培养液中即可测及AFP(对流法阳性);分别以5×10~6个细胞接种3只裸鼠,50~60d后均形成移植瘤。结果表明CZHC/8571细胞株是具有能产生和分泌AFP、HBsAg功能的人类肝癌细胞株。  相似文献
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