中药调整性早熟儿童青春发育进程的机制研究

目的:从神经内分泌调节及基因表达的角度,探讨调整性早熟儿童青春发育进程的滋阴泻火中药和益肾填精中药有效调节下丘脑垂体促性腺机能、促生长机能的作用机制。方法:青春期大鼠分别予以喂饲滋阴泻火中药或益肾填精中药。采用神经生物学实验方法(下丘脑推挽灌流、组织匀浆、脑片孵育及免疫组化法)检测下丘脑促性腺区促性腺激素释放激素(gonadotropinreleasinghormone,GnRH)的含量、脉冲释放频率与幅度,以及中枢氨基酸递质、神经肽Y及β内啡肽释放的变化;采用定量逆转录聚合酶链反应检测下丘脑GnRH、生长激素释放激素(growthhormonereleasinghormone,GHRH)、生长抑素(somatostatin,SS)、腺垂体卵泡刺激素(follicularstimulatinghormone,FSH)、黄体生成素(luteinizinghormone,LH)、生长激素(growthhormone,GH)、长骨干骺端胰岛素样生长因子Ⅰ(insulinlikegrowthfactorⅠ,IGFⅠ)基因及蛋白的表达水平。结果:滋阴泻火中药可明显抑制下丘脑促性腺区兴奋性氨基酸递质的释放,促进抑制性氨基酸递质、神经肽Y和β内啡肽的释放,使下丘脑GnRH神经元的功能活动降低,下调GnRH、FSH及LH基因的表达水平,上调下丘脑SS基因的表达,并下调垂体GH及长骨干骺端IGFⅠ基因的表达,从而明显抑制下丘脑垂体的促性腺机能及促生长机能。益肾填精中药则可明显抑制下丘脑促性腺区神经肽Y的释放,使下丘脑GnRH神经元的功能活跃,上调GnRH、FSH及LH基因的表达,下调下丘脑SS基因的表达,上调垂体GH及长骨干骺端IGFⅠ基因的表达,从而明显促进下丘脑垂体的促性腺机能及促生长机能。结论:滋阴泻火中药和益肾填精中药可通过调整机体的神经内分泌调节机制,调整下丘脑GnRH、SS,腺垂体FSH、LH、GH及长骨干骺端IGFⅠ基因的转录,有效调节下丘脑垂体的促性腺机能及促生长机能。这可能是滋阴泻火中药和益肾填精中药可有效调整性早熟患儿青春发育进程及改善骨骼发育的主要作用机制。  

重组人生长激素在体外对人胃癌细胞作用的研究

目的：研究重组人生长激素（rhGH）在体外对胃癌细胞生长的影响。方法：设对照组、rhGH组、5-氟尿嘧啶（5-FU）组和rhGH加5-FU组共4组,依rhGH浓度不同,rhGH和rhGH加5-FU组又各分4个亚组。利用体外细胞培养、MTT比色、流式细胞仪及免疫细胞化学等方法,测定不同浓度的rhGH对人胃癌细胞株MGC803肿瘤抑制率、细胞周期、细胞增殖指数（PI）及核增殖抗原Ki-67表达的影响。结果：rhGH在体外无明显促进MGC803细胞分裂增殖作用;对照组与各rhGH组比较,肿瘤抑制率、PI、Ki-67表达强度差异均无显著性（P〉0.05）;rhGH各亚组间比较差异亦无显著性;5-FU组与rhGH组及对照组比较,各rhGH加5-FU组与rhGH组及对照组比较细胞抑制率增加,阻滞于G0-G1期的细胞数增加,S期细胞明显减少,PI明显降低（P〈0.05）,Ki-67表达强度明显下降。结论：重组人生长激素在体外不会促进胃癌细胞的增殖。  

重组生长激素对兔血脂及肝脏LDL受体mRNA的影响

目的研究重组生长激素(recombinant growth hormone,rGH)对高胆固醇饮食的新西兰兔的血脂调节作用及rGH对肝脏低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)受体mRNA表达的影响.初步探讨rGH影响血脂的机制.方法①健康新西兰白兔,均为雄性,兔龄4个月,体质量(2.2±0.3)kg,随机分组观察高胆固醇饮食的条件下,rGH对血脂的影响.②RT-PCR技术测定兔肝低密度脂蛋白受体(low density lipoprorein receptor,LDL-R)mRNA的表达情况.结果①rGH组血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)低于对照组(P＜0.01)但对甘油三酯(TG)无明显影响.②rGH组LDL-RmRNA的表达高于对照组(P＜0.01).结论rGH能够有效的降低高胆固醇饮食条件下的TC、LDL-C,2.rGH降血脂的作用,可能与rGH促进LDL-R mRNA表达上调有关.  

GH-IGF-1轴的作用机制

下丘脑-GH-IGF-1轴是一个重要的人体内分泌代谢轴，对生长发育的调控贯穿人类的一生，尤其从胎儿期到青春期的发育中起重要的调控作用。近年来的研究表明，很多因素包括生长激素受体(GHR)、瘦素(leptin)、胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP)、泌乳素、甲状腺素、表皮生长因子(EGF)以及对胰岛素的敏感性等，任何对下丘脑-GH-IGF-1轴产生影响的因素均可影响人体的生长。  

生长激素受体基因单核苷酸多态性与特发性矮小的相关性

生长激素受体(GHR)与生长激素结合,介导其在人体细胞内的信号转导,影响生长激素释放激素-生长激素-胰岛素样生长因子内分泌轴的功能,对软骨的发育起重要作用。同时,GHR基因变异与特发性矮小的发生密切相关。GHR基因的单核苷酸多态性(SNP)广泛存在于普通人群及特发性矮小人群中,不同SNP位点对GHR功能影响不同,GHR SNP与部分特发性矮小的发生密切相关。因此,GHR SNP可能是影响血浆胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平及部分特发性矮小发生的重要因素。  

重组人生长激素对败血症大鼠肠粘膜屏障功能保护作用的机制研究

目的观察重组人生长激素(RHGH)对败血症大鼠肠粘膜屏障功能的保护作用并探讨其可能的作用机制。方法采用腹腔注射E.COLI复制大鼠败血症模型。42只健康雌性SD大鼠随机分为正常对照组(C组)、败血症组(S组)及RHGH治疗组(T组),S组及T组又依观察时点再分为1D、3D两个亚组(T1D,T3D,S1D,S3D)。应用RT-PCR、免疫组化、放射免疫等方法,动态观测肝组织IGF-1MRNA表达情况、肠粘膜BCL-2蛋白表达水平及细菌移位、血浆生长激素(GH)及胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平及肠道形态等指标的变化情况。结果1RHGH能明显减轻败血症大鼠肠粘膜结构损伤,减轻肠道细菌移位。2T组大鼠肠粘膜BCL-2表达水平(T1D:2441±117;T3D:3628±235)明显高于S组水平(S1D:321±36;S3D:1873±57)(P<0.01)。3T组大鼠血浆GH水平〔T1D:(1.28±0.24)ΜG/L;T3D:(2.14±0.48)ΜG/L〕显著高于S组水平〔S1D:(0.74±0.12)ΜG/L;S3D:(0.60±0.18)ΜG/L〕(P<0.01)。4T组大鼠血浆IGF-1水平〔T1D:(168.94±65.67)ΜG/L;T3D:(201.56±64.98)ΜG/L〕明显高于S组水平〔S1D:(116.72±13.96)ΜG/L;S3D:(107.50±23.53)ΜG/L〕(P<0.05)。5T组大鼠肝IGF-1MRNA表达水平〔T1D:(0.98±0.20);T3D:(1.76±0.17)〕显著高于S组水平〔S1D:(0.38±0.09);S3D:(0.46±0.10)〕(P<0.01)。结论RHGH可能通过抑制肠粘膜上皮细胞凋亡及GH/IGF-1的作用来维护败血症大鼠肠粘膜屏障功能。  

生长激素在肠瘘治疗中的作用

肠瘘是腹部外科常见的严重并发症,患者常由于营养障碍导致水电解质和酸碱失衡及严重感染、多脏器功能衰竭.2003年1月至2006年12月,我科应用生长激素联合肠外营养(PN)对8例腹部手术后出现肠瘘的患者进行治疗,结果发现生长激素对促进肠瘘愈合取得了较好的效果,现报告如下.  

人垂体腺瘤细胞原代培养的纯化及其激素的表达与分泌

【目的】探讨原代培养垂体腺瘤的细胞纯化方法及其激素表达与分泌的特点。【方法】采用三种原代培养方法对垂体腺瘤细胞进行培养，方法Ⅰ为目前常用的垂体瘤细胞培养方法，方法Ⅱ结合使用右旋颉氨酸（D-valineDMEMD-valine）培养液，方法Ⅲ采用反复贴壁法结合DMEMD-valine培养液培养。观察其细胞形态变化和生长特征，放射免疫法测定不同培养时间培养液中相应激素的水平。免疫组织化学染色法检测培养细胞生长激素（growthhormone，GH）、泌乳素（prolactin，PRL）的表达。【结果】3种方法均能成功培养出垂体腺瘤细胞，呈圆形或椭圆形，其纯度随培养时间的延长逐渐下降，培养第20天其平均纯度分别为40％，46％，96％。方法Ⅲ明显高于方法Ⅰ和方法Ⅱ，差异具有显著性意义（P〈0．01）；培养液中均含有相应激素。且3种方法的激素分泌量没有统计学差异（P〉0．05）；腺瘤细胞分别呈GH，PRL阳性表达，成纤维细胞表达Ⅰ型胶原。【结论】方法Ⅲ可得到纯度达95％以上的人垂体腺瘤细胞，纯化后的细胞可分别呈GH和PRL阳性表达并具有良好的激素分泌功能，为进一步研究人垂体腺瘤的发病机理、药物治疗和颅外移植等方面奠定了实验基础。  

宫内发育迟缓生后持续矮小儿的临床研究进展

宫内发育迟缓(Intrauterine growthretardation IUGB)又称小样儿或小于胎龄儿(small for gestational age SGA)是指出生体重或身长低于标准化生长图中第10百分位或-2SD的一组新生儿.可分早产小样儿、足月小样儿、过期小样儿.一般以足月小样儿为主,其出生体重低于2500g.IUGR生后持续矮小指出生后身长不能跟上正常儿童生长速率,若4岁后身高仍低于同龄儿平均身高的-2SD为IUGR持续矮小[1].现将近年的相关研究综述如下: