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1.
基因芯片及其在医学研究中的意义   总被引:23,自引:1,他引:22  
基因芯片技术是90年代兴起的一项前沿生物技术,它可以将生物学中许多不连续的分析过程,移植到固相的介质芯片上,并使其连续化和微型化。这是对传统生物技术如检测、DNA杂交、分型和测序技术等的重大创新和飞跃。由于它横跨生命信息、生物物理等众多研究领域,涉及生命科学、化学、微电子技术、计算机科学、统计学和生物信息学等诸多自然学科,故已成为当今多学科交叉、综合的前沿研究热点。基因芯片技术虽然仅有几年的发展历史,但在生命科学诸多领域中已显示出巨大的潜力和诱人的前景。在国际上尤其是在美国掀起了自人类基因组计划…  相似文献
2.
一种新的牛神经肽——酸性牛神经肽1的测序   总被引:18,自引:5,他引:13  
用PE-ABI491A型蛋白测序仪对酸性牛神经肽1(ABNP-1)进行了测序研究。结果表明:ABNP-1由3个酸性氨基酸Glu排列而成,即Glu-Glu-Glu。迄今为止,虽有大量神经肽的报道,但尚未见有酸性牛神经肽的报道。这表明ABNP-1是一种新的牛神经肽。酸性牛神经肽的发现为研究新的神经调节机制提供了可能。  相似文献
3.
目的:调查从中国病人血清中分离的戊型肝炎美丽(HEV)基因型。方法:应用聚合酶链反应法(PCR)和直接测序法对从中国14个城市检测到的45株HEV开放读码框架2(ORF2)的部分基因序列(nt6461-6860及nt5994-6294)进行分析。结果:45株HEV中,41株(91%)与缅甸株属同一个基因型,与中国代表株HEV核苷酸序列的同源性均在98%以上。仅4株与3个HEV原型株差异较大,与缅甸株/中国株同源性为77%-80%,与墨西哥株的同源性为74%-76%,与新发现的美国株/猪(US/Swine)HEV的同源性为74%-77%;基因进化树分析表明,该4株HEV可能为一新基因型的2个不同亚型,它们与原型墨西哥株、缅甸株和美国株/猪HEV明显不同。结论:中国戊型肝炎患中,多数国原型株HEV,仅少数感染新基因型HEV。  相似文献
4.
获得鼠抗人精浆蛋白单抗可变区基因,为单链抗体的构建及表达奠定基础。方法;从分泌抗人精浆蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞系E4B7中提取总RNA,经反转录,PCXR分离获得了γ-Sm-McAb轻链可变区基因和重链可变区基因,分别克隆入pUC19质粒中,用全自动荧光DNA序列分析仪对VH,VL基因序列进行了分析。  相似文献
5.
重组人蛋白激酶CK2α亚基cDNA的克隆与测序   总被引:13,自引:0,他引:13  
6.
Zhang YH  Tang BS  Guo JF  Xia K  Xu B  Cai F  Deng HX  Yan XX  Chen T  Cao L  Pan Q  Long ZG 《Zhonghua yi xue za zhi》2005,85(22):1538-1541
目的探讨常染色体隐性遗传早发性帕金森综合征6型(PARK6)。PINK1基因的突变及临床特征。方法应用聚合酶链反应(PCR)、DNA直接测序和限制性内切酶酶切等技术对11个常染色体隐性遗传早发性帕金森综合征家系先证者进行PINKl基因的突变分析。结果在两个家系中检测出PINK1基因两个新的点突变:位于第4外显子938位的C→T,导致所编码的313位氨基酸由苏氨酸变为蛋氨酸(1313M);位于第7外显子1474位的C→T,导致第492位提前出现终止密码子,截短了后面90个氨基酸。在另一个家系中检测出一个同义突变(Y454Y)。具有PINK1基因突变的患者临床特征包括发病年龄早,病情进展慢,腱反射活跃,症状波动明显,睡眠后症状减轻,对小剂量多巴制剂反应良好,未见到由左旋多巴诱导的运动障碍。结论。PINK1基因突变是常染色体隐性遗传早发性帕金森综合征的常见病因;我国大陆存在PARK6家系;PARK6具有临床异质性。  相似文献
7.
广东地区丙型肝炎患者的HCV基因分型研究   总被引:7,自引:2,他引:5  
胡斌  张孝文  程钢  何蕴韶  劳绍贤 《热带医学杂志》2006,6(10):1071-1072,1127
目的了解广东地区慢性丙型肝炎患者的HCV基因分型情况,为丙型肝炎病毒的诊断和预防提供有力依据。方法根据丙型肝炎病毒RNA全序列,在5′-NCR区设计引物,通过套式PCR扩增,特异性产物测序分析并分型。结果检测HCV感染样本58例,扩增出阳性样本47例,共检出3种基因型,分别为1b,2a和4型,其中1b占85.1%,2a占12.8%,4型占2.1%,4型为中国人群中极少报道被检出的罕见型。结论广东地区HCV基因型主要为1b型,其次为2a型,与中国其它地区HCV基因型分布比较一致。  相似文献
8.
铜绿假单胞菌噬菌体PaP3基因组测序   总被引:7,自引:5,他引:2  
目的 对新分离的铜绿假单胞菌dsDNA溶原性噬菌体PaP3进行基因组测序。方法 用CsCl梯度离心纯化噬菌体PaP3颗粒,撮噬菌体基因组DNA,建立shot-gun随机文库,从文库中随机挑取克隆进行测序并完成序列组装,同时通过限制性内切酶图谱结合酶切片段的变性、复性实验分析基因组末端。结果 共进行了778条序列的测定与拼接,测序量达到13.5倍覆盖率,得到一条长为44249bp的重叠群,此重叠群错误率为9.46ERR/10KB,测序结果和酶切图谱分析表明该PaP3基因组是一44249kp长的线笥平端dsDNA分子。其碱基组成为A=24.24%,G=26.18%,T=23.63%,C=25.94%;稀有碱基=0;A+T=47.87%,C+G=52.13%。结论 噬菌体PaP3基因组是由44249bp组成的线性平端双链DNA分子。测序完成为生物信息学分析和功能基因研究奠定了基础。  相似文献
9.
小鼠肝脏特异的微RNA真核表达载体的构建及鉴定   总被引:7,自引:3,他引:4  
目的利用分子克隆技术,构建微RNA(microRNA,miRNA)真核细胞载体.方法人工合成小鼠肝脏特异的微RNA(miR-122)前体基因序列,并添加酶切位点及polyT转录终止序列,经退火处理后形成双链结构,插入小干涉RNA(small interfering RNA,siRNA)表达载体pAVU6 27中,经酶切鉴定和测序证实后,构建成为miR-122真核表达载体(pAVU6 27-mir122).结果合成的基因序列完全正确并成功克隆到真核表达载体pAVU6 27上.结论 miR-122真核表达载体的构建,为进行真核细胞转染及miR-122表达的研究奠定了基础.  相似文献
10.
siRNA抑制肝癌细胞株HepG2 Survivin基因表达的研究   总被引:6,自引:0,他引:6  
目的 研究siRNA对肝癌细胞株HepC2中Survivin基因表达的抑制作用。方法 设计、合成一对Survivin编码基因的反向重复序列,中间间隔9个核苷酸序列,通过定向克隆至载体Psilencer2.1,构建siRNA真核表达载体,经稳定转染HepG2细胞后应用RT-PCR及流式细胞术检测肝癌细胞中Survivin基因mRNA及蛋白质表达的抑制情况。结果 测序证实siRNA真核表达载体构建成功。通过RT-PCR及流式细胞术检测,siRNA在mRNA及蛋白质水平抑制Survivin基因表达分别达73%和75%。结论 构建的:Psilencer( )-Survivin重组质粒能有效抑制Survivin基因在肝癌细胞株HepG2中的表达。为肿瘤的生物学治疗提供了新的方法和材料。  相似文献
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