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1.
目的 以乙型肝炎病毒(HBV)基因异质性来探讨HBV准种群在慢性感染者中的存在状态。方法应用聚合酶链反应(PCR)法,自18例慢性患者血清中分别扩增前C/C基因、P基因逆转录酶区(RT)、HBV全S区、X基因和全基因组序列,克隆人pGEM Teasy质粒,挑选81克隆进行DNA测序以确定病毒的变异程度。结果除外大段缺失突变的克隆,来源于同一患者前C/C区、RT区、全S区、X区和全基因组不同克隆之间的碱基序列同源性分别为98.0%-99.1%、98.7%-99.3%、97.5%-100%、93.0%-98.20A,和96.6%-97.5%。前C区A83点突变、C抗原内部缺失较为常见,缺失突变、终止替换突变、短序列的插入或缺失突变造成的移框突变在各个区域中均可检出,X基因(核心蛋白启动子区,CP)内部缺失突变不仅导致X蛋白羧基端的多样性,而且调控HBeAg的表达。编码截短型表面抗原中蛋白和缺陷病毒基因亦在患者外周血中。结论 多区域测序结果提示HBV慢性患者体内HBV呈现准种群共存,X区(CP区)内存在热点缺失突变区,CP区的变异可能影响前C蛋白的表达,这些变异可能与患者不良预后有关。病毒蛋白的氨基酸的替换突变表现的个体特异性值得进一步研究。  相似文献
2.
4种氟喹诺酮类药物对金黄色葡萄球菌的防耐药变异浓度   总被引:19,自引:1,他引:18  
目的 建立防耐药变异浓度(MPC)体外测定方法,并测定氟喹诺酮类(FQ)药物对金黄色葡萄球菌的MPC。方法 肉汤法富集10^10CFU/ml金黄色葡萄球菌ATCC25923和20株对环丙沙星敏感的金黄色葡萄球菌临床分离菌,采用平板稀释法测定莫西沙星、加替沙星、帕珠沙星和环丙沙星对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)、MIC。初测MPC(MPCpr)及MPC。结果 莫西沙星、加替沙星、帕珠沙星和环丙沙星对金黄色葡萄球菌ATCC25923的MPC分别为0.18、0.3、0.75l和1.8μg/ml,选择指数(MPC/MIC99)分别为9.0、7.5、8.0和10.6。而以上药物对20株临床分离菌的MPCpr90值分别为1、1、4和8μg/ml,MPCpr90/MIC90分别为8、8、16和16。结论 莫西沙星和加替沙星限制金黄色葡萄球菌耐药突变株选择的能力优于帕珠沙星和环丙沙星。结合药代动力学参数,莫西沙星和加替沙星对环丙沙星敏感的金黄色葡萄球菌临床分离菌能有效限制耐药突变株的选择,而环丙沙星则容易选择出耐药突变株。  相似文献
3.
线粒体16189T→C变异与2型糖尿病遗传易感性的相关性研究   总被引:17,自引:0,他引:17  
目的了解线粒体DNA16189T→C变异在2型糖尿病(DM)人群中的发生率和该基因变异与胰岛素抵抗的关系以及对糖尿病遗传易感性的影响。方法利用聚合酶链反应结合限制性内切酶酶切分析,对383例随机抽取的无亲缘关系的2型DM患者及151例无糖尿病的正常对照者进行筛查。结果(1)2型DM患者中mtDNA16189T→C变异的发生率显著高于正常对照组(20%,P<0.0001);(2)母亲有糖尿病的2型DM患者中mtDNA16189T→C变异的发生率高于无母系糖尿病家族史的患者(27%,P=0.012);(3)在2型DM患者中,与mtDNA16189T→C变异阴性组相比,mtDNA16189T→C变异阳性组的空腹胰岛素水平升高(1.5μU/L±2.5μU/Lvs1.2μU/L±1.2μU/L,经对数转化后为0.24μU/L±0.07μU/Lvs0.2μU/L±0.07μU/L,P=0.031),胰岛素敏感指数降低(-4.58±0.76vs-4.42±0.75,P=0.03)Homa胰岛素抵抗指数升高(6.52±10.69vs5.03±6.35,经对数转化后1.47±0.76vs1.30±0.75,P=0.04)。(4)在正常对照组中,mtDNA16189T→C变异阳性组与阴性组的年龄、性别、体重指数、腰臀围比、血脂、空腹血糖、空腹胰岛素、胰岛素敏感指数(ISI)以及Homa胰岛素抵抗指数间的差异均无显著意义(P>0.05)。结论mtDNA16189T→C变异是2型DM的易感基因之一,它可能通过影响线粒体的能量代谢,使ATP产生受阻,从而影响胰岛素敏感性血糖摄取和糖代谢,导致外周组织的胰岛素抵抗。  相似文献
4.
现代生活方式与人类体质演化   总被引:16,自引:1,他引:15  
生存环境的恶化、饮食结构的改变、吸烟饮酒人数的剧增、尚补习俗的泛化、精神紧张躁动等生存环境和生活方式的深刻变化 ,使现代人的人群体质发生了变异 ,具有形盛体实、郁火内生、湿热蕴积等特征。这是众多“文明病”高发病率、低龄化的根源之一。  相似文献
5.
多基因变异的累积与肿瘤发生发展的关系   总被引:13,自引:1,他引:12  
吕有勇 《中华医学杂志》1997,77(11):877-880
多基因变异的累积与肿瘤发生发展的关系吕有勇20年来,分子生物学理论和技术与医学的结合,已从生根、开花阶段进入结果的时代,随着人类基因组计划的完成和基因组计划后时代的到来,与人类各种疾病的相关基因不断地被鉴定和克隆出来。同时建立了许多新技术和新方法,由...  相似文献
6.
基因芯片技术在检测乙型肝炎病毒 P区YMDD变异中的研究   总被引:13,自引:0,他引:13  
目的 用基因芯片检测未经抗病毒治疗的HBV DNA阳性血清中HBV P区YMDD变异情况,从分子生物学角度了解YMDD两种变异的状态,为科学合理地指导临床抗病毒治疗及预测患者临床预后提供有力的依据。方法 将150份未经抗毒治疗的HBV DNA阳性血清,用PCR方法扩增P区,扩增产物与基因芯片上的寡核苷酸进行杂交,杂交结果通过扫描仪扫描到计算机上,经软件分析可得到HBVY MDD野生型及其YVDD和/或YIDD变异型结果,并对部分阳性标本用基因序列测序证实。结果 150份HBV DNA阳性血清,用基因芯片方法检出阳性标本(包括YMDD野生型和变异型)共122例,占81.3%,阴性标本28例,占18.7%;在122例阳性标本中,单纯YMDD野生型(即无变异标本)有90例,占73.8%;YVDD变异28例,占22.9%;YIDD变异2例,占1.6%;YVDD和YIDD混合变异2例,占1.60A,,变异株检出率为26.2%,而且变异株均与野生株共存。其中8份阳性标本进行基因序列测序,证实与芯片检测结果完全一致。结论(1)用当前先进的基因芯片技术检测HBVP区YMDD变异,操作简便,结果可靠,特异性高。(2)基因芯片可快速、同时、多人份检出HBVYMDD野生株及其YIDD和/或YVDD突变株的共同感染。(3)部分HBV感染者在未经抗病毒治疗情况下已自然存在HBV YMDD变异,而且变异株均与野生株共存,其中以YVDD变异为多。(4)HBV感染患者在治疗前后有必要检测是否存在HBV YMDD变异株感染,为指导临床科学合理用药和制定治疗方案提供依据。  相似文献
7.
Objective To assess the correlation between hepatitis B virus (HBV) surface gene mutant infection and hepatitis B (HB) vaccination failure. Methods Using sera from 106 infants who were born to HBV carrier mothers and failed in HB immunoprophylaxis, HBV S gene was amplified by PCR, transferred to nylon membranes for Southern blots, and then hybridized with oligonucleotide probes. Eleven of non-hybridizing samples were used for DNA sequencing. Results 93.4% (99/106) of the samples were HBV DNA positive, and 30.3% (30/99) failed to hybridize with at least one of the four probes. DNA sequencing confirmed that 10 of the 11 samples had an S gene mutation with amino acid (aa) change. The identified mutants included nucleotide (nt) 546T→A(aa131N→T), nt531T→C (aa126I→T), nt491A→C (aa113T→P), nt491T→A (aa113S→T), nt533C→A (aa127P→T), nt581T→A (aa143S→T), nt636A→T (aa161Y→F), and nt679A→C (aa175L→F). The sequence in one mother-infant pair was completely the same, with mutations at aa131 and aa161. Conclusions The prevalence of HBV surface mutants is about 30% in the children failing in HB vaccination. HBV mutants can infect infants by maternal-infant transmission.  相似文献
8.
目的 了解静脉血栓虱和正常人中凝血因子V Leiden和凝血酶原基因G20210A变异的发生率。方法 用多聚酶链反应(PCR)及限制性内切酶分析一步法,对97例静脉血栓患者和100名正常人的凝血因子V Leiden9FV Arg506Gln)和凝血酶原基因G20210A变异进行分析。结果 凝血因子V Leiden基因和凝血酶原基因PCR产物经TaqⅠ酶切消化后电泳显示为157bp和98bp片段,静  相似文献
9.
双虎清肝颗粒合用拉米夫定治疗慢性乙型肝炎疗效观察   总被引:12,自引:0,他引:12  
慢性乙型肝炎(CHB)是我国的常见病、多发病,是引起肝硬化、肝癌的主要原因。核苷类似物拉米夫定对CHB有较好治疗效果,但应用时间过长可出现病毒变异使之应用受到限制。我们将中药复方制剂双虎清肝颗粒与拉米夫定合用治疗CHB,取得较好效果。1资料与方法1.1一般资料我院于2003年6  相似文献
10.
目的:研究乙肝病毒(HBV)多聚酶YMDD变异后HBV DNA复现对慢性HBV感染患者临床经过的影响。方法:用mp PCR-RFLP技术检测24例拉米夫定治疗过程中出现HBV DNA复现的患者血清,对YMDD变异者的系列临床资料,应用SAS软件进行统计学分析。结果:检出YMDD变异18例;YMDD变后转氨酶水平较HBV DNA转阴时有显著升高,并反跳至治疗前水平。结论:YMDD变异后,部分病例可有类似肝炎发作、甚至肝脏失代偿的表现。  相似文献
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