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1.
问号状钩端螺旋体外膜单克隆抗体凝集反应特性的研究   总被引:6,自引:6,他引:1  
Three McAb were produced against an outer envelope preparation from Leptospira, interrogans, serovar Lai by fusion of SP2/0 myeloma cells with immune BALB/c mice spleen cells. The fusion rate was 96% and the antibody positive rate was 50%. One of the hybridomas, E4B11C9, reacted with 13 of the 13 serovars of the Icterohaemorrhagiae serogroup in microscopic agglutination test (MAT) but did not react with the 18 representative serovars of L. interrogans and L. biflexa serovar patoc and Leptonema illini. For all non-reactive serovars the MAT titres were greater than 1:25. The McAb, E4B7G5, reacted similarly with all serovars except smithi and tonkini. E4B7D4 reacted also similarly with all serovars except serovars birkini, ndambari, bogvere, smithi and tonkini. Therefore, 3 McAb showed serogroup specificity and partial serogroup specificity by agglutination. The agglutination titres were high and hybridomas were stable, so it might be useful in providing a simple, rapid method for the classification and identification of clinical isolates such as pathogenic L. interrogans in place of the complicated and time-consuming conventional methods.  相似文献
2.
裸鼠人成骨肉瘤骨模型的建立   总被引:6,自引:6,他引:2  
3.
血管生成素样蛋白2单克隆抗体的制备和分析   总被引:5,自引:5,他引:0  
目的:研制抗人血管生成素样蛋白2(ANGPTL2)单克隆抗体,为进一步进行ANGPTL2的表达分析和功能研究,揭示其在糖尿病肾病发生发展过程中的可能作用创造条件.方法:以纯化的ANGPTL2重组蛋白皮下多点注射免疫BALB/c小鼠,分离脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,经HAT选择性培养基筛选,克隆和亚克隆化培养,ELISA鉴定,得到能稳定分泌抗人ANGPTL2的杂交瘤细胞;以硫酸铵沉淀法从杂交瘤细胞培养上清中初步纯化、制备抗人ANGPTL2单抗,以Western blot、细胞免疫染色和免疫组化染色相结合的方法对制备的单抗进行滴度和特异性鉴定.结果:得到1株能稳定分泌抗ANGPTL2的杂交瘤细胞,从其培养上清中制备的抗ANGPTL2单克隆抗体具有较好的特异性和较高的滴度,可用于Western blot、细胞免疫染色和免疫组化染色.结论:成功地研制了抗ANGPTL2单克隆抗体,为进一步进行ANGPTL2的表达分析和功能研究,揭示ANGPTL2的功能及其在糖尿病肾病发生发展过程中的可能作用创造了条件.  相似文献
4.
Four McAbs (1A7E7, 2F9D4, 2G3H5, 1A7H12) against outer membrane antigens of L. interrogans serovar Lai strain 017 were produced by hybridoma technique. McAb 1A7E7 was identified to be IgG2a, the rest IgG1 by immunodiffusion. Outer membrane antigens of three pathogenic leptospiral strains (017, 601, 156) and two non-pathogenic leptospiral strains (Patoc I, 3055) were analysed by SDS- polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and immunoblotting with McAbs. It was found that McAb 1A7E7 recognized specifically the 42kd antigenic band of strain 017; McAb 2F9D4 the 42kd antigenic bands of strain 017, 601, 156, and McAbs 2G3H5 and 1A7H12 the 31 kd antigenic bands of 017, 601, 156. Further study of antigenic properties possessed by pathogenic leptospira may provide some new clues to look for specific diagnostic and protective antigens.  相似文献
5.
特发性血小板减少性紫癜的诊治进展   总被引:4,自引:0,他引:4  
由于诊断特发性血小板减少性紫癜(ITP)的标准差异较大,使临床试验结果难以互比,也给临床实践带来不便.为解决此问题,ITP国际工作组于2007年召开会议,就ITP的命名、定义、分期以及严重度分级、预后和疗效标准等达成一些新共识.随着新的治疗药物问世,ITP治疗也取得显著进步.利妥昔单抗是一种抗CD20单克隆抗体,可清除能产生自身抗体的B淋巴细胞,因其疗效高和安全性好,现已在ITP中广为应用.最近研究表明,血小板生成减少可能与ITP发生有关.因此,新的血小板生成刺激剂,如血小板生成素受体激动剂Romiplostim和Eltrombopag已成为治疗ITP的新选择.  相似文献
6.
目的探讨TLR4单克隆抗体(toll like receptor4monoclonal antibodies,TLR4mAb)对葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导的急性期溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)小鼠肠黏膜的促炎因子TNF-α、IFN-γ、IL-1β的影响。方法30只BALB/c小鼠分为A-E组,分别为对照组、模型组以及低、中、高剂量干预组。A组小鼠饮用蒸馏水7d;B-E组小鼠仅饮用5%DSS水溶液7d以产生急性期溃疡性结肠炎模型。造模开始的同时,3组干预组小鼠分别给予低、中、高剂量TLR4mAb腹腔内注射,对照组及模型组给予腹腔内注射生理盐水,以观察TLR4mAb的干预作用。观察指标包括疾病活动指数(disease activity index,DAI)、结肠组织病理学评分(histopathological score,HPS)。造模及干预7d后处死小鼠,RT-PCR法检测各组肠黏膜TNF-α、IFN-γ、IL-1β的mRNA表达。结果(1)与对照组相比,模型组小鼠结肠黏膜DAI及HPS明显增高(P<0.01)。与模型组相比,在使用TLR4mAb干预后低、中、高剂量组DAI和HPS均有不同程度的缓解,但无明显剂量依赖关系。(2)与模型组相比,在使用TLR4mAb后炎症因子TNF-α、IFN-γ、IL-1β在小鼠结肠黏膜中的表达均有不同程度的降低,并呈剂量依赖关系。结论TLR4mAb可能通过下调小鼠结肠黏膜促炎因子TNF-α、IFN-γ、IL-1β的mRNA表达而发挥其干预作用。  相似文献
7.
单克隆抗体分析单纯疱疹病毒的抗原性   总被引:3,自引:3,他引:0  
用15种抗HSV型共同性McAb相2种分别抗HSV-1和HSV-2的型特异性McAb,分析了43株HSV临床株的抗原性。间接免疫荧光试验和改良ELISA的分机结果表明,从宫颈炎患者分离出的15株HSV中,1株为HSV-1,14株为HSV-2;从口唇和眼部感染病变中分离出的28株HSV均为HSV-1.用15种型共同性McAb对HSV的抗原性分析表明43株HSV分离株中,22株(51.2%)可与所有型共同性McAb反应,21株(48.8%)仅与部分McAb反应。结果表明,HSV临床分离株间及不同的HSV参考株间在抗原性上有明显差异,其原因有待进一步研究。  相似文献
8.
新胃癌相关抗原MG5-Ag、MG7-Ag及MG9-Ag的纯化及分析   总被引:3,自引:3,他引:0  
胃癌相关抗原对胃癌的诊断有重要价值。现有的消化道肿廇相关抗原对于胃癌缺乏敏感性或特异性。 作者应用本室制备的一组特异性强的鼠抗人胃癌单克隆抗体(McAb)MG5、MG7及MG9分别与溴化氢活化的Sepharose 4 B交联,制成免疫亲和层析柱,测得交联率分别达93.05%,92.7%,  相似文献
9.
黄疸出血群赖型017株钩端螺旋体外膜单克隆抗体免疫...   总被引:3,自引:3,他引:0  
BALB/c mice were immunized intraperitoneally with outer envelopes of serogroup icterohaemorrhagiae lai serovar strain 017 leptospires. Monoclonal antibodies against outer envelopes (IgG, agglutinating titre 1:25,600) were produced by hybridoma technique. The monoclonal antibodies ascites (diluted 1:100) 1 ml administered intraperitoneally 1 hour before the intraperitoneal injection of 2 x 10(8) leptospires of strain 017 and the subsequent daily administration of McAb in similar doses for five days protected 80% of guinea pigs. Survival rates of three control groups which received physiological saline, ascites of BALB/c mouse myeloma cell lines SP2/0, and monoclonal antibodies against Pseudomonas aeruginosa in place of monoclonal antibodies against outer envelopes of strain 017 leptospires were 10%, 20% and 10% respectively. When killed 20 days after challenge, guinea pigs of experiment group were normal at autopsy. Old pulmonary haemorrhage were present in the animals of three control groups. Passive immunoprotection experiments have demonstrated immunoprotection of monoclonal antibodies against outer envelopes of strain 017 leptospires. It will be valuable for separating protective antigen fraction of outer envelopes and studying new vaccine of leptospira.  相似文献
10.
木瓜蛋白酶制备抗人肝癌单抗F(ab‘)2及Fab片段   总被引:3,自引:3,他引:8  
仇凯  陈志南 《医学争鸣》1995,16(6):414-417
为了制备肝癌McAb HAb18F(ab’)2及Fab片段。用激活的木瓜酶分别在偏酸性和偏碱性条件下消化18h和1h,得到F(ab’)2和Fab片段,经DEAE-40HR阴离子交换色谱柱在Waters650E快速蛋白液相色谱系统(EPLC)上建立相应的纯化方法。该法制备F(ab’)2得率为43%-62%,制备Fab得率42%,其活性用免疫荧光法测定均为1.36×10^-9mol/L。本法操作简单,  相似文献
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