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1.
雷公藤内酯醇体内外抗肿瘤作用   总被引:16,自引:1,他引:15  
目的 研究雷公藤内酯醇(TPL)的体内外抗肿瘤作用.方法 应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测TPL对多种肿瘤细胞生长的抑制作用;不同浓度TPL(25,50及100 ng/mL)处理HL-60细胞24 h后,Annexinv-FITC/PI荧光染色法检测凋亡率,分光光度法检测细胞caspase-3酶活化程度;建立S180、U14、B16小鼠移植肿瘤模型进行体内实验,观察TPL体内抗肿瘤活性.结果 TPL对MCF-7、HI-60、MGC-803、HepG-2、U266、Ca-46、Hela等多种人肿瘤细胞均有很强的生长抑制作用,其IC50分别为34.37,5.51,31.95,6.31,9.74,26.96及9.75ng/mL;TPL实验组凋亡细胞百分率显著上升,caspase-3酶活化程度明显升高;对S180、U14、B16等小鼠肿瘤均有明显抑制作用,抑制率分别达到61.0%,41.8%及58.0%.结论 TPL体内体外均有较强抗肿瘤作用,其机制与激活caspase-3诱导肿瘤细胞凋亡有关.  相似文献
2.
全脑缺血再灌注损伤中JNK及Bim蛋白的表达   总被引:15,自引:1,他引:14  
目的 探讨大鼠全脑缺血再灌注氨基末端激酶或应激活化激酶(p—JNK)及与Bcl-2相互作用的细胞死亡调解子(Bim)蛋白表达的变化。方法 构建大鼠全脑缺血再灌注模型,采用TUNEL法原位检测凋亡锥体细胞,免疫印迹检测不同实验组中Bim及p—JNK蛋白表达。结果 缺血再灌注各组神经元细胞的凋亡率明显高于假手术组(P〈0.05)。缺血再灌注组p—JNK及Bim蛋白表达积分光密度值与假手术组相比差异有显著性(P〈0.05)。结论 在脑缺血及在灌注损伤中存在有JNK途径的过度激活,p-JNK蛋白与Bim蛋白表达为正相关。JNK途径的激活导致Bim蛋白表达增加,进而导致神经元细胞的凋亡明显增加。  相似文献
3.
目的:观察丹参多酚酸盐对猪急性心肌梗死后心肌细胞凋亡及心功能的影响。 方法:苏中幼猪21只,随机分为模型组和低、高剂量丹参多酚酸盐组。3组均经开胸结扎冠状动脉左前降支制作心肌梗死模型,造模成功后当日.高剂量丹参多酚酸盐组给予400mg丹参多酚酸盐加250 mL 5%葡萄糖生理盐水静脉滴注;低剂量丹参多酚酸盐组给予200mg丹参多酚酸盐加250 mL 5%葡萄糖生理盐水静脉滴注;模型组给予等体积的5%葡萄糖生理盐水静脉滴注。1次/d,连续给药7d。造模后4周,行核素门控心肌灌注显像评价各组动物心功能;处死动物,取心脏标本做石蜡切片,原位缺口末端标记法染色,高倍镜下计数心肌细胞凋亡指数。 结果:高、低剂量丹参多酚酸盐组动物梗死周边缺血区的,心肌细胞凋亡指数均明显下降,高剂量丹参多酚酸盐组与模型组比较。差异有统计学意义(P〈0.05)。心肌梗死后4周行核素门控心肌灌注显像,3组动物的梗死区均可见放射性稀疏区,但高、低剂量丹参多酚酸盐组放射性稀疏区较模型组明减显小。高剂量丹参多酚酸盐组心肌灌注得分与模型组相比,差异有统计学意义(P〈0.05);高剂量丹参多酚酸盐组动物的左室射血分数也高于模型组(P〈0.05)。 结论:静脉维持应用丹参多酚酸盐,能够减少猪急性心肌梗死后心肌细胞凋亡,促进梗死心脏心功能的改善,发挥心脏保护作用。  相似文献
4.
Background Histone deacetylase inhibitors (HDACIs) have been reported to induce apoptosis in cancer cells. The effects of trichostatin A (TSA) on gastric cancer cells have not been well characterized. This study was aimed to explore the effects and mechanisms of TSA on human gastric cancer SGC-7901 cells. Methods The cells were treated with TSA and analyzed by cell proliferation assay, Western blot, TUNEL assay, flow cytometry by fluorescein isothiocyanate (FITC) conjugated with Annexin V and PI staining, immunofluorescence analysis, analysis of subcellular fractionation, gene chips and real time polymerase chain reaction (PCR). Results TSA could inhibit cell growth and induced apoptosis in gastric cancer SGC-7901 cells through the regulation of apoptosis-related genes, such as Bcl-2, Bax and survivin. Further study indicated that the pan-caspase inhibitor z-VAD-fmk did not inhibit the apoptosis induced by TSA, and we did not observe the cleavage of poly ADP ribose polymerase (PARP) after TSA treatment too. In addition, apoptosis inducing factor (AIF) and EndoG were found to translocate from mitochondria to nucleus in the immunofluorescence assay and the Western analysis of subcellular fractionation confirmed the result of immunofluorescence assay. Conclusions The apoptosis induced by TSA in gastric cancer SGC-7901 cells involves a caspase-independent pathway.  相似文献
5.
【目的】探讨在以NG108-15细胞作为神经元代表、β-淀粉样蛋白25-35片段(Aβ25-35)诱导凋亡的阿尔茨海默病体外细胞模型中,人参皂苷Rg1保护神经元的作用及其机制。【方法】采用倒置显微镜观察细胞形态,结合流式细胞仪检测凋亡率,进行Aβ25-35造模浓度与时间的选择以及Rg1预处理最佳浓度时间的选择;在此基础上,采用荧光显微镜和数据处理系统(DMR)图像分析仪检测免疫细胞化学法标记的核因子-κB(NF-κB)的活性;采用免疫组化染色法检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)的表达;采用酶标光度计、半胱氨酸/天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)比色检测试剂盒检测caspase-3活性。【结果】20μmol/L Aβ25-35作用24 h可诱导NG108-15细胞凋亡,2μmol/L Rg1组的NF-κB活性与模型组比较显著性提高(P<0.01),Rg1预处理组Bcl-2表达呈阳性,且caspase-3活性较模型组显著性降低(P<0.01)。【结论】高浓度聚焦状的Aβ25-35可下调神经元内NF-κB的活性,诱导细胞凋亡,Rg1通过启动神经元中NF-κB的活化从而上调Bcl-2表达,抑制caspase-3活性而发挥保护神经元的作用。  相似文献
6.
丹参酮ⅡA诱导SGC7901胃癌细胞凋亡及机制   总被引:11,自引:0,他引:11  
目的观察从丹参中提纯的单体——丹参酮ⅡA(TanⅡA)在体外对SGC7901胃癌细胞的诱导凋亡作用,并对其分子机制作初步探讨。方法分别采用不同浓度梯度(1.0、2.0、4.0、6.0、8.0和10.0mg/L)的TanⅡA干预SGC7901胃癌细胞24、48、72h后,用四唑盐(MTT)比色法绘制肿瘤细胞生长曲线。采用以上浓度梯度的TanⅡ干预SGC7901细胞24h,或采用10.0mg/L的TanⅡA干预0、12、24、36、48h,应用碘化丙叮(PI)及AnnexinV双重染色法,通过流式细胞仪观察SGC7901的细胞周期及凋亡率。用透射电镜直接观察细胞凋亡形态。用RT-PCR检测不同浓度的TanⅡA干预24h后SGC7901细胞p53的mRNA表达。结果MTT法显示TanⅡA具有良好的抑制胃癌增殖作用,并时间、剂量依赖性地诱导肿瘤细胞凋亡。透射电镜下观察到典型的细胞凋亡形态,流式细胞术(FCM)显示TanⅡA可使SGC7901细胞周期阻滞于G1/S期。PCR检测发现随着TanⅡA干预浓度的逐步上升,胞内p53mRNA表达亦逐步上升。结论TanⅡA在体外可通过细胞周期阻滞及诱导凋亡达到良好的抑制胃癌细胞增殖效应,诱导胞内p53基因表达上调是所涉分子机制之一。  相似文献
7.
心肌营养素-1对谷氨酸诱导神经元凋亡的抑制作用及机制   总被引:10,自引:0,他引:10  
束晓梅  李振宏  陈雪梅  杜淑珍 《医学争鸣》2008,29(17):1555-1558
目的:探索重组腺病毒心肌营养素-1(Adv-CT-1)对谷氨酸(Glu)诱导神经元凋亡的保护作用及相关机制,为脑损伤提供新的治疗措施.方法:海马神经元分为3组:单纯Glu组、CT-1干预组(Adv-CT-1 转染)及对照组;利用相差显微镜检查、DNA片段检测、乳酸脱氢酶(LDH)活性及流式细胞技术,对各组神经元进行凋亡检测;Western Blot检测Caspase-3活性变化及线粒体内和胞浆内细胞色素C(Cyt C)水平变化.结果:Glu组神经元呈现明显形态改变,并见DNA梯状条带形成,CT-1组未见类似改变;Glu组神经元在Glu暴露后6,9及18 h,LDH释放量(14.3%,24.6%及28.4%)及凋亡率(6.2%,18.8%及26.4%)均高于CT-1组(分别为9.2%.16.1%,19.7%及3.6%,11.3%,16.1%);Glu组Caspase-3活性3 h即增加(25.6%),6及9 h达到62.4%及46.1%,CT-1组3 h时的Caspase-3表达分别为13.6%,45.2%及17.1%,均低于Glu组(P<0.05);Glu暴露30 min,神经元胞质内Cyt C水平增加,之后进行性增高,线粒体内Cyt C进行性减少;Glu暴露后6 h,CT-1组神经元胞质内Cytc较Glu组减少了55.7%(P<0.05).结论:Glu诱导海马神经元凋亡的机制涉及线粒体Cyt C释放,激活Caspase级联反应;CT-1对损伤神经元的保护作用可能是经由线粒体信号转导途径、通过减少线粒体Cyt C释放而实现的.  相似文献
8.
氧化应激及其介导的细胞凋亡在糖尿病肾病中的作用   总被引:10,自引:8,他引:2  
氧化应激产生的活性氧簇(ROS)在糖尿病肾病(DN)的发病机制中起重要作用.ROS通过激活线粒体、DNA氧化损伤、NF-κB及影响基因表达等途径诱导细胞凋亡,促进DN病的发生发展.减少ROS的生成及阻断ROS产生后所激活的细胞凋亡途径可成为治疗DN的新靶点.  相似文献
9.
目的探讨Smad3蛋白(smallmother against decapentaplegic)在心肌细胞缺血再灌注损伤中与心肌细胞凋亡之间的关系。方法新生SD大鼠心肌细胞随机分为3组:①正常对照组(A组):在不含处理因素的含10%胎牛血清DMEM培养基在有氧培养箱(37℃、5%CO2和95%空气)中培养48h;②缺血再灌注(IR)诱导凋亡模型组(B组):不含血清的低糖DMEM培养基在缺氧培养箱(95%N2和5%CO2)中培养48h后,再用10%胎牛血清DMEM培养基在有氧培养箱中培养3h;③缺血预适应(IPC)组(C组):不含血清的低糖DMEM培养基在缺氧培养箱中培养6h后,再用10%胎牛血清DMEM培养基在有氧培养箱中培养3h,再进行缺血再灌注(步骤同B组)。结果A组、B组和C组心肌细胞凋亡率分别为(5.89±1.28)%、(26.68±6.17)%、(12.45±1.52)%,具有显著统计学差异。三组细胞Smad 3表达量分别为(21.77±2.32)%、(35.7±2.43)%、(29.47±1.36)%,具有显著统计学差异。结论Smad 3可以诱导心肌细胞缺血再灌注损伤后心肌细胞凋亡,而缺血预适应可抑制Smad 3的表达,从而保护心肌细胞。  相似文献
10.
目的:多房棘球绦虫混合重组BCG-EmⅡ/3和BCG-Em14-3-3疫苗免疫小鼠并以Em原头节攻击后探讨以上疫苗对小鼠脾细胞凋亡的变化.方法:将混合重组BCG疫苗采用皮下注射和鼻腔内接种分别免疫Balb/c鼠8 wk后,用多房棘球绦虫原头节进行攻击感染,感染18 wk杀鼠取脾并分离脾细胞,流式细胞仪检测脾细胞的凋亡发生率,同时设有空载体、BCG和PBS对照.结果:疫苗接种组的脾细胞凋亡发生率明显低于感染对照组.结论:泡球蚴感染可引起小鼠脾细胞凋亡,而多房棘球绦虫混合重组BCG-EmⅡ/3和BCG-Em14-3-3疫苗可在一定程度上抑制感染鼠脾细胞的凋亡.  相似文献
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