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1.
组织工程骨在颅颌面骨缺损临床修复中的应用   总被引:57,自引:1,他引:56  
Chai G  Zhang Y  Liu W  Cui L  Cao YL 《Zhonghua yi xue za zhi》2003,83(19):1676-1681
目的 探索人自体骨髓基质干细胞(hBMS6C)为种子细胞的组织工程骨在治疗临床颅颌面骨缺损中的可行性。方法 自1999到2002年问,选择颅颌面骨缺损病11例(外伤性颅骨缺损4例,先天性梨状孔周围骨凹陷畸形7例)进行治疗研究。从患者髂前上棘穿刺取骨髓,密度梯度离心法分离hBMSC,经体外成骨诱导和扩增至第3代。将诱导的hBMSC,与部分脱钙骨(partly demineralized bone mattix,pDBM)复合,并于体外培养一周后,手术回植骨缺损区。选择3例梨状孔凹陷畸形患者,在凹陷明显侧植入hBMSC/pDBM复合物,对侧轻度凹陷区仅植入单纯pDBM。分别于术后1,3,6,12,24,48,50个月进行临床外形和三维CT检查随访。2例患者在Ⅱ期手术时,取少量植入物活检,行组织学(HE染色),免疫组织化学(骨桥蛋白、骨粘连蛋白)检测。结果 患者三维CT检查结果示术后3~6月能形成组织工程化骨,并修复骨组织缺损。术后1~2.5年的随访表明组织工程骨稳定存在,无明显骨吸收现象,临床治疗效果稳定。组织工程骨活检标本HE染色显示其组织学结构与正常松质骨相同,并有典型软骨内化骨现象。免疫组织化学显示有骨桥蛋白、骨粘连蛋白阳性表达。而植入的单纯部分脱钙骨于术后3~6月吸收,组织学显示为脱钙骨降解碎片和纤维组织的混合物。结论 以自体hBMSC为种子细胞,利用组织工程技术可在人体内形成稳定的工程化骨组织,并临床修复颅颌面骨组织缺损。这项研究的结果为组织工程骨的临床大规模应用奠定了坚实的基础。  相似文献
2.
环氧化酶-2基因在人乳腺癌中的表达及临床意义   总被引:30,自引:0,他引:30  
Guo GL  Yao ZX  Wu J 《Zhonghua yi xue za zhi》2003,83(19):1661-1664
目的 探讨环氧化酶2(COX-2)在乳腺癌发生发展中的表达及其临床意义。方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测了30例乳腺癌患者的癌组织及配对的癌旁组织、6例远离肿瘤的正常乳腺组织中COX-2 mRNA的表达;同时应用免疫组织化学技术检测了COX-2蛋白的表达。结果 COX-2 mRNA在86%的乳腺癌组织(26/30)中表达显著增高,与β-肌动蛋白产物带的积分吸光度比值为0~1.180;癌旁组织表达明显增高,吸光度(A)值为0~0.652:在正常乳腺组织中几乎不表达。癌组织与癌旁组织、正常乳腺组织COX-2 mRNA的表达差异有显著意义。免疫组织化学显示80%(24/30)的乳腺癌组织COX-2呈阳性表达;58%(17/30)癌旁组织COX-2呈不同程度阳性表达,两者比较差异有显著意义;正常乳腺组织未见COX-2蛋白表达。结论 COX-2 mRNA及COX-2蛋白表达在部分癌旁病变中增高,在绝大多数乳腺癌组织中明显增高。COX-2的过度表达发生在乳腺癌的早期,并在其发生发展中起重要作用。为选择性COX-2抑制剂用于乳腺癌高危人群的预防提供了理论依据。  相似文献
3.
Decreased expression of AQP1 and AQP5 in acute injured lungs in rats   总被引:30,自引:0,他引:30       下载免费PDF全文
Objective To determine if aquaporin1 (AQP1) and aquaporin5 (AQP5) are expressed in the alveolar capillary membrane in rats. Moreover, to investigate the alteration of AQP1 and AQP5 in acute injured lungs. Methods The distribution of AQP1 and AQP5 in alveolar capillary membrane were investigated by immunohistochemistry and immunoelectron microscopy with affinity- purified antibodies to human AQP1 and AQP5. To study the possibility that alveolar capillary membrane AQP1 and AQP5 undergo altered regulation, we established a rat model using alveolar instillation of lipopolysaccharide (LPS). Results Immunolabelling showed AQP1 was stained primarily in the microvascular endothelia of normal lungs, while AQP5 was expressed in type Ⅰ pneumocytes. Immunohistochemical analysis showed a significant decrease in the expression of AQP1 and AQP5 in injured lungs at 4h-48h after LPS instillation. AQP1 protein was resumed partly at 24h after LPS instillation and steroid administration, whereas AQP5 was unchanged. Conclusion The decreased expressions of AQP1 and AQP5 in injured lungs suggest that both of them may play a role in abnormal fluid transportation.  相似文献
4.
利用皮肤干细胞的横向分化重建角膜上皮的初步研究   总被引:29,自引:3,他引:26  
目的 观察皮肤干细胞在角膜基质上的分化发育情况,探讨皮肤干细胞重建角膜上皮的可能性。方法 将体外分离培养的1~4代人和兔皮肤干细胞种植在兔角膜基质上,在体外和体内观察皮肤干细胞的分化发育情况。实验标本作HE染色及用人上皮细胞角蛋白K19单克隆抗体和角膜上皮细胞特异性标志蛋白K3/K12抗体AE5进行免疫组织化学鉴定。结果 皮肤干细胞在角膜基质的调控下可以横向分化发育成表达角膜上皮细胞特异性标志蛋白K3/K12的细胞,呈现AE5抗体阳性;并可形成类似角膜上皮外观透明的多层细胞结构。结论 利用皮肤干细胞有可能重建角膜上皮,进行自体生物角膜的构建。  相似文献
5.
脾脏在大鼠肝硬化形成过程中免疫调控机制的探讨   总被引:28,自引:0,他引:28  
汪谦  夏穗生 《中华医学杂志》1995,75(10):594-598
为了解脾脏促进肝硬化形成的机理,作者用CCl4诱导大鼠肝硬化模型,实验动物切脾或注促吞噬肽(Tuftsin),同时分离肝实质、枯否(Kupffer)和贮脂(Ito)细胞,加CCl4和脾条件液或Tuftsin混合培养;并由动物模型肝组织块提取RNA,同5种cDNA探针作分子杂交,从整体、细胞和分子三个不同水平探讨其作用机制。结果表明,在肝硬化模型,与切脾组相比,有脾组动物血中白细胞介素1(IL1)、IL6和肿瘤坏死因子(TNFα)升高(P<0.05)。体外Ito细胞培养发现,加入脾条件液或Tuftsin比单独加CCl4的细胞分泌较多的纤维连接蛋白、层粘连蛋白和I型胶原(P<0.05)。狭缝杂交结果表明,从有脾组动物提取的RNA与TNFα、IL1β、转化生长因子(TGF)β和CollagenI探针杂交比切脾组呈现更高密度的放射自显影图像。作者认为,脾脏促进肝硬化形成的免疫调控是一复杂的过程,促进TGFβ基因的表达可能是引起肝脏纤维过度增生的关键所在。  相似文献
6.
双向分化肿瘤血管生成拟态的组织微阵列研究   总被引:28,自引:1,他引:27  
Hao X  Sun B  Zhang S  Zhao X 《中华医学杂志》2002,82(19):1298-1302
目的 探讨在双向分化肿瘤中是否存在肿瘤细胞通过自身变形并模拟产生血管样通道而达到自身血液供应的方式 ,即血管生成拟态 (VM )。方法 采用免疫组化和PAS双重染色技术研究双向分化肿瘤内血管的生成模式 ,收集双向分化肿瘤恶性黑色素瘤 (高度恶性 30例、低度恶性 30例 ) ,滑膜肉瘤 (高度恶性 2 3例、低度恶性 13例 ) ,间皮肉瘤 (2 6例 ) ,上皮样肉瘤 (4例 )及具有双向分化倾向的腺泡型横纹肌肉瘤 (高度恶性 16例、低度恶性 16例 )共 15 8例 ,制作成组织芯片 ,进行CD31和PAS双重染色 ,通过网格计数法比较这些肿瘤中CD31和PAS阳性图案围成的管道面积 ,以其差异研究血管生成拟态。并且比较高度恶性肿瘤和低度恶性肿瘤血管生成拟态的差异。结果 双向分化肿瘤中CD31和PAS阳性图案围成的管道面积差异具有统计学意义 (P <0 .0 1)。同时观察到细胞异型性小的双向分化肿瘤形成血管生成拟态的例数明显少于瘤细胞异型性大的双向分化肿瘤形成血管生成拟态例数 ,其差异具有统计学意义 (P <0 .0 5 )。在明显具有血管生成拟态的点阵中见PAS阳性的血管样图案内无内皮细胞衬覆但有红细胞存在 ,并可见双向分化肿瘤的瘤细胞可表达CD31抗原和PAS阳性物质。结论 双向分化肿瘤内的肿瘤细胞可通过自身变形并且与细胞外基质  相似文献
7.
清热利湿方药抗肝纤维化的形态学和免疫组织化学定量研究   总被引:26,自引:0,他引:26  
采用猪血清方法复制大鼠肝纤维化模型 ,应用清热利湿方药进行防治 ,观察形态学与免疫组织化学变化。结果表明 :清热利湿方药能保护肝细胞 ,抑制胶原等物质的合成和分泌 ,并加速其降解和吸收 ,从而起到预防和治疗肝纤维化的作用  相似文献
8.
增生性瘢痕组织中血管形成的形态学   总被引:25,自引:1,他引:24  
目的 研究血管形成在增生性瘢痕形成过程中的作用。方法 通过免疫组织化学方法采用CD34抗体对增生性瘢痕组织的微血管进行染色。结果 增生期的增生性瘢痕组织中微血管的含量明显高于萎缩期的增生性瘢痕及正常手术后瘢痕。结论 瘢痕的增生可能具有一定的血管依赖性。  相似文献
9.
Tumor blood vessels formation in osteosarcoma: vasculogenesis mimicry   总被引:24,自引:1,他引:23       下载免费PDF全文
Background Osteosarcoma is characterized by high neovascularization and a high propensity for metastasis through bloodstream. This study was to examine whether there is evidence for vasculogenic mimicry in osteosarooma and to illustrate mechanism of tumor blood vessels formation in osteosarcoma. Methods Osteosarcoma cell lines (U-2OS) were tested for their ability to form tubular networks in three-dimensional culture containing type I collagen. The structures of the tubular networks were observed with phase contrast microscope and transmission electron microscope (TEM). Morphometric studies using hematoxylin and eosin (HE) stain and CD31 immunohistochemical stain to show tumor-lined channels in human osteosarooma were also performed. Results Observation with light microscope and TEM showed that highly aggressive osteosarcoma cell lines (U-2OS) formed networks containing channels when grown in three-dimensional culture containing type I collagen, in the absence of endothelial cells or fibroblasts. Morphometric observation using HE stain and CD31 immunohistochemical stain showed that tumor cell-lined channels were also detected in vivo in osteosarcoma; by comparison, all vascular areas in the pedicel of osteochondroma or outside osteochondroma were endothelial-lined. Conclusion These observations strongly suggest that aggressive osteosarcoma cells may generate vascular channels that facilitate tumor perfusion independent of tumor angiogenesis and have the ability of vasculogenic mimicry.  相似文献
10.
大鼠骨髓间充质干细胞的优化获取及生物学鉴定   总被引:23,自引:3,他引:20  
目的 优化骨髓间充质干细胞的体外获取方法并鉴定。方法 取幼年SD大鼠骨髓,分离骨髓间充质干细胞,观察细胞形态特征、生长状况及表面抗原表达。结果 分离培养的细胞有两种不同的形态,一种为小梭形细胞,一种为大扁平细胞。第9代以前生长性状稳定,增殖能力强,细胞倍增时间为48.2h;超微结构显示为早期幼稚细胞形态;免疫细胞化学检测细胞表达CD44、CD54、CD71,但不表达CD34、CD68、层粘连蛋白;在有限的传代数内,抗原表达无改变;与传统方法相比,细胞纯度高。结论 分离培养的细胞成分单一,具有干细胞特性,适用于干细胞生物学和组织工程学的研究。  相似文献
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