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1.
抗体药物研究进展   总被引:14,自引:0,他引:14  
抗体作为药物用于疾病治疗已有很长历史,其间曾几经周折,但随着抗体立体结构的阐明和分子生物学技术的发展,人们可以利用DNA重组技术进行鼠抗体人源化改造、构建合成或半合成抗体库及噬菌体抗体库,从中获得人源抗体,甚至利用转基因小鼠获得人源抗体。同时人们也可以利用分子生物学技术改良抗体性能,使之有效地到达靶部位,或提高抗体的亲和力,或提高抗体的效应功能。因此,在对疾病发生机制进一步了解的基础上,治疗性抗体前景看好,它们将在人类疾病的治疗中发挥重要作用。  相似文献
2.
一种新型人源化鲑鱼降钙素突变体的构建与表达   总被引:6,自引:0,他引:6  
目的 降低鲑鱼降钙素(sCT)对人体的免疫原性。方法 设计并合成人源化鲑鱼降钙素(11-17)hsCT基因,用基因重组方法构建表达载体,转入大肠杆菌G1724中,经色氨酸诱导表达;用渗透压法处理菌体纯化融合蛋白;以大鼠血清钙浓度降低方法测定hsCT生物活性;用定量Western blot法测定hsCT免疫原性。结果 重组pTrxFus-hsCT质粒在大肠杆菌中获得高效可溶性融合蛋白表达,表达水平达46%以上,并得到纯度约90%的融合蛋白,rhsCT保存了鲑鱼降钙素前体活性的一半以上,免疫原性降低了55%。结论 获得一种新型人源化隆钙素(11-17)hsCT,其保存较高sCT前体的活性,免疫原性明显降低。  相似文献
3.
抗体工程与病理学   总被引:3,自引:0,他引:3  
结合抗肝癌基因工程抗体的制备,概述了抗体工程的工作内容及其与病理学的关系,抗体工程的主要目的之一是制备人的或接近人的,而能在病人体内应用的抗体,一方面它可以来源于单克隆抗体的改造,首先克隆出鼠抗体可变区的轻链及重链成为小抗体或重组成单链抗体及人鼠嵌合抗体等基因工程抗体。另一方面,也可以用免疫过的小鼠脾细胞或者人的淋巴细胞建立鼠、人抗体库,然后抗原从抗体库中筛选出鼠或人的各种类型抗体。鉴于抗体对靶细胞一般只起导向作用,要携带效应分子才发挥杀伤肿瘤细胞的作用或其它作用。常用的“弹头”有毒素及细胞因子等。所以必须将这种基因与抗体基因融合在一起才能表达有作用的融合蛋白。抗体工程还包括抗体的增效或抗体的成熟,以及对照人抗体的结构进行置换,使抗体人源化等。  相似文献
4.
人源化小鼠人源细胞检测方法   总被引:2,自引:2,他引:0  
目的人源化小鼠在人类疾病与再生医学研究中具有广泛应用,为获得一种理想的人源化小鼠检测方法,研究人特异性线粒体序列扩增作为人源化动物模型中人类DNA检测方法的可行性。方法设计人线粒体DNA特异性引物,并用该引物对人脐血造血干细胞嵌合体小鼠进行了检测。结果在人源化动物模型的人类DNA检测中,这种人线粒体DNA的PCR检测方法能够达到理想的特异性与灵敏性,是一种理想的嵌合体小鼠检测方法。结论获得了一种理想的人源化小鼠人源细胞检测方法。  相似文献
5.
治疗性单克隆抗体研究进展及临床应用现状   总被引:2,自引:0,他引:2  
19世纪末,动物来源的抗血清用于肺炎、白喉、麻疹等传染病的早期治疗,显示了一定效果,但毒副作用大,特别是异源蛋白易产生过敏反应.1975年杂交瘤技术问世,开创了抗体技术的新时代.单克隆抗体(以下称单抗)高度的特异性和均一性使其在实验研究和临床检测中得到了广泛应用.自1982年单抗首次应用于人体治疗以来,应用单抗治疗肿瘤、自身免疫疾病,组织器官移植排斥反应等疾病的报道渐多,同时鼠单抗用于人体的毒副作用也越来越明显,使单抗在人体治疗中的应用受到很大限制.随着分子生物学技术的发展,尤其是抗体库技术、鼠抗体人源化改造技术以及近年利用转基因技术研制完全人抗体的突破,为单抗进入临床治疗提供了良好的应用前景.本文就单克隆抗体人源化改造、抗体库技术、转基因小鼠技术研究进展及目前单抗在临床治疗中的应用现状予以综述.  相似文献
6.
肾移植术后单剂应用人源化抗CD3单克隆抗体的临床观察   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的 研究肾移植受者体内应用人源化抗CD3单克隆抗体(OKT3)注射液单次剂量递增给药后的短期和长期安全性.方法 2008年6-12月,共29例肾功能稳定的尸体肾移植受者入选该研究.每位受试者按入组顺序随机分至2.5 mg(n=9)、5.0 mg(n=10)、10.0 mg(n=10)3个剂量组,并于移植术后7~14 d内接受相应剂量的OKT3单次给药.同时选取同期未参加试验的30例肾移植受者作为对照组.所有患者至少随访2年,随访期间监测肝功能、肾功能、血常规等指标,并观察有无其他不良事件.结果 各剂量组受试者在给药后48 h内,出现低热(7/29)、畏寒(4/29)、肝功能损害(2/29)、上呼吸道感染(1/29)和头痛(1/29),未出现明显的首剂效应,其余的不良反应轻微,发生率与剂量无关.随访期间内,试验组和对照组2-年人/肾长期存活率分别为100%/100%和100%/97%;移植肾活检证实的急性排斥发生率分别为6.9%(2/29)和10.0%(3/30),肺部感染发生率分别为10.3%(3/29)和13.3%(4/30).术后1周及3、6、12、24个月监测血肌酐值显示,两组差异均无统计学意义(均P>0.05).结论 人源化OKT3不同剂量单次给药在肾移植受者体内安全性良好,其有望成为一种抗排斥能力强、毒副作用较小的免疫抑制剂.
Abstract:
Objective To evaluate short-term and long-term safety of using single-dose escalation of recombinant humanized anti-CD3 monoclonal antibody (OKT3) in kidney transplantation recipients.Methods A total of 29 recipients of cadaveric kidney transplant from June 2008 to December 2008 were sequently assigned to receive single-dose intravenous injection of OKT3 with different doses of 2. 5 mg( n =9) , 5.0 mg (n = 10) and 10. 0 mg (n = 10) at Days 7 - 14 post-operation. Meanwhile, a control group was established by selecting kidney transplant recipients, who did not participate in the trial in the same period.All patients were followed up for at least 2 years. During this period, liver function, kidney function,hemoglobin and other biochemical indicators were monitored and adverse events recorded over time. Results No obvious first dose effect was observed,except low heat (7/29), chills (4/29) , mild liver damage (2/29) , upper respiratory tract infection and headache (1/29) across all doses. Other adverse reactions were mild, unrelated with doses. The 2-year patients/ grafts survival rates of treatment goup and control group were 100% / 100%, and 100% / 97%, respectively. The incidence of acute rejection confirmed by renal biopsy was 6. 9% (2/29) and 10. 0% (3/30) in treatment group and control group, respectively. The incidence of lung infection was 10. 3% ( 3/29 ) and 13.3% ( 4/30 ), respectively. The values of serum creatinine at 1 week and 3, 6, 12, 24 months showed no statistically significance in two groups ( all P >0. 05). Conclusion It is safe to use single-shot OKT3 intravenously in kidney transplant recipients. The recombinant humanized OKT3 may be an effective immunosuppressive agent with milder toxicity for solid organ transplantation.  相似文献
7.
治疗性单克隆抗体研究新进展   总被引:1,自引:0,他引:1  
治疗性单克隆抗体的快速发展在人类以肿瘤为主的多种疾病的治疗方面发挥至关重要的作用。为了降低鼠源抗体引起的超敏反应,治疗性单克隆抗体已由改型抗体,人源化抗体发展到全人抗体。随着生物技术的不断发展,相信人源化单克隆抗体的前景会越来越广泛。  相似文献
8.
目的:建立抗HER2人源化单克隆抗体体内外抗肿瘤活性的评价方法.方法:利用HER2表达阳性的人乳腺癌细胞系BT-474建立抗HER2单抗体内外活性评价方法,对上海市细胞工程重点实验室制备的抗HER2人源化单抗的体外生物学活性、抗体依赖的细胞介导的细胞毒性、对BT-474荷瘤裸鼠的治疗作用及荷瘤裸鼠瘤体组织H-E染色及免疫组化检测rhHER2-mAb的分布与Herceptin进行了比较研究.结果:建立了完整的该人源化单抗的体内外活性评价方法,测评结果显示,上海市细胞工程重点实验室制备的抗HER2人源化单抗在体外有效抑制BT-474细胞增殖,与Herceptin体外生物学活性相似,EC50分别为148.3和145.9 ng/ml;可通过ADCC效应杀伤BT-474细胞,与Herceptin的EC50值一致,分别为185.0和183.9 ng/ml;抑制BT-474裸鼠异种移植模型肿瘤的生长,与无关抗体治疗组或PBS治疗组相比具有统计学差别(P<0.05),与Herceptin抑制能力接近,4 mg/kg剂量组相比没有统计学差别;免疫组织化学检测显示抗体集中分布于肿瘤组织.结论:建立的评价方法可对抗HER2单抗的抗肿瘤活性进行客观准确的评价,国内研制的抗HER2人源化单克隆抗体与进口同种抗体相比具有相同的体内外活性.  相似文献
9.
治疗性单克隆抗体市场现状及其展望   总被引:1,自引:0,他引:1  
继重组蛋白领域的商业成功之后,治疗性单克隆抗体正掀起生物技术工业近二十年来的第二次创新高潮。2002年,全球治疗性单克隆抗体市场较2001年增长37%,达到了54亿美元。其中嵌合型单克隆抗体占有绝对领先地位,它们的年增长率高至43%,销售额为38亿美元;其次是人源化单克隆抗体,它们的销售额超过14亿美元,年增长率约29%。  相似文献
10.
目的 利用已建立的胃癌人源化异种移植瘤(Patient-derived xenograft,PDX)模型建立胃癌细胞系,并对建立的胃癌细胞系进行生物学特性评价.方法 选择12例生长状态良好的胃癌PDX模型,待小鼠移植瘤体积生长至500~900mm3时,取出肿瘤组织进行癌细胞的原代培养建立细胞系,通过细胞形态学观察、染色体分析、短片段重复序列(STR)分析、免疫组织化学染色、体外药敏及体内成瘤实验对其生物学特性进行分析鉴定,并在此基础上利用建立成功的胃癌细胞系进行化疗药物药效学评价.结果 12例PDX模型中共成功建立6例胃癌细胞系,细胞系可稳定多次传代.选择其中2例胃癌细胞系(GAXC031和GAXC066)进行生物学特性鉴定.遗传学结果证实,这2例细胞系来自亲本PDX模型,符合恶性胃癌的遗传学特征,在裸小鼠体内具有致瘤性.由细胞系建立的移植瘤模型在保留主要临床生物学特征的前提下,具有成瘤率高,潜伏期短,生长均一性好等特点.体外和体内药敏实验结果均表明,GAXC031对5-氟尿嘧啶有一定的敏感性[体外半抑制浓度(IC50)为0.265μmol/L,体内肿瘤生长抑制率(TGI)为30%~50%],而GAXC066不敏感(体外IC50为>200 μmol/L,体内TGI<0);2例细胞系对顺铂的敏感性均较强(TGI>60%).结论 成功建立了6例人源胃癌细胞系.对GAXC031和GAXC066细胞系全面的分析和鉴定显示,细胞系与亲本PDX模型高度相关.细胞系体内外药敏实验结果显示,对同一个化疗药物,其体内与体外数据间存在很高的一致性.这些细胞系及相关模型可用于抗癌药物的研发和肿瘤基础研究.  相似文献
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