VSD引流术结合重组人碱性成纤维细胞生长因子及液体敷料对糖尿病足溃疡的临床疗效及疼痛影响观察

目的:探讨负压封闭引流术(VSD)结合重组人碱性成纤维细胞生长因子及液体敷料对糖尿病足溃疡的临床疗效及疼痛影响观察.方法:选取2019年5月～2021年5月期间某院收治的98例糖尿病足溃疡患者作为研究对象,随机将所有患者分为研究组和对照组各49例,研究组采用VSD引流术结合重组人碱性成纤维细胞生长因子及液体敷料进行治疗,给予对照组普通换药治疗方式,并对比两组患者临床疗效及对患者疼痛程度的影响.结果:研究组临床总有效率为95.92％,明显高于对照组的73.47％(P<0.05);治疗7d及治疗14d后,研究组目前疼痛状况(PPI)、视觉模拟评定法(VAS)、疼痛评级指数(PRI)评分均明显低于对照组(P<0.05);研究组换药次数明显少于对照组,创面愈合时间、抗生素使用时间及住院时间均明显短于对照组(P<0.05).结论:针对糖尿病足溃疡患者,采用VSD引流术结合重组人碱性成纤维细胞生长因子及液体敷料对其进行治疗,可有效促进创面愈合、减轻患者疼痛程度,能够减少患者换药次数与抗生素使用时间,缩短患者创面愈合时间与住院时间,临床疗效较好,值得应用.     

IGF-2、AFP、ALP、r-GT在原发性肝癌模型小鼠血清中的表达水平

目的:研究胰岛素样生长因子-2（insulin like growth factor，IGF-2）、甲胎蛋白（alpha fetoprotein，AFP）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）、r－谷氨酰转肽酶（r-glutamyl transferase，r-GT）在原发性肝癌模型小鼠血清中的表达水平。方法:选择SD健康雄性小鼠35只，按照随机数字法分为正常组和原发性肝癌组两组，分别有10只和25只小鼠。正常组小鼠不做任何处理，原发性肝癌组小鼠制成原发性肝癌模型，造模成功的共22只小鼠。免疫透射比浊法检测IGF-2、电化学发光免疫分析检测AFP的血清水平、双抗体夹心法检测ALP、r-GT水平表达、荧光定量RT-PCR技术检测IGF-2 mRNA、AFP mRNA、ALP mRNA、r-GT mRNA表达水平。结果:正常组小鼠肝组织细胞大小均匀，形态一致；原发性肝癌组小鼠肝组织细胞大小不等，细胞核形态多样，多有核分裂现象。原发性肝癌组小鼠的血清中IGF-2和IGF-2 mRNA水平均显著高于正常组的健康小鼠（P＜0.05）；原发性肝癌组小鼠的血清中AFP和AFP mRNA水平均显著高于正常组的健康小鼠（P＜0.05）；原发性肝癌组小鼠的血清中ALP和ALP mRNA水平均显著高于正常组的健康小鼠（P＜0.05）；原发性肝癌组小鼠的血清中r-GT和r-GT mRNA水平均显著高于正常组的健康小鼠（P＜0.05）。结论:原发性肝癌模型小鼠血清中IGF-2、AFP、ALP、r-GT水平都呈高水平表达，检测其血清中的水平对原发性肝癌的诊断有重要价值。     

口炎清颗粒联合重组牛碱性成纤维细胞生长因子治疗急性放射性口炎的临床疗效

目的观察口炎清颗粒联合重组牛碱性成纤维细胞生长因子(rb-bFGF)治疗急性放射性口炎的临床疗效。方法将72例头颈部恶性肿瘤患者平均分为实验组和对照组,每组36例。实验组于放疗开始服用口炎清颗粒,放疗1周后使用rb-bFGF喷剂;对照组于放疗开始服用B族维生素,同时使用复方硼砂含漱液漱口。比较2组患者放射性口炎各周期的程度分级和数字疼痛评分(NPRS)。结果放疗第3～7周后,实验组NPRS评分均低于对照组同期,差异有统计学意义(P<0. 05);实验组口腔黏膜炎的分级发生率均低于对照组同期,差异有统计学意义(P<0. 05)。结论口炎清颗粒联合rb-bFGF喷剂可有效减轻炎症反应,缓解患者的疼痛症状,促进创伤黏膜的恢复,对急性放射性口炎有较好的临床效果。     

毛蕊异黄酮抑制肺腺癌细胞增殖和迁移的miR-21/PTEN信号通路机制研究

目的:探讨毛蕊异黄酮(CA)通过调控微RNA-21(miR-21)/人类第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)信号通路对肺腺癌细胞增殖和迁移的抑制作用机制。方法:以人肺腺癌SPC-A1细胞为对象,采用MTT法检测不同剂量CA(5、15、25、50、75、100μg/mL)作用12、24、48、72 h后的细胞增殖情况,并计算细胞存活率、30%细胞生长抑制浓度(IC_(30))和半数抑制浓度(IC_(50));采用Transwell迁移试验检测低、中、高剂量CA(50、75、100μg/m L)作用24 h后的细胞迁移情况,记录染色细胞数并计算细胞迁移抑制率;采用蛋白质印迹法和实时聚合酶链反应法检测低、中、高剂量CA(50、75、100μg/mL)作用24 h后细胞miR-21以及PTEN、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白及其mRNA的表达情况;检测细胞在分别转染miR-21模拟物(mimic)和抑制物(inhibitor)后,CA(75μg/mL)对其miR-21及PETN、VEGF、MMP-9蛋白表达的影响。结果:经50、75、100μg/mL CA作用12、24、48 h,25、50、75、100μg/m L CA作用72 h后,细胞存活率均显著降低(P<0.05或P<0.01);12～72 h各时间点CA的IC_(30)值分别为82.24、50.45、46.34、31.81μg/mL,IC_(50)值分别为108.06、73.35、70.08、49.89μg/mL。与正常对照组比较,CA各剂量组染色细胞数,低剂量组细胞中VEGF蛋白以及中、高剂量组细胞中miR-21,VEGF、MMP-9蛋白及其mRNA的相对表达量均显著减少或降低,且中、高剂量组显著少于或低于低剂量组,高剂量组显著少于或低于中剂量组(P<0.05或P<0.01);CA各剂量组细胞迁移率以及中、高剂量组细胞中PTEN蛋白及其mRNA的相对表达量均显著升高,且中、高剂量组显著高于低剂量组,高剂量组显著高于中剂量组(P<0.05或P<0.01)。转染miR-21 mimic后,miR-21 mimic组细胞miR-21及VEGF、MMP-9蛋白的相对表达量均较正常对照组显著升高,PTEN蛋白的相对表达量显著降低(P<0.01);加入CA干预后,细胞中miR-21及VEGF、MMP-9蛋白的相对表达量均较miR-21 mimic组显著降低,PTEN蛋白的相对表达量均显著升高(P<0.05或P<0.01)。转染miR-21 inhibitor后,miR-21 inhibitor组细胞中miR-21及VEGF、MMP-9蛋白的相对表达量均较正常对照组显著降低,PTEN蛋白的相对表达量显著升高(P<0.05或P<0.01);加入CA干预后,细胞中miR-21及上述蛋白的表达较miR-21 inhibitor组均未见明显变化(P>0.05)。结论:CA可剂量依赖性地抑制肺腺癌SPC-A1细胞的增殖和迁移,且这种作用可能与调控miR-21/PTEN信号通路有关。     

2-乙酰基毛蕊花糖苷抗破骨细胞形成及其作用机制

目的 研究2-乙酰基毛蕊花糖苷对破骨细胞分化的影响及潜在的分子机制。方法 采用抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色及TRAP酶活力检测法评价0.1、1.0、10.0 μmol·L^–1的2-乙酰基毛蕊花糖苷对破骨前体细胞向破骨细胞分化的影响；采用细胞增殖活性检测试剂盒（CCK8）法检测2-乙酰基毛蕊花糖苷对破骨细胞分化的影响；采用F-actin环染色和骨陷窝形成实验检测2-乙酰基毛蕊花糖苷对破骨前体细胞诱导形成的破骨细胞功能的影响；采用蛋白免疫印迹法（WB）检测破骨细胞分化相关特异性蛋白TRAP、整合素β₃（ITGβ₃）和细胞原癌基因c-Fos的表达水平。结果 与模型组相比，2-乙酰基毛蕊花糖苷显著降低TRAP活性（P<0.05），且对破骨前体细胞活力未见显著影响，提示2-乙酰基毛蕊花糖苷显著抑制破骨细胞形成。F-actin环染色和骨陷窝形成实验也显示2-乙酰基毛蕊花糖苷显著抑制破骨细胞骨吸收功能；WB实验结果表明2-乙酰基毛蕊花糖苷可显著抑制破骨细胞分化特异性蛋白TRAP、ITGβ₃和c-Fos等蛋白水平的表达。结论 2-乙酰基毛蕊花糖苷能抑制破骨细胞的形成，作用机制可能与其抑制TRAP、ITGβ₃和c-Fos的表达有关。     

蓉黄颗粒对肾虚湿热证非透析慢性肾脏病矿物质和骨异常患者骨代谢的影响

目的?探讨蓉黄颗粒对肾虚湿热证非透析慢性肾脏病矿物质和骨异常（CKD - MBD）患者血清骨特异性碱性磷酸酶（BALP）、血清抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）水平的影响。方法?将70例肾虚湿热证非透析CKD - MBD患者，按随机数字表法分为对照组和治疗组，每组35例。另选20名健康体检者作为正常组。对照组采用相应的对症治疗（如控制血压、纠正贫血、抑制甲状旁腺功能亢进症）；治疗组在此基础上加用蓉黄颗粒（由肉苁蓉、生大黄、牛膝、蒲公英、六月雪、姜竹茹、茯苓、桃仁、甘草组成，每袋10 g，含生药量28 g，每次1袋，每日3次，温开水冲服）；两组均治疗12周。观察两组患者脱落情况；临床疗效及治疗前后血肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）、血清钙、磷、肾小球滤过率（eGFR)、甲状旁腺激素（iPTH）、BALP和TRAP水平。结果?最终完成61例，对照组30例，治疗组31例。治疗组总有效率［68.57%（24/35）］优于对照组［42.86%（15/35），χ2=4.69，P<0.05］；两组治疗后中医证候积分值均明显下降（P<0.05，P<0.01），但治疗组下降幅度优于对照组（P<0.05）。两组治疗后SCr、BUN、eGFR、钙、磷、iPTH均较治疗前改善（P<0.05，P<0.01），且治疗组均优于对照组（P<0.05，P<0.01）。两组治疗前血清BALP、TRAP水平明显高于正常组（P<0.01）；与本组治疗前比较，治疗组治疗后BALP、TRAP水平均显著降低（P<0.05），且下降幅度均大于对照组（P<0.05）。结论?肾虚湿热证非透析CKD - MBD患者BALP、TRAP水平均显著高于正常人群，蓉黄颗粒能有效降低肾虚湿热证非透析CKD - MBD患者的证候积分，降低血清磷、iPTH、SCr、BALP、TRAP水平，升高血清钙、eGFR水平。     

重组碱性成纤维细胞生长因子通过Notch1信号通路对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞的保护作用

目的　探讨重组碱性成纤维细胞生长因子(recombinant basic fibroblast growth factor,rbFGF)通过Notch1信号通路对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞(retinal ganglion cell，RGC)的保护作用。方法　雄性SD大鼠40只，随机分成对照组、糖尿病组、rbFGF组、rbFGF+DAPT组(DAPT为Notch1通路的特异性拮抗剂)，每组10只。后三组大鼠采用单次腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ) 诱导糖尿病模型。模型诱导成功后，rbFGF组给予rbFGF 10 μL(200 U)玻璃体内注射给药，rbFGF+DAPT组在给予rbFGF基础上加用DAPT(10 μmol·L^-1)。注射12周后，HE染色检测RGC密度，免疫组织化学染色检测神经元再生相关蛋白GAP-43、Notch1蛋白表达，Western blot检测GAP-43、Notch1蛋白及凋亡相关蛋白Caspase-3相对表达量。结果　与对照组RGC密度(433.49±6.02)个·mm^-2，GAP-43荧光强度(8.96±0.26)%、Notch1阳性率(45.04±0.46)%及Caspase-3 (27.91±0.63) %蛋白表达相比，糖尿病组RGC密度(328.35±6.43)mm^-2，Notch1荧光强度(31.66±0.40)%蛋白表达明显降低，GAP-43荧光强度(13.66±0.52)%、Caspase-3 (48.91±0.64)%蛋白表达明显增加(均为P<0.05)；而与糖尿病组相比，rbFGF组RGC密度(425.30±7.98)个·mm^-2，Notch1阳性率(41.76±0.62)% 及GAP-43荧光强度(33.05±0.37)%蛋白表达明显增加，Caspase-3 (28.86±0.71)%蛋白表达明显降低(均为P<0.05)；而rbFGF+DAPT组RGC密度(324.91±8.22)个·mm^-2，GAP-43荧光强度(14.27±0.64)%、Notch1阳性率(30.40±0.82)%及Caspase-3 (47.63±0.68)%蛋白表达均无明显变化(均为P>0.05)。结论　rbFGF可上调糖尿病状态下视网膜GAP-43蛋白表达，下调Caspase-3蛋白表达，进而提高RGC的存活，其机制可能与激活Notch1信号通路有关。