破血化瘀、填精补髓中药汤剂对实验性脑出血大鼠Keap1-Nrf2/HO-1途径相关蛋白表达的影响

目的观察以破血化瘀、填精补髓法组方的中药汤剂对实验性脑出血模型大鼠Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)、核转录因子E_2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶(heme oxygenase,HO)-1蛋白表达的影响。方法将64只Wistar雄性大鼠随机分为4组:假手术组、模型组、脑血康胶囊阳性对照药组(简称阳性药组),以及破血化瘀、填精补髓中药汤剂组(简称汤剂组),每组16只。采用尾状核注射自体血方法制作大鼠脑出血模型,分别给药(1次/d),3天后,麻醉下取大鼠脑组织,检测脑含水量,采用HE染色观察鼠脑尾状核神经细胞的形态变化,采用免疫组织化学方法检测各组大鼠脑组织Keap1、Nrf2、HO-1的表达变化。结果模型组大鼠脑含水量与假手术组比较明显增加(P0.05);阳性药组和汤剂组脑含水量与模型组比较均明显下降,尤以汤剂组下降明显(P0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠脑尾状核血肿区可见大量红细胞浸润,神经细胞数目减少,胶质细胞增多,间质水肿明显,神经细胞排列紊乱、稀疏、淡染;与模型组比较,汤剂组和阳性药组大鼠脑尾状核均可见少量红细胞浸润,神经细胞略微肿胀,间质水肿较轻,神经细胞排列略疏松。与假手术组比较,模型组大鼠脑组织Keap1、Nrf2和HO-1的表达增加(P0.01);与模型组比较,阳性药组和汤剂组大鼠脑组织肿Keap1、Nrf2和HO-1表达减少(P0.01),其中汤剂组较阳性药组改善显著(P0.05)。结论破血化瘀、填精补髓中药汤剂可通过Keap1-Nrf2/HO-1途径改善脑组织氧化应激状态,进而保护脑出血后继发损伤的脑组织。     

小柴胡汤和当归芍药散单方及合用对免疫性肝损伤的保护作用

目的考察小柴胡汤和当归芍药散单方及合用对免疫性肝损伤的保护作用。方法昆明小鼠72只随机分为6组,空白组、模型组、小柴胡汤组(6.63 g/kg)、当归芍药散组(11.31 g/kg)、小柴胡汤合当归芍药散(柴归汤)组(17.94 g/kg)和阳性药(联苯双脂合甘草酸二铵)组(0.2μg/g,0.3μg/g)。除空白组外,其余各组采用刀豆蛋白A(Con A)尾静脉注射制造免疫性肝损伤模型,各组采取相应干预7天。采用动物半自动生化分析仪检测ALT、AST、ALB和TP水平;HE染色观察肝组织病理切片;比色法检测肝组织SOD活性、MDA和GSH含量;ELISA法检测TNF-α、IL-1和IL-6;Western blotting法检测Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达;APAAP法检测T淋巴细胞亚群。结果与模型组比较,小柴胡汤组可降低ALT和AST水平,减少IL-1,降低MDA含量,显著降低Bcl-2蛋白表达;当归芍药散组可降低ALT水平,降低血清TNF-α、IL-1和IL-6炎症因子,并降低Bcl-2蛋白含量;小柴胡汤合当归芍药散对上述指标均有显著保护作用,对各指标改善优于单方,且能显著改善血清CD4~+/CD8~+比值。结论小柴胡汤和当归芍药散均能够保护刀豆蛋白A所致免疫性肝损伤,两方合用优于单方,其机制与提高抗氧化、抗凋亡能力及调节免疫失调多方面作用有关。     

携带凋亡素基因的溶瘤腺病毒ATV对人宫颈癌HeLa细胞的抑制作用

目的:探讨携带凋亡素基因(apopptin)的溶瘤腺病毒ATV感染对人宫颈癌HeLa 细胞自噬和凋亡的影响。方法: 分别用携带凋亡素基因的溶瘤腺病毒ATV与对照病毒Ad-MOCK(均为前期工作构建）感染HeLa 细胞后，应用WST-1 法检测ATV感染对HeLa 细胞增殖的影响，流式细胞术检测ATV感染对HeLa 细胞凋亡和细胞周期的影响，Western blotting 法检测ATV感染对HeLa 细胞自噬相关蛋白LC3、P62 与mTOR表达的影响，MDC染色法检测ATV 感染对HeLa 细胞自噬水平的影响。结果:ATV感染后抑制HeLa细胞增殖，并具有一定的时间效应关系；以ATV 100 MOI感染72 h 后抑制率达到59.26%，其抑制能力明显强于同时间段对照组(P<0.01)。ATV 感染48 h，ATV 组HeLa 细胞凋亡率显著高于对照组[(38.995±4.009)% vs (14.680±1.174)%,P<0.01]。感染后的HeLa 细胞，随着ATV 作用时间的延长，S 期出现阻滞，48 h 阻滞最强，显著高于对照组[ 58.490±2.447)% vs (43.235±4.419)%，P<0.05]。与对照组相比，ATV 感染HeLa 后，LC3 表达量6、12 h 逐渐增高，12 h 达到最大值（P<0.01），24 h 表达量最低（P<0.01）；P62 蛋白在24 h 出现最高表达水平（P<0.01）；而mTOR随着作用时间延长逐渐降低（48 h 时，P<0.01）。荧光显微镜下可见HeLa细胞核周区域MDC阳性染色，随着ATV作用时间延长，自噬小体明显增多；与对照组相比，6、12h 自噬小体数量显著增多(28.000±2.828) vs (8.500±2.121), (37.000±4.243) vs (14.000±1.414)；均P<0.01]，24 h 相对减少[(12.000±2.828) vs (17.000±1.414)，P<0.01]。结论: 携带凋亡素基因的ATV溶瘤腺病毒可促进人宫颈癌HeLa 细胞的凋亡和自噬水平，进而特异性杀伤肿瘤细胞。     

益肾达络饮对EAE小鼠PKAC-a、RhoA表达的影响

目的研究PKA-RhoA信号传导通路在EAE发病中的作用,观察中药复方益肾达络饮干预实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的疗效,探讨益肾达络饮治疗EAE的作用机制,以及对EAE小鼠中枢神经损伤后神经再生的作用。方法采用Western blot方法测定各组小鼠脑和脊髓组织中PKAC-a、RhoA的含量,旨在了解PKAC-a、RhoA在EAE发生后的作用以及益肾达络饮对神经再生的作用情况。结果检测脑组织中PKAC-a表达显示,正常组和模型组、中药组、激素组均有差异(P值均0.05);模型组和抑制剂组、中药组、激素组均有显著性差异(P值均0.05);中药组和激素组有极显著性差异(P值0.01)。RhoA根据多项比较组间P值可知:脊髓组织中,正常组和模型组、激素组、中药+激素组、抑制剂组均有差异(P值均0.05);模型组和抑制剂组有显著性差异(P值0.05),和中药组、激素组、中药+激素组有极显著性差异(P值0.01);脑组织中,模型组和中药+激素组有显著性差异(P0.05),和中药组有极显著性差异(P值0.01)。结论 cAMP-PKA-RhoA信号通路与p38MAPK的表达有关,多发性硬化(MS)在中枢神经系统中存在发病部位的区别,中药益肾达络饮和激素醋酸泼尼松在促进中枢神经再生时均有疗效,作用大小不同。     

东北梅花鹿药用价值新探

论述鹿齿、鹿肝、鹿脂、鹿粪及鹿胎粪等的药物来源、性状、采收加工方法、功能主治、用法、用量与贮藏方法等.如鹿齿质坚硬,较马鹿齿相应略小,四季均可采收；气微,味微成；具有行血、消肿的作用；主治鼠痿(淋巴结核)、疮疡等证；少内服,多制成乳油液加少量细粉敷于患处,置阴凉干燥处,防霉,防蛀.梅花鹿尾首载于《青海药材》,为名贵中药；我国民间早期用其作滋补强壮剂使用；现多入成方制剂；气微,味咸；具有补肾壮阳,强腰健膝等功能；主治阳痿遗精,腰背疼痛不能屈伸,头晕目眩等病证；对妇女子宫脱垂有良效.阳盛有热者忌服.鹿脂为梅花鹿或马鹿的脂肪或脂肪油,首载于《新修本草》；性状呈黄白色块状、条状或片状,长15～20 cm,宽10～ 15 cm,厚2～5 cm,具有油脂光泽,半透明,体轻,柔软；脂肪油灰白色,似冷凝猪脂样,质硬,滑腻.四季均可采收；洗净,切成小块,阴干；具有消痈散肿,温中,通腠理的作用；主治痈肿死肌,风头,四肢不遂等症；外用治面部疮疱等.     

王孟英保津养阴思想的临床应用特色

介绍王孟英保津养阴的学术思想。王氏保津养阴的临床应用特色主要包括祛邪保津、首重肺胃,肺胃与肾、养阴有别,甘凉濡润、大剂挽危,药食相合、显效益彰4个方面。     

王肯堂辨治病证注重运气

王肯堂临床辨证施治凭借运气之法,在内、外、儿、妇及五官各科等方面均有建树。其临证运用运气的特点包括5个方面:宗《内经》之学,集各家之说;以图文并茂,释运气之理;依中运为纲,类临床之证;凭运气学说,阐疾病之机,借气运理论,析君相二火。王氏应用运气学说诊疗疾病的丰富经验值得后学借鉴,为现代中医深刻认识运气学说的价值提供了重要参考。     

胡永盛运用密谷明目饮治疗暴盲经验

介绍胡永盛治疗暴盲经验。认为本病主要由痰火蒙蔽、肝体本虚而致,治以泻火化痰、养肝荣目之自拟密谷明目饮。并举验案1则。     

张锡纯治疗心悸辨证用药特色探析

目的:通过对《医学衷中参西录》上、中、下3册心悸医案的分析,探讨张锡纯治疗心悸的辨证用药特色,为临床辨证治疗心悸病提供实用而科学的指导.方法:采用Excell人工录入医案,进一步规范名词术语,进行结构化处理,并进行频数的分析.结果:常见的诱因为劳累、产后;常见的脉象为数脉、无力脉、弱脉等;常用药物依次为:山茱萸、山药、生白芍、黄芪等;常用的药对为:龙骨与牡蛎、山茱萸与白芍、山茱萸与山药等.结论:张锡纯独具特色的论治方法,主要体现在对发病诱因、脉诊资料以及药物选择3个方面的重视,符合个体化的诊疗思想,值得借鉴.