Sema 4D与神经系统疾病相关性的研究进展

<正>信号素(Semaphorin,Sema)是分泌和膜相关的糖蛋白,根据其结构要素和氨基酸序列相似性分为8类,1类和2类发现于无脊椎动物;而3～7类存在于脊椎动物;第8类则由病毒编码~([1])。其中Sema 4D是第一个被发现的具有免疫特异性的分泌和膜结合蛋白,其在神经元和少突胶质细胞的迁移和分化、中枢神经系统炎症和神经变性中起重要作用。本文拟对Sema 4D与神经系统疾病相关性的研究进展作一综述。     

CT-1对脐血间充质干细胞神经分化作用

目的探讨心肌营养素1(CT-1)在诱导脐血间充质干细胞(hUCB-MSCs)向神经细胞分化中的作用。方法培养hUCB-MSCs,流式细胞术检测表面标志物CD34、CD29、CD44及CD105;将携带CT-1的腺病毒(Adv-CT-1)感染hUCB-MSCs,在不同时间点用免疫荧光染色检测CT-1表达率,摸索最佳感染复数(MOI);将细胞分为4组:(1)对照组;(2)神经诱导剂组(NIM);(3) CT-1组(Adv-EGFP-CT-1+NIM);(4)空病毒组(Adv-EGFP+NIM)。于6 h和4 d检测各组神经相关蛋白标志物(nestin、NeuN、GFAP)表达。结果 hUCB-MSCs高表达CD29、CD44、CD105,不表达CD34; MOI最佳转染复数为100PFU/细胞。诱导后6 h,CT-1组呈现类神经细胞样形态改变,Nestin阳性率最高(86. 82%±4. 29%),与其他3组相比,差异有统计学意义(P <0. 05);至4 d时,各组Nestin表达明显减少;诱导后6 h,CT-1组NeuN、GFAP均有少量表达(14. 26%±2. 20%、16. 96%±4. 41%),随后逐渐升高,4 d时阳性率分别达(48. 33%±2. 53%)、(65. 83%±5. 17%); CT-1组阳性率均高于其他各组(P <0. 05)。结论CT-1可促进hUCB-MSCs向神经细胞分化。     

雷公藤多苷联合中等剂量泼尼松治疗成人原发性肾病综合征meta分析

目的系统评价雷公藤多苷联合中等剂量泼尼松治疗成人原发性肾病综合征(PNS)的有效性与安全性,为临床治疗策略提供依据。方法系统检索中国生物医学文献数据库(CBM)、中国知网(CNKI)、维普、万方、Cochrane、Pub Med、Embase及科学引文索引(SCI)数据库,采用Cochrane协作网RCT质量评价标准评价纳入研究的质量,meta分析提取数据。结果 (1)共纳入6个RCT,PNS患者共374例,其中试验组190例,对照组184例,纳入研究质量一般。(2)疗效评价:完全缓解[相对危险度(RR)=1.23,95%CI(1.01,1.50)],两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);部分缓解[RR=1.08,95%CI(0.79,1.47)],两组比较,差异无统计学意义(P>0.05);总体疗效描述性分析,试验组可能优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)生化指标:24 h蛋白尿[标准化均方差(SMD)=-0.95,95%CI(-1.51,-0.38)],血浆清蛋白[SMD=1.19,95%CI(0.14,2.24)]。(4)纳入6个研究报道不良反应[RR=0.35,95%CI(0.25,0.50)],两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论与单用足量泼尼松比较,雷公藤多苷联合中等剂量泼尼松治疗PNS能明显提高临床疗效,减少不良反应的发生。但纳入研究质量一般,建议临床慎用。     

宫颈癌术后阴道残端感染对机体TLRs信号通路及免疫功能的影响

目的探讨宫颈癌术后阴道残端感染对机体Toll样受体(toll-like receptors,TLRs)信号通路及免疫功能的影响。方法选取2014年2月-2018年4月于遵义医学院附属医院行手术治疗的144例宫颈癌患者为考察对象,并依据患者术后阴道残端感染与否分为感染组(n=51)和非感染组(n=93)。测定并比较两组患者手术前后TLRs信号通路相关指标、免疫功能及其他血生化指标水平变化。结果非感染组患者TLR4(0.13±0.01)×10~(-2)和TLR9(0.09±0.05)×10~(-2)水平低于感染组(0.98±0.02)×10~(-2)、(0.25±0.14)×10~(-2)(P<0.05);与手术前相比,手术后感染组患者CD_3~+T淋巴细胞比例、CD_4~+/CD_8~+、NK细胞比例均降低(P<0.05),且低于非感染组(P<0.05);与手术前相比,手术后感染组患者IgM、IgG、IgA水平均降低(P<0.05),且低于非感染组(P<0.05);与手术前相比,手术后感染组患者CRP、IL-6、PCT水平均升高(P<0.05),且高于非感染组(P<0.05);非感染组患者CRP、IL-6、PCT水平手术前后比较差异无统计学意义。结论宫颈癌术后阴道残端感染可对患者TLRs信号通路和免疫系统产生更深远的影响,而明确术后感染原因和发病机制对提高患者预后效果具有重要意义。     

地榆对子宫内膜癌细胞凋亡及炎症因子表达的影响

目的研究地榆对子宫内膜癌细胞凋亡及炎症因子表达的影响。方法体外培养人子宫内膜癌HEC-1-B细胞,分别用浓度为0.25、1.00、4.00 mg/ml的地榆提取液作用于对数期生长的子宫内膜癌细胞,分别作为地榆低浓度、中浓度、高浓度组,正常培养的细胞为对照组,采用噻唑蓝(MTT)法检测地榆对子宫内膜癌细胞的生长抑制作用,采用流式细胞术测定子宫内膜癌细胞的凋亡情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测子宫内膜癌细胞分泌的白细胞介素(IL)-1β、IL-8和肿瘤坏死因子(TNF)-α含量,采用Western印迹测定子宫内膜癌细胞中活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Cleaved Caspase)-3、促凋亡因子Bax蛋白的表达水平。结果经不同浓度的地榆作用于子宫内膜癌HEC-1-B细胞后,细胞生长明显受到抑制,流式细胞检测结果显示,低浓度、中浓度、高浓度组细胞凋亡率均明显高于对照组,且随着地榆浓度的增加,细胞生长抑制率和凋亡率也增加,差异有统计学意义(P0.05);地榆作用后的子宫内膜癌细胞中凋亡相关蛋白Cleaved Caspase-3和Bax表达水平上调,炎症因子IL-1β、IL-8、TNF-α的表达下调,差异有统计学意义(P0.05)。结论地榆可以抑制子宫内膜癌细胞生长,诱导细胞凋亡,下调细胞中相关炎症因子的表达。     

结直肠癌患者术后感染的病原学特点及免疫功能的变化

目的探讨结直肠癌患者术后感染的病原学特点,分析患者免疫功能指标及炎症因子水平变化。方法选取2015年1月-2017年12月在医院行手术治疗的结直肠癌患者为研究对象,87例术后感染患者为感染组。95例未发生感染患者为对照组。统计感染组患者感染部位和病原学特点;测定并比较两组患者免疫功能和炎症因子水平变化。结果 87例结直肠癌术后感染患者,其中手术部位感染率最高,47例占54.02%,其次为上呼吸道和下呼吸道感染。术后感染患者临床送检标本共检出病原菌90株,其中革兰阴性菌的比例为65.56%(59/90),革兰阳性菌的比例为25.56%(23/90)。感染组患者免疫功能指标CD8+T淋巴细胞、NK细胞水平均低于对照组,CD4+T淋巴细胞水平高于对照组(P<0.05)。感染组患者炎症因子白介素-10(IL-10)水平低于对照组,降钙素原(PCT)水平高于对照组(P<0.05)。结论结直肠癌术后感染可降低患者免疫功能,刺激炎症因子释放,术后感染以革兰阴性菌为主要致病菌。     

人羊膜间充质干细胞膜片的构建及其成软骨诱导的实验研究

目的:探讨应用一种简单的方法构建人羊膜间充质干细胞(human amniotic mesenchymal stem cells,HAMSCs)膜片,并研究其向成软骨细胞分化的潜能,探索利用HAMSCs膜片构建组织工程软骨的可行性。方法:取产妇胎盘通过酶消化法获得HAMSCs,通过流式细胞术鉴定其表型特征;通过免疫荧光检测细胞波形蛋白和CK-19的表达。取第3代HAMSCs通过CCK-8检测细胞增殖活性;取第3代HAMSCs加入成膜片培养基培养以构建HAMSCs膜片;取第3代HAMSCs加入成膜片培养基培养7天,再换用成软骨诱导培养基培养以构建成软骨诱导的HAMSCs膜片。通过流式细胞术检测成膜片诱导后HAMSCs表型分子的表达;扫描电镜(SEM)观察细胞形态和细胞外基质的分泌。RT-PCR定量分析成软骨分化相关基因(SOX9、ACAN、COLⅡ)的表达;HE染色观察细胞形态、分布;甲苯胺蓝和番红染色检测蛋白聚糖的分泌,Ⅱ型胶原免疫组化检测Ⅱ型胶原的表达。结果:流式细胞术结果表明HAMSCs表达间充质干细胞(MSCs)表型。免疫荧光检测结果示:波形蛋白阳性表达,CK-19阴性表达。CCK-8检测结果示:细胞生长曲线呈S型,第3天进入对数生长期,第7天达到顶峰。HAMSCs成膜片诱导后流式结果表明干细胞特性分子CD44、CD73、CD90、CD105仍高表达。SEM结果示:HAMSCs膜片呈复层结构,梭形的细胞分泌大量细胞外基质,细胞被细胞外基质所包埋并逐渐融合。RT-PCR结果显示:与HAMSCs膜片组相比,成软骨诱导的膜片组Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、SOX9 mRNA的表达量显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色结果示:成软骨诱导的HAMSCs膜片可见分布均匀的类圆形细胞并被大量细胞外基质包围;甲苯胺蓝染色结果显示:椭圆形细胞分泌大量细胞胞外基质,成铺路石样排列;番红染色结果示:成软骨诱导的膜片有大量蛋白聚糖分泌;Ⅱ型胶原免疫组化结果示:成软骨诱导的膜片高表达Ⅱ型胶原。结论:本实验应用一种简单的方法在普通培养皿上成功构建了HAMSCs膜片,体外研究证实HAMSCs膜片具有良好的成软骨分化潜能。因此,HAMSCs膜片可以作为软骨组织工程的种子细胞之一,HAMSCs膜片的应用将为软骨缺损修复提供一种新思路。